权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

シナプス形成・維持・再生におけるガングリオシドの役割

神经节苷脂在突触形成、维持和再生中的作用

基本信息

批准号：
04250213
负责人：
黒田洋一郎
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ラット(胎令18日-19日)脳から大脳皮質を取り出し、パパインによ酵素処理で細胞を単離・培養した。この初代培養系に、およそ培養開始7日目頃fura-2を負荷して細胞内Ca^<2+>濃度多点同時解析システムでモニターすると、視野内のほぼ総てのニューロン同期した細胞内Ca^<2+>の自発的な変動を示する様になる。同時になった電顕によるシナプスの定量的な観察の結果、培養ニューロン間のシナプス数と細胞内Ca^<2+>濃度変動の振動数とが強い相関を示すことが明らかになっている(相関係数:r=0.90)。従って、一定条件下で細胞内Ca^<2+>濃度変動の振動数を側定することによって、培養ニューロン間のシナプス形成を簡便にす推定することが可能となる。図に示した様に、培養2日目よる、エンドグリコセラミダーゼ(EGCase)とアクチベーターを培養液に添加し、培養7-8日目まで添加し続けておくと、ニューロン間で同期してみられる細胞内Ca^<2+>濃度変動の振動数が無添加コントロールに比べ酵素濃度依存的に有意に減少した。前述の振動数と電顕によって実際に観察した場合のシナプス数との正の相関から、EGCaseにより、ガングリオシドの糖鎮部分を除くことによって、培養大脳皮質ニューロン間のシナプス形成が抑制されたことが示唆された。それをconfirmすべく、同様に処理した培養ニューロン系を電顕用に固定し、実際に形成されたシナプス数を多数の電顕写真から定量化した。preliminalyな結果は、EGCase処理標本でシナプス数の減少、すなわちシナプス形成が抑制されていることを示している。

(18 - 19 days of gestation) In this primary culture line, the concentration of intracellular Ca^<2+> was analyzed simultaneously at multiple points after 7 days of culture, and the spontaneous movement of intracellular Ca^<2+> was shown at the same time. At the same time, the results of quantitative observation, the number of changes between cultures and the number of vibrations of intracellular Ca^<2+> concentration showed a strong correlation (correlation coefficient:r=0.90). Under certain conditions, it is possible to determine the vibration number of intracellular Ca^<2+> concentration and to estimate the formation of Ca ^<2 +> in culture. In addition, the concentration of Ca^<2+> in the cells changed during the same period. The number of vibrations was intentionally decreased compared with that of the enzyme concentration. The number of vibrations and the number of positive correlations between them are observed in the case of EGCase, and the number of positive correlations between EGCase and glucose is detected in the case of culture. The number of cells in the culture system is determined by the number of cells in the culture system and the number of cells in the culture system. Preliminaly results in a decrease in the number of EGCase treatments and an inhibition of EGCase formation.