記憶障害の分子メカニズム:培養海馬・大脳皮質神経細胞間のシナプス形成・維持機構

记忆障碍的分子机制：培养的海马和大脑皮层神经元之间突触形成和维持的机制

• 批准号: 02240108
• 负责人: 黒田 洋一郎
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02240108/
• 关键词: 異常発芽; シナプス形成; 培養ニュ-ロン; ATP; たん白質りん酸化; アルツハイマ-病

異常発芽研究のため培養中枢ニュ-ロン間形成・維持の定量的解析法の開発と確立1<電顕による培養大脳皮質ニュ-ロン間に形成されたシナプスの観察の計測.>___ー培養開始後7日の大脳皮質ニュ-ロン系はすでに報告したように、多数のニュ-ロンが同期した細胞内Ca^<2+>濃度の変動を示した。この系を固定包埋し、電顕で観察すると、シナプス構造が多数認められ、1サンプル当りの観察視野数を多くして平均値をとることにより、定量化することができた。2<ATPおよびATPγSの長期添加の影響.>___ー培養開始時からATP(10〜160μM)を長期添加して7日目にニュ-ロン内Ca^<2+>変動の頻度を指標にした機能アッセイを行い、その後同じサンプルを電顕用に固定した。無添加sister cultureの対照に比し、ATP添加のcultureではCa^<2+>変動の平均振動数および単位面積あたりの形成シナプス数とも増加の傾向を示した。この結果はectoーprotein kinaseの阻害剤と考えられるKー252bがこの系でのシナプス形成を抑制したことから考えられる「細胞内ATPによる細胞表面たん白質のリン酸化がシナプス形成の促進に重要である」という仮説を支持している。なおニュ-ロン内Ca^<2+>変動の同期を指標としたアッセイと、電顕観察による形成されたシナプスの実数の測定値との間に見られる正の相関(r=0.90)はより一般にも見られ、機能アッセイ系によりシナプス形成の解析が簡便に行えることが明らかになった。この系により培養系におけるシナプス形成・維持の分子メカニズムについて広範な情報が得られ、脳内シナプス結合の可能性ばかりでなく、アルツハイマ-病など脳の老化関連神経疾患の治療法や予防法の開発にも役立つことが期待できる。

Abnormal 発 bud research の た め training center ニ ュ - ロ ン の formation, keeping the quantitative analytical method between の open 発 と established 1 < electric 顕 に よ る cultivate large 脳 cortex ニ ュ - ロ ン に formed between さ れ た シ ナ プ ス の 観 examine の measuring. > ___ ー の training after the start of 7 big 脳 cortex ニ ュ - ロ ン department は す で に report し た よ う に, most の ニ ュ - ロ ン し が the same period The <s:1> variation of Ca^<2+> concentration in た cells を indicates <s:1> た. こ の を fixed embedding し, electric 顕 で す was 観 る と, シ ナ プ ス tectonic が most recognize め ら れ, 1 サ ン プ ル when り の 観 was made in the field of vision for more を く し て on average numerical を と る こ と に よ り, quantitative す る こ と が で き た. 2 < ATP お よ び ATP gamma S long-term の add の. > ___ ー training at the beginning of the か ら ATP (10 to 160 microns) を long-term add し て 7 orders に ニ ュ - ロ ン within Ca ^ 2 + > < - move の frequency を index に し た function ア ッ セ イ を い, そ の after with じ サ ン プ ル を electric 顕 with に し た. Without adding sister culture の polices according to add の に し, ATP culture で は Ca ^ 2 + > < - number of moving average vibration の お よ び 単 an area あ た り の form シ ナ プ ス number と も raised plus の tendency を shown し た. こ の results は ecto ー protein kinase の resistance against tonic と exam え ら れ る K ー 252 b が こ の is で の シ ナ プ ス form を inhibit し た こ と か ら exam え ら れ る "ATP in the cell に よ る cell surface た ん white matter の リ ン acidification が シ ナ プ ス form important で の promote に あ る" と い う 仮 says を support し て い る. Ca within な お ニ ュ - ロ ン ^ 2 + > < - move の を index over the same と し た ア ッ セ イ と, electricity 顕 観 examine に よ る form さ れ た シ ナ プ ス の be several の on determination of numerical と の に between ら れ る masato is の phase (r = 0.90) は よ り general に も see ら れ, function ア ッ セ イ department に よ り シ ナ プ ス line form simple analytical が の に え る こ と が Ming ら か に な Youdaoplaceholder0. こ の is に よ り training department に お け る シ ナ プ ス の formation, keeping the molecular メ カ ニ ズ ム に つ い て hiroo van な intelligence が ら れ, 脳 シ ナ プ ス combining possibility の ば か り で な く, ア ル ツ ハ イ マ - disease な ど 脳 の aging masato や の even god 経 disease therapy to prevent method の open 発 に も servants made つ こ と が expect で き る.

项目成果

黒田 洋一郎: "ヒト脳ーー最後のフロンテイアへの挑戦" 科学(岩波書店). 60. 337-346 (1990)

黑田洋一郎：“人类大脑——对最后前沿的挑战”（岩波书店）。

Kuroda,Y.,Kobayashi,K.,Muramoto,K.,Ogura,A.,Kudo,Y.,Nakanishi,S.& Matsuda,Y.: "Experimental synaptic degeneration as a model for the pathogenesis of Alzheimer's disease:monoclonal antibodies and a protein kinase inhibitor block synapse formation/maintenan

黑田 Y.、小林 K.、村本 K.、小仓 A.、工藤 Y.、中西 S.

Kuroda,Y.,Muramoto,K.,Kobayashi,K.,Hirata,Y.,Cho,F.& Nagatsu,T.: "Assay system for neurotoxicants causing Parkinson's disease:MPP inhibits survival of cultured neurons from substantia nigra of fetal monkey(Macac facicularis)." “Alzheimer's and Parkinson's

Kuroda, Y.、Muramoto, K.、Kobayashi, K.、Hirata, Y.、Cho, F. 和 Nagatsu, T.：“引起帕金森病的神经毒物的检测系统：MPP 抑制胎儿黑质培养神经元的存活猴子（猕猴）。”“阿尔茨海默氏症和帕金森氏症

黒田 洋一郎: "モノクロ-ナル抗体の利用" 「神経生化学」(新生化学実験講座11 日本生化学会編 東京化学同人). 104-115 (1990)

黑田洋一郎：《单克隆抗体的使用》《神经生物化学》（新生物化学实验教程11，日本生物化学会编，东京化学同人）104-115（1990）。