GATA,NF-IL6,Splによるコア2GlcNAc転移酵素発現の転写制御

セレクチン依存性細胞接着に関与するシアリルルイス-X(sLeX)糖鎖抗原は遺伝子の直接産物ではなく、その発現が糖転移酵素を通して糖鎖遺伝子の間接支配を受けている。ヒトプレB細胞株分化系を用いた本研究で、我々は遺伝子導入技術により糖鎖生合成システムを人工的にリモデルすることを通して、次のことを明らかにした。1. sLeX抗原がどのタイプの糖鎖(N-グリコシド結合型糖鎖、O-グリコシド結合型糖鎖、糖脂質糖鎖)にでも発現するのではなく、また糖蛋白質であればどの蛋白質にでも発現するのではなく、分子量150kDaの特定の糖蛋白(gp150)上に存在するO-グリコシド型の糖蛋白質性糖鎖の末端にのみ発現する。2. sLeX抗原発現レベルが複数の糖鎖遺伝子による複雑な支配ではなく、一つの糖転移酵素遺伝子(コア2GlcNAc転移酵素:C2GnT)による非常に単純な機構によりコントロールされている。3. 本システムの律速酵素C2GnTの発現が転写調節レベルでどのように制御されているかをルシフェラーゼアッセイ,EMSA,RNA blottingによって解析し以下のことを明らかにした。(1) GATA,NF-IL6,Splといった転写調節因子の結合領域が関与している。(2) GATA3,NF-IL6,C/EBPγ,Sp3,Sp4の発現レベルがC2GnT遺伝子発現レベルに呼応している。以上の結果は英文誌に発表済みないし発表予定である。

セレクチン依存性細胞接着に関与するシアリルルイス-X(sLeX)糖鎖抗原は遺伝子の直接産物ではなく、その発現が糖転移酵素を通して糖鎖遺伝子の間接支配を受けている。ヒトプレB細胞株分化系を用いた本研究で、我々は遺伝子導入技術により糖鎖生合成システムを人工的にリモデルすることを通して、次のことを明らかにした。1. sLeX抗原がどのタイプの糖鎖(N-グリコシド結合型糖鎖、O-グリコシド結合型糖鎖、糖脂質糖鎖)にでも発現するのではなく、また糖蛋白質であればどの蛋白質にでも発現するのではなく、分子量150kDaの特定の糖蛋白(gp150)上に存在するO-グリコシド型の糖蛋白質性糖鎖の末端にのみ発現する。2. sLeX抗原発現レベルが複数の糖鎖遺伝子による複雑な支配ではなく、一つの糖転移酵素遺伝子(コア2GlcNAc転移酵素:C2GnT)による非常に単純な機構によりコントロールされている。3. 本システムの律速酵素C2GnTの発現が転写調節レベルでどのように制御されているかをルシフェラーゼアッセイ,EMSA,RNA blottingによって解析し以下のことを明らかにした。(1) GATA,NF-IL6,Splといった転写調節因子の結合領域が関与している。(2) GATA3,NF-IL6,C/EBPγ,Sp3,Sp4の発現レベルがC2GnT遺伝子発現レベルに呼応している。以上の結果は英文誌に発表済みないし発表予定である。