Correlation of structures and functions of the semaphorin/neuropilin interaction

信号蛋白/神经毡蛋白相互作用的结构和功能的相关性

• 批准号: 24870018
• 负责人: MATSUNAGA Yukiko
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-08-31 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24870018/
• 关键词: タンパク質; セマフォリン; ニューロピリン; 相互作用解析; 構造生物学

Class-3 semaphorins are proteolytically cleaved by furin, resulting in a complex modulation of biological activity. Some class-3 semaphorins bind to cell surface coreceptor Nrp1, which is necessary for high affinity binding to the cells. Many known Nrp1-binding peptides contain (R/K)XXR sequence which is same as a recognition motif for furin. Sema3A has seven (R/K)XXR sequences in its basic domain. However, identification of the actual cleavage sites as well as the fine mapping of the critical Nrp1 binding sequence has not been possible. Through comprehensive mutagenesis and MS-analysis in the presence or absence of the furin inhibitor, major Nrp1 binding site within the Sema3A basic domain was identified. Exposure of this site requires processing by furin during the biosynthesis, but it is removed by additional upstream cleavages by cellular proteases, resulting in the inactivation. This information was used to design mutant that is constitutively active and resistant to inactivation.

3 类信号蛋白被弗林蛋白酶以蛋白水解方式裂解，从而产生复杂的生物活性调节。一些 3 类信号蛋白与细胞表面辅助受体 Nrp1 结合，这对于与细胞的高亲和力结合是必需的。许多已知的Nrp1结合肽含有与弗林蛋白酶识别基序相同的(R/K)XXR序列。 Sema3A 在其基本结构域中有七个 (R/K)XXR 序列。然而，实际切割位点的鉴定以及关键 Nrp1 结合序列的精细定位还不可能。通过在存在或不存在弗林蛋白酶抑制剂的情况下进行全面诱变和 MS 分析，确定了 Sema3A 基本结构域内的主要 Nrp1 结合位点。该位点的暴露需要在生物合成过程中通过弗林蛋白酶进行处理，但它会被细胞蛋白酶的额外上游裂解去除，从而导致失活。该信息用于设计具有组成型活性且抗失活的突变体。

项目成果

Structural basis for the neuropilin-semaphorin interactions

神经毡蛋白-信号蛋白相互作用的结构基础

• 发表时间: 2012
• 作者: 松永幸子;高木淳一
• 通讯作者: 高木淳一

実験医学３月号３１巻

实验医学三月号第31卷

• 发表时间: 2013
• 作者: 松永幸子;高木淳一;小島瑠花 高橋晶子 神田真司 岡良隆;吉田啓亮;松永 幸子
• 通讯作者: 松永 幸子

神経ガイダンス因子セマフォリン3AのC末端におけるニューロピリン受容体との結合モチーフの同定

神经引导因子信号蛋白 3A C 末端神经毡蛋白受体结合基序的鉴定

• 发表时间: 2013
• 作者: 北郷悠;高木淳一;高木淳一;Takagi J;高木淳一;松永幸子
• 通讯作者: 松永幸子

セマフォリン関連分子群の立体構造、実験医学

信号蛋白相关分子的三维结构、实验医学

• 发表时间: 2013
• 作者: 松永幸子;高木淳一
• 通讯作者: 高木淳一

セマフォリン-プレキシン結合解析とハイスループットスクリーニング法への応用

信号蛋白-丛蛋白结合分析及其在高通量筛选方法中的应用

• 发表时间: 2012
• 作者: 松永幸子;岩崎憲治;高木淳一
• 通讯作者: 高木淳一