血液・脳関門モデル系の確立とその応用-神経賦活剤による先天性および二次性脳障害治療の試み-

血脑屏障模型系统的建立及其应用-利用神经激活剂治疗先天性和继发性脑疾病的尝试-

• 批准号: 03557045
• 负责人: 加藤 泰治
• 金额: $ 9.15万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03557045/
• 关键词: 血液・脳関門; 血管内皮細胞; 内皮細胞; アストロサイト; グリア; BBBモデル; グリオスタチン

1、当初の計画したBBBモデルの設定方法1に従い、アストロサイトおよびウシ大動脈内皮細胞は、それぞれ単独に培養細胞を調製できた。しかし方法2のBBBモデルの設定段階で、内皮細胞は問題なく内側チャンバ-の膜面で単相に培養できたが、アストロサイトは培養が難しいことがわかり、ゼラチン、フィブロネクチン、コラ-ゲン、および他の細胞外マトリックスを用いて膜面接着性を検討した結果、タイプ1コラ-ゲンがアストロサイトの膜面接着に一番適していることが分かった。2、方法3の物質透過性実験にあたり、2つのBBBモデルを作成することにした。すなわち、(a)当初の計画どおり内側チャンバ-のバイオポア膜をはさんで2種の細胞を上下に培養するサンドイッチモデルと、(b)膜面の片側(内側)にアストロサイトと内皮細胞をマクラ状に培養したモザイクモデルを調製することができた。また、実際のダブルチャンバ-を用いた自動潅流実験系の予備実験結果より、内外二つのチャンバ-を水平に設置した開放系より、内側チャンバ-を垂直に置いて左右別の閉鎖チャンバ-をそれぞれ同期に自動潅流するシステムが、定量的解析を行うには一番適していることが分かった。次年度はこの系を用いて、各種薬剤の選択的透過性実験を行う予定である。3、アストロサイト由来のグリア細胞増殖抑制因子(グリオスタチン)が、アストロサイトの増殖抑制作用だけではなく、ニュ-ロンに対して生存維持と神経突起伸展作用を示し、さらに血管内皮細胞の増殖を修飾することを見いだした。現在、この因子の化学構造を解析中である。次年度は、この因子を含めて、アストロサイトが産生する各種の因子で内皮細胞をプライムし物質の選択的特異性発現に与える効果を検討する計画である。

1, original の project し た BBB モ デ ル の set method 1 に 従 い, ア ス ト ロ サ イ ト お よ び ウ シ は artery endothelial cells, そ れ ぞ れ 単 に alone cultured cells を modulation で き た. し か し method 2 の BBB モ デ ル の set Duan Jie で, endothelial cell は な く medial チ ャ ン バ - の membrane で 単 growing に で き た が, ア ス ト ロ サ イ ト は cultivate が difficult し い こ と が わ か り, ゼ ラ チ ン, フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン, コ ラ - ゲ ン, お よ び he の extracellular マ ト リ ッ ク ス を with い て then sex at the membrane surface を beg し 検 た knot Fruit, タ イ プ 1 コ ラ - ゲ ン が ア ス ト ロ サ イ ト の membrane surface then に a optimum し て い る こ と が points か っ た. 2. Method 3: Experiment on the permeability of substances にあた にあた and 2 にあた <s:1> BBBモデ モデ を を are used to make する する とに とに た た た た た た た. す な わ ち, (a) at the beginning の project ど お り medial チ ャ ン バ - の バ イ オ ポ ア membrane を は さ ん で two の cell を fluctuation に culture す る サ ン ド イ ッ チ モ デ ル と, (b) film surface の side (inside) に ア ス ト ロ サ イ ト と endothelial cells を マ ク ラ shape に cultivate し た モ ザ イ ク モ デ ル を modulation す る こ と が で き た. ま た, be interstate の ダ ブ ル チ ャ ン バ - を use い た 潅 flow automatically be 験 is の reserve be 験 results よ り, both inside and outside two つ の チ ャ ン バ - に を level set し た open system よ り, medial チ ャ ン バ - を vertical に buy い て around don't の atresia チ ャ ン バ - を そ れ ぞ れ に 潅 automatically flow over the same す る シ ス テ ム が line, quantitative analytical を う に は a optimum し て い Youdaoplaceholder0 る とが points とが った. In the following year, the <s:1> である <s:1> will be determined by を using the permeability of を て and the selection of 択 for various drugs through を experiments う. 3, ア ス ト ロ サ イ ト origin の グ リ ア suppressor cells raised colonization (グ リ オ ス タ チ ン) が, ア ス ト ロ サ イ ト の raised colonization inhibition だ け で は な く, ニ ュ - ロ ン に し seaborne て survival maintain と god 経 protrusions extending action を し, さ ら に endothelial cells の raised colonization を modified す る こ と を see い だ し た. Now, in the を analysis of the chemical structure of the <s:1> factor <e:1>, である. Annual は, こ を の factors including め て, ア ス ト ロ サ イ ト が produce す る various の factors で endothelial cell を プ ラ イ ム し material の sentaku specificity 発 に and え る unseen fruit を beg す 検 る project で あ る.

项目成果

Asai,Kiyorumi: "A novel glial growth inhibitory factor,gliostatin,derived from neruofibroma" J.Neurochem.

Asai，Kiyorumi：“一种新型神经胶质生长抑制因子，胶质抑素，源自神经纤维瘤”J.Neurochem。

Ito,Jinishi: "Interaction of sialosyl cholesterol with cell surface of rat astrocytes and its biological activities" Neurochem.Int.

Ito，Jinishi：“唾液酸基胆固醇与大鼠星形胶质细胞表面的相互作用及其生物活性” Neurochem.Int。

Sugimoto,Toru: "Alpha-smooth-muscle actin and desmin espression in human neuro-blastoma cell lines." Int.J.Cancer. 48. 277-283 (1991)

Sugimoto,Toru：“人类神经母细胞瘤细胞系中的α-平滑肌肌动蛋白和结蛋白表达。”

Ito,Jinichi: "A cellular uptake of cisplatinum-encapsulating liposome through endocytosis by human neuroblastoma cells." Neurochem.Int.18. 257-264 (1991)

Ito，Jinichi：“人类神经母细胞瘤细胞通过内吞作用吸收顺铂包裹的脂质体。”

Uemura,Kenji: "Identification of immuno-reactive lipocortin l-like molecules in serum and plasma by enzyme immunoassay for lipocortin 1." Biochim.Biophys.Acta.

Uemura，Kenji：“通过脂皮质素 1 酶联免疫分析鉴定血清和血浆中的免疫反应性脂皮质素 L 样分子。”