血液／尿中キラルアミノ酸の網羅的定量を基盤とする腎不全の早期低侵襲診断鑑別法開発

基于血/尿中手性氨基酸综合定量的肾衰竭早期微创诊断鉴别方法的发展

• 批准号: 22H02752
• 负责人: 濱瀬 健司
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02752/
• 关键词: キラルアミノ酸; 光学分割; 多次元HPLC; 腎不全; 早期診断

臨床検体において微量キラルアミノ酸の網羅的、かつ正確な定量を可能とする三次元・四次元HPLC分析を実現するため、新規マーカーとしての可能性が指摘されながら正確な定量が達成されていないトリプトファン、塩基性アミノ酸、システイン、アロイソロイシンおよびアロスレオニンの分析法を検討した。その結果、トリプトファンは光リアクターの利用に加えて移動相組成・流速を検討することで高感度蛍光分析を達成し、アロスレオニンは高分離能光学分割カラムを設計・開発することにより微量分析を達成した。また、トリプトファンは逆相、光学分割にタンデム質量分析を接続した四次元LC/LC/MS/MS装置においても高選択的微量分析を可能とした。塩基性アミノ酸およびアロイソロイシンについては三次元LC/LC/LCのカラムを検討し、塩基性アミノ酸は逆相（疎水性）、逆相（ππ相互作用）、光学分割を各次元とする装置を開発することにより選択的微量分析を実現した。アロイソロイシンは一次元目および二次元目でロイシン連鎖異性体を分離することで選択的微量分析を実現した。併せて、大阪大学医学部腎臓内科と共同で腎生検により原因疾患が判明している中軽度の腎不全患者について、血液および尿検体を収集した。原因疾患は、代表的な腎不全としてIgA腎症、膜性腎症、微小変化型ネフローゼ症候群、糖尿病性腎症、高血圧性腎症、ループス腎炎を選択し、小規模試験用検体として疾患毎に十検体程度を収集した。

With the implementation of three-dimensional and fourth-dimensional HPLC analysis of trace amounts of callic acid in clinical samples, the possibility of achieving accurate quantification under the new regulations has been highlighted. The analytical methods of basic callic acid, stilbene, alosol and alosol are discussed. The results show that high sensitivity optical analysis can be achieved by using optical separation technology, mobile phase composition, flow velocity, and high separation energy optical separation technology. The quality analysis of high resolution microanalysis is possible with four-dimensional LC/LC/MS/MS devices. The microanalysis of the three dimensional LC/LC/LC system was carried out by the basic acid system, reverse phase (water), reverse phase (ππ interaction) and optical separation device. The microanalysis of the first and second dimensional linkage variants was carried out. In addition, the Department of Nephrology, Osaka University School of Medicine, jointly identified the causes of renal diseases, blood and urine samples of patients with renal insufficiency. The cause of the disease is represented by IgA kidney disease, membranous kidney disease, micro-type kidney disease syndrome, diabetic kidney disease, hypertensive kidney disease, glomerulonephritis, small-scale trial use of the model disease, the degree of each model is collected

项目成果

キラルアミノ酸の多次元HPLC分析法開発と生体・食品・宇宙試料における含量解析

开发生物、食品和空间样品中手性氨基酸的多维 HPLC 分析方法和含量分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Otomo Kohei;Ishii Hirokazu;Nemoto Tomomi;浜瀬 健司
• 通讯作者: 浜瀬 健司

Enantioselective Determination of Hydroxy Amino Acids in Japanese Traditional Amber Rice Vinegars

日本传统琥珀米醋中羟基氨基酸的对映选择性测定

• DOI: 10.15583/jpchrom.2022.006
• 发表时间: 2022
• 期刊: CHROMATOGRAPHY
• 影响因子: 1.7
• 作者: Oyaide Mai;Ishii Chiharu;Fujii Akira;Akita Takeyuki;Mita Masashi;Nagano Masanobu;Hamase Kenji
• 通讯作者: Hamase Kenji

Two-Dimensional Chiral HPLC Analysis of Lactate, Hydroxybutyrates and Malate in Human Plasma

人血浆中乳酸盐、羟基丁酸盐和苹果酸盐的二维手性 HPLC 分析

• DOI: 10.15583/jpchrom.2022.011
• 发表时间: 2022
• 期刊: CHROMATOGRAPHY
• 影响因子: 1.7
• 作者: Tsai Hsin-Miao;Hsieh Chin-Ling;Ishii Chiharu;Akita Takeyuki;Mita Masashi;Ide Tomomi;Lee Jen-Ai;Hamase Kenji
• 通讯作者: Hamase Kenji

マラヤ大学(マレーシア)

马来亚大学（马来西亚）

台北医学大学(その他の国・地域（台湾）)

台北医学大学（其他国家/地区（台湾））