血液／尿中キラルアミノ酸の網羅的定量を基盤とする腎不全の早期低侵襲診断鑑別法開発

基于血/尿中手性氨基酸综合定量的肾衰竭早期微创诊断鉴别方法的发展

基本信息

批准号：
22H02752
负责人：
濱瀬健司
金额：
$ 11.15万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02752/
关键词：
キラルアミノ酸光学分割多次元HPLC 腎不全早期診断

项目摘要

臨床検体において微量キラルアミノ酸の網羅的、かつ正確な定量を可能とする三次元・四次元HPLC分析を実現するため、新規マーカーとしての可能性が指摘されながら正確な定量が達成されていないトリプトファン、塩基性アミノ酸、システイン、アロイソロイシンおよびアロスレオニンの分析法を検討した。その結果、トリプトファンは光リアクターの利用に加えて移動相組成・流速を検討することで高感度蛍光分析を達成し、アロスレオニンは高分離能光学分割カラムを設計・開発することにより微量分析を達成した。また、トリプトファンは逆相、光学分割にタンデム質量分析を接続した四次元LC/LC/MS/MS装置においても高選択的微量分析を可能とした。塩基性アミノ酸およびアロイソロイシンについては三次元LC/LC/LCのカラムを検討し、塩基性アミノ酸は逆相（疎水性）、逆相（ππ相互作用）、光学分割を各次元とする装置を開発することにより選択的微量分析を実現した。アロイソロイシンは一次元目および二次元目でロイシン連鎖異性体を分離することで選択的微量分析を実現した。併せて、大阪大学医学部腎臓内科と共同で腎生検により原因疾患が判明している中軽度の腎不全患者について、血液および尿検体を収集した。原因疾患は、代表的な腎不全としてIgA腎症、膜性腎症、微小変化型ネフローゼ症候群、糖尿病性腎症、高血圧性腎症、ループス腎炎を選択し、小規模試験用検体として疾患毎に十検体程度を収集した。

为了实现三维和四维的HPLC分析，可以在临床标本中全面，准确地量化痕量手性氨基酸，我们研究了色氨酸，碱性氨基酸，半胱氨酸，雌激素和甲甲基氨基氨酸的分析方法，这些方法尚未准确地量化了Markery的指标，这些方法尚未准确地量化。结果，除了使用光电反应器以及设计和开发高分辨率的光学分辨率柱外，还可以通过检查流动相组成和流量来实现色氨酸，从而实现了异硫氨酸的痕量分析。此外，色氨酸还能够在四维LC/LC/MS/MS设备中进行高度选择性的微分析，该设备将串联质谱与色氨酸连接起来。对于碱性氨基酸和同甲酯，我们研究了三维LC/LC/LC色谱柱，并开发了一种设备，具有反向相（疏水性）的每个维度，相反相（ππ相互作用），以及基本氨基酸的光学分辨率，可以实现精选的微型分析。合金亮氨酸在第一和第二维中通过分离亮氨酸链异构体来实现选择性微分析。此外，还从轻度肾衰竭的患者中收集了血液和尿液标本，其病因是通过肾脏活检与大阪大学医学院肾脏科合作确定的。最常见的肾衰竭被选为IgA肾病，膜性肾病，微视肾病综合征，糖尿病性肾病，糖尿病性肾病，高血压肾病和狼疮性肾炎，以及大约十个标本，每种疾病的标本约为小尺度测试标本。

项目成果

期刊论文数量（13）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

キラルアミノ酸の多次元HPLC分析法開発と生体・食品・宇宙試料における含量解析

开发生物、食品和空间样品中手性氨基酸的多维 HPLC 分析方法和含量分析

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Otomo Kohei;Ishii Hirokazu;Nemoto Tomomi;浜瀬健司
通讯作者：
浜瀬健司

Enantioselective Determination of Hydroxy Amino Acids in Japanese Traditional Amber Rice Vinegars

日本传统琥珀米醋中羟基氨基酸的对映选择性测定

DOI：
10.15583/jpchrom.2022.006
发表时间：
2022
期刊：
CHROMATOGRAPHY
影响因子：
1.7
作者：
Oyaide Mai;Ishii Chiharu;Fujii Akira;Akita Takeyuki;Mita Masashi;Nagano Masanobu;Hamase Kenji
通讯作者：
Hamase Kenji

Two-Dimensional Chiral HPLC Analysis of Lactate, Hydroxybutyrates and Malate in Human Plasma

人血浆中乳酸盐、羟基丁酸盐和苹果酸盐的二维手性 HPLC 分析

DOI：
10.15583/jpchrom.2022.011
发表时间：
2022
期刊：
CHROMATOGRAPHY
影响因子：
1.7
作者：
Tsai Hsin-Miao;Hsieh Chin-Ling;Ishii Chiharu;Akita Takeyuki;Mita Masashi;Ide Tomomi;Lee Jen-Ai;Hamase Kenji
通讯作者：
Hamase Kenji

マラヤ大学(マレーシア)

马来亚大学（马来西亚）