ヒトプレB細胞分化におけるコア2GlcNac転移酵素遺伝子の転写制御機構の解明

阐明人前B细胞分化过程中核心2 GlcNac转移酶基因的转录控制机制

• 批准号: 11159211
• 负责人: 中村 充
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11159211/
• 关键词: 細胞接着分子; シアリルルイス-X; E-セレクチン; 糖転移酵素; 転写因子; GATA3; Sp gene family

プレB細胞表面にはシアリルルイス-X(sLeX)糖鎖抗原が存在し、血管内皮細胞へのE-セレクチン依存性細胞接着に関与している。sLeX発現は糖転移酵素を通して糖鎖遺伝子の間接支配を受けるが、プレB細胞の場合、表面sLeX発現レベル調節の律速酵素は末端のフコース転移酵素FucT-VIIではなく、コア構造を作るコア2GlcNAc転移酵素(C2GnT)である。さらにsLeX糖鎖構造は分子量150kDaの特定糖蛋白質(gp150)上のO-グリコシド糖鎖末端に好んで生合成される。本研究で、我々はさらに次のことを明らかにした。1.C2GnTにょるsLeX発現レベル調節は、扁桃由来のB細胞活性化においても示された。2.プレB細胞分化におけるC2GnT転写調飾には、Spl family、GATA、NF-IL6などの転写因子群、とりわけSp2とGATA3が関与していることが示唆された。すなわち、(i)C2GnTのダウンレギュレーションに先だって、Sp2発現が一過性に増加する。さらにそのあとGATA3発現がアップレギュレーションする。(ii)ルシフェラーゼリポーター遺伝子を使った実験から、C2GnT遺伝子上流の転写調節領域に存在する、三つのTATAボックスのうち、転写開始点に一番近い-182のTATAを含む部分欠失ミュータントが、最も高い一過性転写活性を示した。(iii)TATA(-182)の近傍に存在する、Sp gene familyまたはGATA結合コンセンサス部位に、人工的変異を挿入することによって、一過性転写活性が1O倍以上になる。(iv)ゲルシフトアッセイでSp gene family及びGATA3の結合が示されている。これらからSpl gene family及びGATA3が負の調節因子となっていることが判明した。以上の結果は欧文誌に発表済みないし発表予定である。

The presence of SLEX on the surface of B cells is closely related to the growth of endothelial cells and E-dependent cells. The expression of sLeX is mediated by the indirect control of glycoproteins. In the case of B cells, the expression of sLeX is mediated by the regulation of the enzyme FucT-VII. The expression of FucT-VII is mediated by the enzyme C2GnT. The sLeX glycan structure is synthesized at the O-terminal of a specific glycoprotein (gp150) with a molecular weight of 150kDa. This study is aimed at the future development of China's economy. 1. C2GnT regulates sLeX expression and B cell activation from amygdala. 2. C2GnT gene expression regulators, Spl family, GATA, NF-IL6 gene expression factors, Sp2 and GATA3 gene expression regulators are associated with B cell differentiation. (i) The C2GnT and Sp2 occurrence increase transiently. The GATA3 has been released today. (ii)C2GnT gene up-stream writing regulation domain exists, three TATA points exist, writing start point is near-182 TATA points, including partial loss of writing activity, highest transient writing activity is shown. (iii) The presence of TATA(-182) in the vicinity, Sp gene family, GATA binding site, artificial variation, transient transcription activity is 10-fold or more. (iv)The Sp gene family and GATA3 are combined to form a complex. Spl gene family and GATA3 are negative regulators. The above results are contrary to expectations.

项目成果

Nakamura, M: "UDP-GleNAc Golβ1→3 GalNAC(GleNAc to GalNAc) B1→6N-Acetylglucosaminyltrousferase Holds a Key Rde on the Control of CD15s Expression in Human Re-b Lymohoid Cell Lines"Glycobiology. 9(1). 1-12 (1999)

Nakamura, M：“UDP-GleNAc Golβ1→3 GalNAC（GleNAc 至 GalNAc）B1→6N-乙酰葡糖胺酰基糖苷酶对控制人 Re-b 淋巴样细胞系中的 CD15 表达具有关键作用”糖生物学 9(1)。 12 (1999)

Kikuchi, J.: "Induction of Ubiquition-conjugating Enyme by Aggregated Low Denisty Lipoprotion in Human Macropheegs and Its Implications for Atherosclerosis"Arterioscler. Thromb. Vacs. Biol.. 20(1). 128-134 (2000)

Kikuchi, J.：“通过人巨噬细胞中聚集的低密度脂保护诱导泛素结合酶及其对动脉粥样硬化的影响”动脉硬化剂。

中村 充: "生物薬科学実験講座"広川書店(東京)(印刷中). (2000)

Mitsuru Nakamura：“生物制药科学实验课程”广川书店（东京）（印刷中）。

Iwase, S.: "Defective Binding of IRFs to the Initiator Element of Interleukin-1β-Converting Enyme (ICE)Promator in an Interferan-rasisant Dard:Subline"FEBS Lett.. 450(3). 263-267 (1999)

Iwase, S.：“IRF 与干扰素 Dard 中白细胞介素 1β 转换酶 (ICE) 启动子的启动子元件的缺陷结合：子系” FEBS Lett.. 450(3) (1999)。

中村充: "医学大辞典"医学書院(東京)(印刷中). (2000)

Mitsuru Nakamura：《医学词典》Igaku Shoin（东京）（印刷中）（2000 年）。