权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

染色体DNA標的部位のin vivo配列改変技術

染色体DNA靶位点体内序列修饰技术

基本信息

批准号：
21659015
负责人：
紙谷浩之
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659015/
关键词：
配列改変染色体DNA 遺伝子修復

项目摘要

Tailed duplexesによる一塩基フレームシフト変異の修復:研究代表者の以前の研究により、一塩基置換変異の修復(TGA配列のTCA配列への修復)においては、一本鎖DNAの3'-末端付近にオリゴヌクレオチドをアニールさせて作製した5'-tailed duplex、一本鎖DNAの5'-末端付近にオリゴヌクレオチドをアニールさせて作製した3'-tailed duplex、及び、一本鎖DNAの3種を比較した場合、5'-tailed duplex>3'-tailed duplex>一本鎖DNAの順に効率が高いことが明らかにされている。そこで、tailed duplexesの一塩基挿入変異や一塩基欠失変異の修復効率を培養細胞を用いて調べた。標的遺伝子は、一塩基フレームシフト変異を有するHyg-EGFP(ハイグロマイシン耐性遺伝子とEGFP遺伝子の融合遺伝子)遺伝子を用いた(TCGA、TA配列のTCA配列への修復)。その結果、tailed duplexesは挿入変異・欠失変異を修復できること、及び、tailed duplexesの方が一本鎖DNAよりも両変異の修復効率が高い傾向にあることを明らかとした。しかし、一塩基フレームシフト変異の修復効率は一塩基置換変異の修復効率の数十分の一であった。また、5'-tailed duplexと3'-tailed duplexの序列については、明らかではなかった。

Tailed duplexes による一塩组フレームシフト変different の Repair:Research representative の前の研究により, 一塩组综合変 Different の Repair (TGA arrangement のT CA arrangement repair) においては, 1 lock DNA の3'-end pay near にオリゴヌクレオチドをアニールさせて production した5'-tailed duplex, 1 lock DNA の5'-end close にオリゴヌクレオチドをアニールさせて 3'-tailed duplex, and び, 1 lock DNA 3 kinds of comparison, 5'-tailed duplex>3'-tailed duplex>The efficiency of DNA lock DNA is high and the efficiency is high.そこで, tailed duplexes の一塩集团insert the 変iso や一塩 radicals lose the 変isoのrepair efficiency をcultivated cells をいて Adjust べた. The target is Hyg-EGFP (Hyg-EGFP (Hyg-EGFP)). (TCGA, TA arrangement, TCA arrangement, repair).そのRESULT、tailed duplexesはINSERT 変different・OWERLOOKED 変differentをREPAIR できること、和び、tailed The repair efficiency of duplexes is high and the DNA is locked. The repair efficiency is high and the tendency is high.しかし, 一塩组フレームシフト変different の Repair efficiency は一塩 Basic replacement 変different の Repair efficiency の一であった.また, 5'-tailed duplex and 3'-tailed duplex sequence については, 明らかではなかった.