精巣形成過程におけるインヒビンおよびその関連物質の役割

抑制素及相关物质在睾丸形成过程中的作用

• 批准号: 06806033
• 负责人: 渡辺 元
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06806033/
• 关键词: インヒビン; 精巣; ラット; 精細管形成

1)胎児期におけるインヒビンの発現雄ラットでは、雌とは異なり、胎齢16日の末梢血液中にラジオイムノアッセイ法で測定可能なインヒビンが検出された。さらに、免疫組織化学的染色法により、精巣では精索が形成され始める胎齢14日から、間質細胞にインヒビン活性が認められた。インヒビンの陽性反応はその後も間質細胞に認められたが、妊娠末期の胎齢19日になると精細管内のセルトリ細胞にも陽性反応が認められるようになった。出生後は、間質の陽性反応は減少したが、セルトリ細胞の陽性反応は増強し、10日齢ことには精子形成の進行に応じて精細管の断面毎に陽性反応の強度差が認められた。精巣のホモジネート中のインヒビン生物活性を測定したところ、胎児期の精巣では検出されなかったが、出生期以降なインヒビン活性が認められた。イムノプロッティング法を用いて、精巣中インヒビンの性状を調べたところ、胎児精巣中には32kDaのインヒビンは検出されず、約46kDaのインヒビンα鎖前駆体と思われる物質が認められた。インヒビンの発現における精細胞の関与を検討するために、抗腫瘍薬のひとつであるブルスファンを妊娠13日の母ラットに投与し、精巣中に精原細胞を欠くラットを作製した。精細胞を欠如した胎児精巣では、間質におけるインヒビンの免疫組織化学的染色による陽性反応が正常対照群より増強した。2)胎児精巣の器官培養実体顕微鏡下で血管走行を指標にして、精細管形成前の胎齢13日に精巣原器を同定し器官培養した。基礎培地で培養すると4日後には胎内における発育と同様の精細管形成が認められた。この培養方法を用いて、ウシ卵胞液から得たインヒビンおよびその関連物質の精細管形成過程に対する作用を吟味した。また、インヒビンα鎖に対して作成した抗体を添加し、その影響を観察した。その結果、32kDaの純粋なインヒビンおよびインヒビンα鎖に対する抗体では、対照群と同様の精細管の形成が認められた。しかし、部分精製したインヒビン分画の添加では、多くの精細管中から精細胞が消失した。インヒビンα鎖関連物質が精細管形成時に間質で発現し、何れかの調節を行っているものと推察された。

1) the fetal stage where に お け る イ ン ヒ ビ ン の 発 now male ラ ッ ト で は, female と は different な り の peripheral blood, tire 齢 16 に ラ ジ オ イ ム ノ ア ッ セ イ で method to determine the may な イ ン ヒ ビ ン が 検 out さ れ た. さ ら に, immunohistochemical staining に よ り and fine 巣 で は spermatic が form さ れ beginning め る tire 齢 14 か ら, mesenchymal cells に イ ン ヒ ビ が ン activity recognition め ら れ た. イ ン ヒ ビ ン の positive anti 応 は そ の も after mesenchymal cells に recognize め ら れ た が, late pregnancy の tire 齢 19 に な る と fine tube の セ ル ト リ cells に も positive anti 応 が recognize め ら れ る よ う に な っ た. は after birth, interstitial の positive anti 応 は reduce し た が, セ ル ト リ の positive cells against 応 は raised strong し, 10 齢 こ と に は の sperm formation に 応 じ て seminiferous tubule の section in their に positive anti 応 の intensity difference が recognize め ら れ た. In essence 巣 の ホ モ ジ ネ ー ト の イ ン ヒ ビ ン biological activity determination of を し た と こ ろ, where の with fine 巣 で は 検 out さ れ な か っ た が, born in な イ ン ヒ ビ が ン activity recognition め ら れ た. イ ム ノ プ ロ ッ テ ィ ン を グ method with い て, fine 巣 イ ン ヒ ビ ン の traits を adjustable べ た と こ ろ, where in sperm 巣 に は 32 kda の イ ン ヒ ビ ン は 検 out さ れ ず, about 46 kda の イ ン ヒ ビ ン 駆 before alpha lock body と think わ れ る material が recognize め ら れ た. イ ン ヒ ビ ン の 発 now に お け る sperm cells の masato and を beg す 検 る た め に, swollen sores 薬 の ひ と つ で あ る ブ ル ス フ ァ ン を の mother pregnancy 13 ラ ッ ト に and し, fine 巣 of に SSCS を owe く ラ ッ ト を cropping し た. Sperm cells を owe such as し た tire where pure 巣 で は, interstitial に お け る イ ン ヒ ビ ン の immunohistochemical staining に よ る positive anti 応 が normal according to the group of seaborne よ り raised strong し た. 2) tire where pure 巣 の organ culture be body 顕 で blood vessels under micro mirror line を index に し て, seminiferous tubule formation before 13 の tire 齢 に fine 巣 prototype を with fixed し organ culture し た. After 4 days of basic culture で culture すると, に における the における in the fetus develops と similar papillae and が cognition められた forms. こ の を cultivation method with い て, ウ シ follicle fluid か ら have た イ ン ヒ ビ ン お よ び そ の masato even material の seminiferous tubule formation に す seaborne る role を recite with relish し た. ま た, イ ン ヒ ビ ン alpha lock に し seaborne て made し た antibody を add し, そ の influence を 観 examine し た. そ の results, 32 kda の pure 粋 な イ ン ヒ ビ ン お よ び イ ン ヒ ビ ン alpha lock に す seaborne る antibody で は, according to the group of seaborne と with others の seminiferous tubule の form が recognize め ら れ た. The <s:1> <s:1>, partially refined <s:1> た ヒビ ヒビ ヒビ ヒビ <e:1>, <s:1> subdivision <s:1> with the addition of で た, the <s:1> sperm cells in the fine tubes of multiple く が disappear た. イ ン ヒ ビ ン alpha lock masato even material が seminiferous tubule formation に interstitial で 発 し, what れ か の line adjustment を っ て い る も の と push examine さ れ た.

项目成果

新井浩司: "^<125>I標識ホルモンを用いたコルチゾールのラジオイムノアッセイと各種動物の測定例" Journal of Reproduction and Development. 41(in press). (1995)

Koji Arai：“使用 ^<125>I 标记的激素进行皮质醇的放射免疫测定以及各种动物的测量实例”《生殖与发育杂志》41（出版中）。

Kishi H.: "Fallicular dynamics and secrection of inhibin and oestradiol-17β during the oestrous cycle of the hamster." Journal of Endocrinology. in press. (1995)

Kishi H.：“仓鼠发情周期中的卵泡动力学和抑制素和雌二醇 17β 的分泌”，《内分泌学杂志》，出版中。

Takedomi T.: "Superovulation of holstein by a single subcutaneus injedtion of FSH dissolved in polyvinylprolidone." Theriogenalogy. in press. (1995)

Takedomi T.：“通过单次皮下注射溶解在聚乙烯吡咯烷酮中的 FSH 来实现荷斯坦的超排卵。”

Kogo H.: "A role of prostaglandin in the Secretion of inhibin and oestradiol-17β in equine chorionic gonadotrophin-primed rats." European Journal of Pharmacology. 231. 481-484 (1993)

Kogo H.：“前列腺素在马绒毛膜促性腺激素引发的大鼠中抑制素和雌二醇-17β 分泌中的作用。欧洲药理学杂志 231. 481-484 (1993)”