神経細胞死のメカニズムと防御に関する研究

神经细胞死亡机制及防御研究

• 批准号: 03263105
• 负责人: 水野 美邦
• 金额: $ 51.84万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03263105/
• 关键词: 神経細胞死; パ-キンソン病; ミトコンドリア脳筋症; ニュ-ロトキシン; フリ-ラジカル; 興奮性アミノ酸; 脳虚血; 分子生物学

1.エネルギ-産生障害による細胞死:パ-キンソン病黒質神経細胞に複合体Iの低下のあることを免疫組織化学で証明,更に筋にも複合体I活性低下があるが,血小板,リンパ球など寿命の短い細胞では変化していないことを示した.5例のパ-キンソン病患者にてmtDNA全塩基配列を決定,多くの塩基置換を発見.これらの変異により,電子伝達系よりラジカル漏出が増加,mtDNAの酸化的損傷を惹起,点変異,欠失を誘導する可能性を示した.MELASではmtDNAのtRNA^<Leu(UUR)>遺伝子(塩基番号3243)の点突然変異を40名中32名に発見,残る8名中3名でこれと異なる塩基番号3271のTからCへの点突然変異を発見.更にミスマッチプライマ-法を用いたPCR法により簡便なDNA診断法を開発した.2.内因性・外因性毒性物質による神経細胞死:1MeTIQが脳内在性物質として存在,MPTP毒性に拮抗すること,Parkinson病で減少していることを明らかにした.一方TIQは黒質神経細胞障害を起こすことを示した.3.フリ-ラジカルによる細胞障害:MCLA試薬を用い,虚血障害の際浸潤する白血球の出す化学発光をin vivoで捉え,間接的に好中球を算出する方法を開発,又組織片に対する高感度定量法を開発.又培養細胞を用いFe‐ADPとメラニンがsuperoxide anionを介し脂質過酸化を起こす事を示す.4.興奮性アミノ酸及び虚血による細胞障害:カイニン酸誘導体を合成,既知の興奮性アミノ酸を凌ぐ強力なグルタミン酸アゴニストを発見.又海馬遅発性神経細胞死で細胞内カルシウムイオンが高いレベルで動揺していることを明らかにし,短時間の脳虚血は神経細胞に虚血耐性を誘導,同時にストレス蛋白が発現すること,耐性の発現した細胞では蛋白代謝回転が良好であることを証明した.

1. The expression of mtDNA was determined by immunohistochemistry in 5 patients with pathologically impaired mitochondrial DNA complex I. MELAS revealed that 32 out of 40 mtDNA gene fragments (gene number 3243) had abrupt changes in the nucleotide sequence, and 3 out of 8 mtDNA fragments (gene number 3271) had abrupt changes in the nucleotide sequence. 2. Endogenous and exogenous toxic substances:1. The existence of endogenous substances, the antagonism of MPTP toxicity, and the reduction of Parkinson disease. A new method for the determination of the cellular impairment of leukocytes was developed in vivo, and a sensitive quantitative method was developed for tissue sections. 4. Excitatory acid and hyperactive blood cell damage: synthesis of an acid inducer, known as excitatory acid, is detected. In addition, in the hippocampus, the cells were killed, and the intracellular cell cycle was elevated. In the future, the short-term deficiency of blood induced the deficiency tolerance of neurons, and at the same time, the development of the tolerance proved that the cells had a good protein metabolism.

项目成果

Ozawa, T., et al.: "Distinct clustering of point mutations in mitochondrial DNA among patients with mitochondrial encephalomyopathies and with Parkinson's disease." Biochem. Biophys. Res. Commun.177. 518-525 (1991)

Ozawa, T. 等人：“线粒体脑肌病和帕金森病患者线粒体 DNA 点突变的独特聚集。”

Ono, H., Hasebe, Y., Satoh, M., Nagao, T., Ohta, S., Hirobe, M. and Fukuda, H.: "Amphetamine‐antagonistic property of 4‐pheny1‐1,2,3,4‐tetrahydroisoquinoline:inhibition of spinal reflex‐enhancing effects of methamphetamine,phenylethylamine and nomifensine

Ono, H.、Hasebe, Y.、Satoh, M.、Nagao, T.、Ohta, S.、Hirobe, M. 和 Fukuda, H.：“4-pheny1-1,2,3 的安非他明拮抗特性,4-四氢异喹啉：抑制甲基苯丙胺、苯乙胺和诺米芬辛的脊髓反射增强作用

Haba, K., et al.: "Time course of changes in lipid peroxidation,pre‐and post‐synaptic cholinergic indices,NMDA receptor binding and neuronal death in gerbil hippocampus following transient ischemia." Brain Res.540. 116-122 (1991)

Haba, K. 等人：“短暂性缺血后沙鼠海马中脂质过氧化、突触前和突触后胆碱能指数、NMDA 受体结合和神经元死亡的时间过程。” 1991)

Mizuno, Y.: "Key Topics in Brain Resarch,Parkinson's Disease.From Clinical Aspects to Molecular Basis,Nagatsu,T.,Narabayashi,H.and Yoshida,M.,eds." Springer‐Verlag, Wien/New York, 220 (1991)

Mizuno, Y.：“脑研究的关键主题，帕金森病。从临床方面到分子基础，Nagatsu, T.、Narabayashi, H. 和 Yoshida, M.，编辑，Springer-Verlag，维也纳/纽约，220 (1991)

Hattori, N., Tanaka, M., Ozawa, T. and Mizuno,Y.: "Immunohistochemical studies on Complexes I,II,III and IV of mitochondria in Parkinson's disease." Ann. Neurol.30. 563-571 (1991)

Hattori, N.、Tanaka, M.、Ozawa, T. 和 Mizuno,Y.：“帕金森病线粒体复合物 I、II、III 和 IV 的免疫组织化学研究。”