ヒト神経芽腫細胞増殖抑制因子の分子作用機構と神経芽腫治療の可能性
ヒト神経芽腫細胞増殖抑制因子の分子作用機構と神経芽腫治療の可能性
批准号:
06282253
负责人:
加藤 泰治
金额:
$2.24万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份:
1994
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1994 至 --
中文摘要
脳神経系での「液性因子によるニューロン・グリア相関」の研究を進める中、当該研究者らはラットグリアがマウス神経芽腫細胞の増殖を特異的に抑制するタンパク性因子(神経芽腫細胞増殖抑制因子:r-NGIF)を多量に産生していることを見い出した。今年度はヒト神経芽腫細胞増殖抑制因子(h-NGIF)の精製を試みた。当該研究者らの研究室で樹立したアストロサイトーマ(NAC-1)の無血清条件培養液を大量に調製し、エコノQ、エコノCM、スーパーロース120カラムを用い、ヒト神経芽腫細胞(TGW)の細胞増殖抑制活性を基準にして精製を試みた。活性は第3のカラムステップで消失し、条件培養液からの精製は困難と判断し、平行して検討してきた分子生物学的手法に切り替えることとした。つまり増殖相に発現が多く静止相に少ないh-NGIF発現量の差を利用した、ディファレンシアルハイブリダイゼーション法あるいはディファレンシアルディスプレイ法を用いてh-NGIFcDNAをクローニングすることにした。現在、増殖相と静止相のNAC-1細胞からそれぞれのcDNAライブラリーを作成することができ、増殖相特異的に発現するcDNAクローンを選択中である。えられたクローンをすべて塩基配列決定するとともに、プラスミドcDNAを直接発現ベクターに組みかえて、大腸菌あるいはCOS細胞にトランスフェクトし、発現されるタンパクの細胞増殖抑制活性を基にh-NGIFcDNAをクローニングする方法も試してみる。現在の生物活性測定法(TGWの細胞増殖抑制活性)はタンパクの直接発現法でも十分クローニングできる感度を持ち合わせている。
英文摘要
脳神経系での「液性因子によるニューロン・グリア相関」の研究を進める中、当該研究者らはラットグリアがマウス神経芽腫細胞の増殖を特異的に抑制するタンパク性因子(神経芽腫細胞増殖抑制因子:r-NGIF)を多量に産生していることを見い出した。今年度はヒト神経芽腫細胞増殖抑制因子(h-NGIF)の精製を試みた。当該研究者らの研究室で樹立したアストロサイトーマ(NAC-1)の無血清条件培養液を大量に調製し、エコノQ、エコノCM、スーパーロース120カラムを用い、ヒト神経芽腫細胞(TGW)の細胞増殖抑制活性を基準にして精製を試みた。活性は第3のカラムステップで消失し、条件培養液からの精製は困難と判断し、平行して検討してきた分子生物学的手法に切り替えることとした。つまり増殖相に発現が多く静止相に少ないh-NGIF発現量の差を利用した、ディファレンシアルハイブリダイゼーション法あるいはディファレンシアルディスプレイ法を用いてh-NGIFcDNAをクローニングすることにした。現在、増殖相と静止相のNAC-1細胞からそれぞれのcDNAライブラリーを作成することができ、増殖相特異的に発現するcDNAクローンを選択中である。えられたクローンをすべて塩基配列決定するとともに、プラスミドcDNAを直接発現ベクターに組みかえて、大腸菌あるいはCOS細胞にトランスフェクトし、発現されるタンパクの細胞増殖抑制活性を基にh-NGIFcDNAをクローニングする方法も試してみる。現在の生物活性測定法(TGWの細胞増殖抑制活性)はタンパクの直接発現法でも十分クローニングできる感度を持ち合わせている。
期刊论文(4)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Nakanishi,K.: "Astrocytic contribution to functioning synapse fromation estimated by spontaneous neuronal intracellular Ca2+ oscillation" Brain Research. 659. 169-178 (1994)
Nakanishi,K.:“通过自发神经元细胞内 Ca2+ 振荡估计星形胶质细胞对功能性突触形成的贡献”大脑研究。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
Takeuchi,M: "Aberrant production of gliostatin/platelet-derived endothelial growth factor in rheumatioid arthritis" Arthritis Rheumatism. 37. 662-672 (1994)
Takeuchi,M:“类风湿关节炎中胶质抑素/血小板衍生内皮生长因子的异常产生”关节炎风湿病。
DOI:
--
发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
ヒト神経芽腫細胞増殖抑制因子の分子作用機構と神経芽腫治療の可能性
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批准号:07274255
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.11万
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财政年份:1995
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
シナプス伝達系でのアストロサイトの役割
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批准号:07278239
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1995
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
グリア産生因子からみた神経難病病因論の一側面
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批准号:05251216
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.34万
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财政年份:1993
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
脳血管内皮細胞による選択的透過機能発現とその調節
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批准号:05256228
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.66万
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财政年份:1993
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
グリア産生因子からみた神経難病病因論の一側面
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批准号:04258217
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.41万
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财政年份:1992
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
脳血管内皮細胞による選択的透過機能発現とその調節
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批准号:04263234
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.47万
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财政年份:1992
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
グリア産生因子からみた神経難病病因論の一測面
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批准号:03263218
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.15万
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财政年份:1991
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
血液・脳関門モデル系の確立とその応用-神経賦活剤による先天性および二次性脳障害治療の試み-
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批准号:03557045
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项目类别:Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
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资助金额:$9.15万
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财政年份:1991
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
脳血管内皮細胞による選択的透過性機能発現とその調節
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批准号:03268229
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.22万
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财政年份:1991
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
グリア細胞増殖抑制因子(GGIF)の抗腫瘍作用機構の解明とその臨床応用への可能性
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批准号:03152113
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项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
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资助金额:$2.05万
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财政年份:1991
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
アストログリアの腫瘍性増殖発現とグリア細胞成長因子遺伝子の活性化機構
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批准号:02152099
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项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
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资助金额:$2.11万
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财政年份:1990
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
グリアが産生する液性因子からみたアルツハイマ-病因論の一側面
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批准号:01658511
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.47万
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财政年份:1989
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
グリアの腫瘍性増殖発現に伴うグリア細胞成長因子(GMF)遺伝子の活性化機構
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批准号:58220020
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项目类别:Grant-in-Aid for Special Project Research
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资助金额:$1.41万
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财政年份:1983
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
神経芽腫増殖抑制因子の同定とその臨床応用への可能性
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批准号:58015098
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项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
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资助金额:$2.05万
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财政年份:1983
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
星状神経膠腫が産生するグリア細胞成長因子様物質の同定
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批准号:57015086
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项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
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资助金额:$1.22万
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财政年份:1982
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
神経芽腫増殖抑制因子の同定とその生物活性
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批准号:57214026
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项目类别:Grant-in-Aid for Special Project Research
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资助金额:$0.83万
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财政年份:1982
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
グリア細胞成長因子(GMF)の作用発現機構の解明
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批准号:57580125
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项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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资助金额:$0.9万
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财政年份:1982
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
グリア細胞成長因子による神経膠腫の増殖調節
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批准号:X00090----557076
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项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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资助金额:$0.9万
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财政年份:1980
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负责人:加藤 泰治
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依托单位:
海外基金