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マウス胚中胚葉系組織の発生と分化における転写制御因子δEF1の機能

转录调节因子δEF1在小鼠胚胎中胚层组织发育和分化中的作用

基本信息

批准号：
06680718
负责人：
東雄二郎
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ニワトリの水晶体特異的に発現するδ-クリスタリンのエンハンサーに結合する因子として同定されたδEF1は、エンハンサー活性に必要なエレメントをアクチベータ-と競合することにより、その発現を負に制御している。δEF1はN末端側とC末端側にZnフィンガー、その中央にホメオドメイン様配列を有している。δEF1がそのC末端側Znフィンガーによって結合するCACCTという配列は、あるbHLH型のアクチベータ-タンパクの結合する配列、E2-box(CACCTG)と重複しており、δEF1がE2-boxを介した転写活性化に対する抑制因子として働き、組織形成過程を広く制御していることが推測されている。また現在までに4種類のδEF1ホモローグがそれぞれ別の遺伝子発現制御領域に結合する転写抑制因子として同定されている。マウス胚発生過程においてδEF1は、筋肉系、神経系の他、多くの器官の間充織細胞や胸腺において発現している。我々はδEF1の生体内での機能を個体レベルで解析する目的で、ジーンターゲティングによりδEF1のDNA結合に重要であるC末端側のZnフィンガーを欠損したδEF1変異マウスを作製した。δEF1ヘテロ変異マウス同士の交配から得られた胎仔の遺伝子型を調べたところ、ホモ変異マウスの多くは、生後2日以内に死亡することが明かとなった。組織学的な解析から、ホモ変異マウスではT細胞分化の場である胸腺の縮小が観察された。このことをさらに検討するために、18.5日胚の胸腺細胞(thymocyte)を解析したところ、ホモ変異マウスでは胸腺細胞数が野生型の約1/10に減少していた。さらにFACS(Fluorescence activated cell sorter)による解析からホモ変異マウスの胸腺においては、野生型と比較してCD4+/CD8+のマーカーを持つプレT細胞の細胞集団が相対的に減少していた。さらに、一部の生残した成体ホモ変異マウスにおいても免疫系の異常が観察された。それらの個体のリンパ球を解析したところ、ホモ変異マウスではCD4-/CD8+T細胞が減少していることが明かとなった。現在、他のT細胞分化マーカーを用いて、ホモ変異マウスにおけるT細胞をさらに検討中である。

The crystal specific occurrence is controlled by the factor of δEF1, δ EF 2, δ EF 3 and δ EF 4.δEF1 has a different arrangement from N terminal side to C terminal side.δ EF1 and C-terminal Zn binding CACCT alignment, bHLH type Zn binding CACCT alignment, E2-box(CACCTG) duplication, δ EF1 and E2-box activation inhibition factor, tissue formation process control. 4 kinds of δEF1 are present in the gene expression control domain, and the gene expression inhibition factors are determined simultaneously. During the embryonic development, EF1, muscle system, nervous system, mesenchymal cells of many organs, thymus, etc. The function of δ EF1 in vivo is analyzed individually, and the DNA binding of δ EF1 is important. The Zn binding on the C-terminal side is deficient.δEF1 Histological analysis of T cell differentiation and thymic shrinkage The number of thymocytes in the 18.5-day-old embryo was reduced by about 1/10 of that in the wild type. In addition, FACS(Fluorescence activated cell sorter) analysis showed that the expression of CD4 +/CD8 + in the thymus was significantly reduced compared with wild-type. A part of the body is damaged and the immune system is abnormal. The number of CD4-/CD8 +T cells decreased significantly. Now, his T cell differentiation is in use, and his T cell differentiation is in use.