人白血病細胞の顆粒球/単球系分化誘導におけるプロテインホスファターゼの役割

蛋白磷酸酶在诱导人白血病细胞粒细胞/单核细胞分化中的作用

• 批准号: 06670105
• 负责人: 西川 政勝
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670105/
• 关键词: 活制型ビタミンB_3; 単球系細胞分化; HL-60細胞; プロテインホスファターゼ; ホスファターゼ1型; ホスファターゼ2A型

レチノイン酸(ATRA)、活性型ビタミンD_3(1,25(OH)_2D_3)など数多くの低分子分化誘導物質が知られているが,そのうちATRAは“分化誘導療法"としてAPL患者の治療として臨床的に実用化されている。人骨髄性白血病細胞株(HL-60)の分化・成熟における蛋白脱リン酸化酵素セリン/スレオニンホスファタ一ゼ(PP)系の関与を明らかにするために、1,25(OH)_2D_3による単球系細胞分化誘導におけるホスファターゼ1型(PPI)及び2A型(PP2A)の活性とその発現について検討した。【結果】(1).PP阻害剤カリクリンA自体はHL-60細胞の分化は誘導しないが、l,25(OH)_2D_3による単球系細胞分化・成熟を促進した。(2).1、25(OH)_2D_3でHL-60細胞を刺激すると、PPI活性は細胞質分画で減少し72時間後には刺激前の約50%にまで減少し、核分画及び膜分画のPPI活性はそれぞれ刺激前の1.9倍、1.8倍に増加した。PPI触媒サブユニットの各アイソザイム(PP1α,PP1γ,PP1δ)の変動を検討すると、1,25(OH)_2D_3刺激により細胞質分画よりPP1γが最も早くついでPP1αが減少し、PPIγは核分画及び膜分画に増加、又PPIαは主に膜分画に増加した。PP1δの細胞内分布の変動は軽微であった。(3).PP2Aの活性及び蛋白発現量は1,25(OH)_2D_3でHL-60細胞を刺激しても変化しなかった。(4).HL-60細胞におけるPP1α及びPPIγのmRNA発現は共に1,25(OH)_2D_3刺激により変化しなかったことより細胞質分画でのPP1α及びPPIγの減少は遺伝子発現の変化によるものではないと考えられた。 【考察】ATRAによるHL-60細胞の顆粒球系細胞分化同様、ホスフアターゼ系は1,25(OH)_2D_3による単球系細胞分化・成熟過程にも深く関与していることが考えられる。又、PPI酵素の細胞内分布の変化が、1,25(OH)_2D_3によるHL-60細胞の単球系細胞分化と相関することから、PPI酵素のトランスロケーションは単球系細胞分化過程に密接に関与すると考えられる。このトランスロケーションはPPIのアイソザイム特異的に起こり、PPIα及びPPIγのトランスロケーションが分化過程に重要と考えられる。

ATRA, active-form ATRA D_3 (1,25 (OH)_2D_3) and a number of low molecular weight differentiation-inducing substances are known to be involved in the treatment of APL. The relationship between protein deacidification enzyme activity and differentiation and maturation of HL-60 cell line and the development of 1,25 (OH)_2D_3-induced differentiation of HL-60 cell line were discussed. [Results](1) PP inhibitor A promoted differentiation and maturation of HL-60 cells. (2).1 When HL-60 cells were stimulated with 25 (OH)_2D_3, PPI activity decreased by about 50% after 72 hours of cytosol fractionation, while PPI activity increased by 1.9 fold and 1.8 fold in nuclear fractionation and membrane fractionation. PP1 α, PP1 γ, PP1 δ) was the earliest to decrease in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 α decreased in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 γ increased in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 α decreased in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 γ increased in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 α increased in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 γ increased in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 α decreased in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 γ increased in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 γ increased in the response to 1,25 (OH)_2D_3 stimulation, PP1 γ increased in the response to 1,25 (OH)_2 The intracellular distribution of PP 1 δ is slightly different. (3) PP2A activity and protein production decreased to 1,25 (OH)_2D_3 and HL-60 cells stimulated by PP2A. (4) The mRNA expression of PP1 α and PP1 γ in HL-60 cells was induced by 1,25 (OH)_2D_3 stimulation. [Investigation] ATRA induced HL-60 granulocyte lineage differentiation identity, cell differentiation and maturation of HL-60 granulocyte lineage 1,25 (OH)_2D_3. Furthermore, changes in intracellular distribution of PPI enzymes are closely related to the differentiation of HL-60 cells in vitro, and 1,25 (OH)_2D_3 is closely related to the differentiation of HL-60 cells in vitro. This process is important for PPI's solution-specific initiation, PPI α and PPI γ differentiation.

项目成果

Matsuoka Y 。 , et al 。: "Madiation of the physiological response oh platelets by interactions of spectrin and protein 4。1 with cyto" Biochem 。 Biophys 。 Res 。 Commun. 198. 111-119 (1994)

松冈Y.

Omay S. B. , et al。: "Decreased expression of protein phosphatase type 2A in HL-60 variant (HL-60RA^r)cells resistant to induction" Exp。Hematol。. (in press). (1995)

Omay S. B. 等人。

Kobayashi K 。 , et al: "Forskolin potentiates G-CSF-induced proliferation of a myeloblastic leukemia cell line" Leukemia Res. 18. 111-117 (1994)

小林 K.

Omay S。 B。 , et al。: "Translocation of Protein phoshatasc I catalytic sub。 during 1,25(OH)_2D_3 induced monocytic differentiation of" Cancer Res。. 55. 774-780 (1995)

奥梅·S.

Nishikawa M。 , et al。: "Expression of the catalytic and regulatory subunits of protein phosphatase type 2A may be differentially" Cancer. Res。. 54. 4879-4884 (1994)

西川 M.