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蝶・蛾の翅模様進化と基本発生プログラム－カイコ蛾の進化発生学から－

蝴蝶和飞蛾的翼型进化和基本发育程序 - 从蚕蛾的进化胚胎学 -

基本信息

批准号：
15H06852
负责人：
鈴木誉保
金额：
$ 0.92万
依托单位：
国立研究開発法人農業生物資源研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-08-28 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H06852/
关键词：
進化発生・分化昆虫遺伝子

项目摘要

カイコ蛾の翅の模様を形成する分子メカニズムの解明を目的として、その準備および基礎となる実験系の確立を行った。（研究項目１）翅原基での遺伝子発現はホールマウントインシチューハイブリダイゼーション法（WISH法）により調べる。そのため、本年度は実験系の立ち上げに取組んだ。まず試薬類の調製およびプローブの設計・調製を行った。次に実験の条件検討を行った。鱗翅目昆虫を利用したWISH法の先行研究より、組織の固定条件として4%パラフォルムアルデヒドによるものと9%フォルムアルデヒドによるものの２通りが考えられたので両者を比較検討した。また、組織の解剖に要する時間等についても条件を検討した。結果、遺伝子発現を確認できるシグナルが得られ、またおおむね再現性があることも確認できた。ただし、まだ染色の仕方にムラがみられ詳細なレベルで遺伝子発現パターンの再現性は得られておらず、さらに実験条件や方法の細やかなチューニングが必要である。（研究項目２）翅で発現している遺伝子間の促進・抑制関係を調べるために、GAL4-UAS系を利用する。既に報告されているショウジョウバエのGAL4系統の翅原基で発現誘導できる系統のゲノム情報を利用して、カイコで同等と推察されるゲノム領域をクローニングし、GAL4あるいは緑色蛍光タンパク質の上流に組み込んだカイコ組換え系統の作出を行った。現在系統化を進めている。（研究項目３）模様形成遺伝子群をスクリーニングすることを目的として、翅模様のないカイコ変異系統と翅模様のあるカイコ野生系統の遺伝子発現を比較し、発現に違いのある遺伝子群を調べた。RNA-seqにより模様形成期の初期に発現している遺伝子群について調べ比較を行ったが違いは見いだせなかった。この結果より、これら変異系統の模様がないのは、模様形成期の中－後期に発現している遺伝子群の違いであると推察された。

The molecular structure of the structure. (Research item 1) The gene development of wing primordia is regulated by WISH method. This year, the company has been working on a number of projects. The design and implementation of the modulation of the test class The conditions for the implementation of the second phase are discussed. A preliminary study of lepidopteran insects using the WISH method was carried out on the fixation conditions of tissues and tissues. The anatomy of the tissue, the time, etc. are discussed. Results: The results of the study were confirmed. The reproducibility of the dye generation process is necessary to improve the quality of the dye and to improve the quality of the dye. (Project 2) The development and utilization of GAL4-UAS system in the promotion and inhibition relationship between genes. It is reported that the information of the system needs to be utilized, and the information of the system needs to be used, and the information of the system needs to be used, and the information of the system needs to be used, and the system needs to be used, and the information of the system needs to be used. Now systematize and advance. (Research Item 3) Model formation of genetic subgroups: Comparison of genetic occurrence of different systems and wild systems in the model formation of genetic subgroups. RNA-seq is the first to appear in the early stages of the formation of the gene. As a result, the model of these different systems is unknown, and the violation of genetic subgroups that appear in the middle and late stages of the model formation period is clearly observed and inferred.