パーキンソン病におけるミトコンドリア蛋白遺伝子異常

帕金森病的线粒体蛋白基因异常

• 批准号: 06680766
• 负责人: 水野 美邦
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06680766/
• 关键词: パーキンソン病; ミトコンドリア; 複合体I; ミトコンドリアDNA; 発症機序; 遺伝

パーキンソン病(PD)では電子伝達系複合体I(Complex I)の活性低下があり,その原因として複合体蛋白をコードしているミトコンドリアDNA(mtDNA)と核遺伝子に変異がある可能性がある.我々は,mtDNAの遺伝子多型に注目し,PD10例,PD以外の疾患対照30例のmtDNAの全塩基配列を決定した.これらの結果をもとに塩基番号(np)4343,12358,11255,14180の4ヶ所の点変異につき,PD121例,正常対照139例,PD以外の変性疾患対照48例の末梢血リンパ球よりDNAを抽出,ミスマッチプライマーを用い,PCRにてmtDNAを増幅後,制限酵素消化の有無により点変異の出現頻度を確認した.np4343,12358の点変異は,いずれの群において出現頻度に有意な差はなく,日本人に多い多型の一つと考えられた.一方,np11255,14180はフリーラジカルの攻撃を受けやすいヒスチジン(His),システイン(Cys)へのアミノ酸置換を伴った点変異であり,np11255ではPD1例,疾患対照2例に,np14180ではPD2例のみに点変異が存在した.His,Cysへのアミノ酸置換は構成蛋白のフリーラジカルに対する感受性を高め,Complex Iの活性低下を引き起こす可能性がある.今後臨床症状との関連を含めて検討していく予定である.一方核でコードされる複合体Iのサブユニットに関しては,ウエスタンブロットで減少していた24-kDaサブユニットの正常遺伝子構造を明らかにすべく24-kDaサブユニットのcDNAをプローブとしヒト胎盤ゲノミックライブラリーより100万クローンをスクリーニングし,得られた30クローンを分析し,24-kDaサブユニット核遺伝子は凡そ全長50〜60kbの8エクソンよりなる遺伝子であることが判明した.またin situ hybridizationでchromosome18の短腕に存在することを明らかにした.今後全てのエクソンを明らかにし患者群で変異が存在するか否か検討する予定である.

The activity of Complex I is lower than that of PD, and the reason is that complex protein is lower than that of mtDNA. In this study,mtDNA polymorphism was observed in 10 PD patients and 30 non-PD patients. The results showed that there were 4 different points in NP 4343, NP 12358, NP 11255, NP 14180,PD121 cases, normal control 139 cases,PD 48 cases with different diseases. DNA was extracted from the peripheral blood of the patients, and the mtDNA was amplified by PCR. The frequency of the different points in restriction enzyme digestion was confirmed. NP 4343. 12358 points vary, middle group, middle frequency, intentional difference, Japanese, multiple types, one test. On the one hand,np11255, np 14180 responded to the attack of the protein by the acid substitution of the protein.His, np11255 responded to PD in 1 case, and np14180 responded to PD in 2 cases.His,np11255 responded to PD in 1 case, and np14180 responded to PD in 2 cases. Complex I activity is low. The relationship between clinical symptoms and future symptoms should be determined. The normal cDNA structure of the 24-kDa protein was analyzed by PCR. The cDNA of the 24-kDa protein was reduced to 1 million bp. The 24-kDa DNA fragment is 50 ~ 60kb in length and 8 kb in length. In situ hybridization, chromosome18 and short arms exist. In the future, there will be different patient groups in the future.

项目成果

Mizuno Y,Ikebe S,Hattori N,et al.: "Role of mitochondria in the etiology and pathogenesis of Parkinson's disease" Biochimica Biophysica Acta. in press. (1995)

Mizuno Y，Ikebe S，Hattori N，等人：“线粒体在帕金森病的病因学和发病机制中的作用”Biochimica Biophysicala Acta。

Mochizuki H,Imai H,Mizuno Y,et al.: "Iron accumulation in the substantia nigra of MPTP-induced hemiparkinsonian monkeys" Neuroscience Letter. 168. 251-253 (1994)

Mochizuki H、Imai H、Mizuno Y 等人：“MPTP 诱导的偏帕金森猴黑质中的铁积累”神经科学快报。

Mizuno Y,Matuda S,Yoshino H,et al.: "An immunohistochemical study on alpha-ketoglutarate dehydrogenase complex in Parkinson's disease" Annals of Neurology. 35. 204-210 (1994)

Mizuno Y、Matuda S、Yoshino H 等人：“帕金森病中α-酮戊二酸脱氢酶复合物的免疫组织化学研究”神经病学年鉴。

Mochizuki H,Nishi K,Mizuno Y,et al.: "Apoptosis is induced by MPP+ in a ventral mesencephalic striatal coculture" Neuroscience Letter. 170. 191-194 (1994)

Mochizuki H、Nishi K、Mizuno Y 等人：“在腹侧中脑纹状体共培养中 MPP 诱导细胞凋亡”《神经科学快报》。

Ikebe S,Tanaka M,Ozawa,T: "Point mutations of mitochondrial genome in Parkinson's disease" Molecular Brain Research. in Press. (1995)

Ikebe S，Tanaka M，Ozawa，T：“帕金森病线粒体基因组的点突变”分子脑研究。