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脳血管内皮細胞による選択的透過機能発現とその調節

脑血管内皮细胞选择性通透功能的表达及其调控

基本信息

批准号：
04263234
负责人：
加藤泰治
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04263234/
关键词：
血液脳関門内皮細胞アストロサイトタイトジャンクション

项目摘要

内皮細胞とアストロサイトを共培養した脳血液関門(BBB)モデル系を作成し、この系を使用して、BBB形成におけるアストロサイトやその他の因子の影響、及び各種物質、薬剤のBBB透過性を検討した。内皮細胞にはウシ大動脈内皮細胞、アストロサイトには胎生ラット脳のものを使用し、二重細胞培養の内側メンブレンの片面にアストロサイト、対面に内皮細胞を培養した。この内側メンブランを縦にセットして透過実験を行ッた。今回は透過物質にドーパミンを使用し、BBBのバリア機能の発現について検討した。すなわち、血管内腔側に相当するルミナールチャンバーに高濃度のドーパミンを入れ、時間を追って血管外側に相当するダブルニナールチャンバーに透過してくるドーパミンの濃度を電気化学検出器をディテクターとするHPLCによって測定した。内皮細胞単独の場合と、アストロサイトと共培養した場合とで、内皮細胞のバリア機能に差が生じうるかどうかについて検討したところ、10%FCSを含んだ培地条件ではほとんど差が認められなかったが、1%FCS下では透過性に差が見られた(この時共培養系の透過実験の際にはアストロサイトをはがして、内皮細胞のみとして実験している)。またアストロサイトとの共培養時には電顕にて内皮細胞間にタイトジャンクションの形成が認められた。この結果より、大動脈内皮細胞に対しても、アストロサイトが内皮細胞のタイトジャンクション形成促進や物質透過性の減少に働く可能性が示唆された。今後はまずこれらの再現性を綿密にチェックし、また、脳毛細血管の内皮細胞も使用して同様の実験を行い、大動脈内皮細胞との比較を試みる予定である。

Endothelial cells were co-cultured to form a blood barrier (BBB) system, and the effects of other factors on BBB formation and BBB permeability of various substances and agents were discussed. Endothelial cells are cultured in vitro. This is the first time that I've seen this. This time, we will discuss the development of BBB's function through the use of materials. High concentration of the drug in the lumen of the blood vessel is determined by HPLC with time tracking. Endothelial cells are isolated and co-cultured. Endothelial cells function is poor when cultured with 10% FCS. Endothelial cells permeability is poor when cultured with 10% FCS.(This time co-culture system through the implementation of the process of cell culture, endothelial cell culture) When co-cultured with endothelial cells, the formation of endothelial cells was observed. These results suggest that endothelial cell formation may promote the reduction of permeability of vascular endothelial cells. In the future, it will be possible to ensure close reproducibility of these methods, and also to implement the same practice with capillary endothelial cells, and to compare aortic endothelial cells with aortic endothelial cells.