血管内皮細胞におけるエンドセリン-1の産生機構

血管内皮细胞内皮素1的产生机制

• 批准号: 04263237
• 负责人: 森本 史郎
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Osaka University of Pharmaceutical Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04263237/
• 关键词: エンドセリン変換酵素; ビッグエンドセリン-1; ビッグエンドセリン-3; フォスフォラミドン; 金属プロテアーゼ

1.培養血管内皮細胞を用いた実験培養ブタ血管内皮細胞の膜分画とbigET-3を反応させると、顕著なimmunoreactive(IR)-ET量の増加が認められ、フォスフォラミドン(10^<-4>M)はこのIR-ETの増加をほぼ完全に阻害した。反応溶液の逆相HPLCを行ったところ、合成ET-3の溶出位置に一致する分画にET免疫活性ピークが認められた。次に膜分画を可溶化して可溶化成分のゲル濾過を行い、各溶出分画のbigET-3変換活性を測定すると、分子量約300kDaに相当する分画に変換活性ビークが認められ、この溶出パターンはbigET-1変換活性のそれと一致した。フォスフォラミドンは、これら両変換活性をほぼ完全に阻害した。無傷の培養血管内皮細胞にbigET-3を添加すると、ET-3への変換がみられ、この外因性bigET-3の変換もフォスフォラミドンにより有意に抑制された。2.培養血管平滑筋細胞を用いた実験培養ブタ血管平滑筋細胞から膜分画を調製し酵素試料とした。本分画にもフォスフォラミドン感受性のbigET-3変換活性が認められた。本分画のbigET-1変換活性は、反応液にbigET-3が存在する場合、有意に低下した。したがって、本分画のbigET-1及びbigET-3変換活性は同一酵素によるものと考えられた。3.麻酔ラットを用いた実験節遮断された体重約300gのSD系雄性ラットにbigET-3(3nmo1/kg)を投与すると、特続的な血圧上昇反応がみられ(最大反応:約20mmHg)、この昇圧反応は、フォスフォラミドン(5mg/kgi.v.)を前処置することにより有意に抑制された。一方、同用量のフォスフォラミドンは、ET-3の昇圧反応に影響を与えなかった。

1. The increase in the amount of immunoreactive(IR)-ET in cultured vascular endothelial cells was completely inhibited by the increase in the amount of IR-ET in cultured vascular <-4>endothelial cells. Reverse phase HPLC analysis of ET-3 in reverse phase solution was performed to determine the identity of ET-3 in the dissolution site. The solubility of the solubilized components in the secondary membrane was determined by filtration, and the bigET-3 conversion activity of each solubilized component was determined. The molecular weight of the solubilized component was about 300kDa. The bigET-1 conversion activity of the solubilized component was determined by filtration. The first step is to change the activity of the cell phone. In cultured vascular endothelial cells without injury, bigET-3 is added, ET-3 is changed, and exogenous bigET-3 is changed, which is intentionally inhibited. 2. Cultured vascular smooth muscle cells are used to culture vascular smooth muscle cells and modulate enzyme samples. This part of the picture shows that the sensitivity of the bigET-3 is very high. The activity of bigET-1 in this sub-painting is intentionally decreased when bigET-3 is present in the reaction solution. The activity of bigET-1 and bigET-3 in the same enzyme was detected. 3. SD male weighing about 300g, with a maximum weight of 3nmo1/kg, and a maximum weight of about 20mmHg, and a maximum weight of about 5mg/kg. Before the meeting, the two sides agreed to hold down the talks. One side, the same amount of white powder, ET-3 and pressure reaction effect

项目成果

松村 靖夫: "エンドセリン変換酵素-ホスホラミドン感受性膜結合型金属プロテアーゼを中心に" 血管と内皮. 2. 32-40 (1992)

Yasuo Matsumura：“内皮素转换酶 - 重点关注磷酰胺敏感的膜结合金属蛋白酶”血管和内皮。

Yaeko Tsukahara: "Phaosphoramidon-sensitive endothelim converting enzyme in cultured vaxaulan smooth muscle cells converts big endothelim-3 to endothelim-3." Life Sci.(1993)

Yaeko Tsukahara：“培养的 vaxaulan 平滑肌细胞中的 Phoosphoramidon 敏感内皮素转化酶将大内皮素 3 转化为内皮素 3。”

Yasuo Matsumura: "Phosphoramidon-sensitive endothelim-converting enzyme in vasaulan endothebial call converts big endothelim-1 and big endothelim-3 to thei mature form." FEBS Lett. 305. 86-90 (1992)

Yasuo Matsumura：“血管内皮细胞中的磷酰胺敏感内皮素转化酶将大内皮素 1 和大内皮素 3 转化为成熟形式。”

Yasuo Matsumura: "A simple method for maasurement of Phosphoramidon-sensitive endothelim converting enzyme activity" Life Sci. 51. 1603-1611 (1992)

Yasuo Matsumura：“一种测量磷酰胺敏感内皮转化酶活性的简单方法”Life Sci。

Yasuo Matsumura: "Big endothelim-3-induced hypertension and its inhibition by phosphoramidon in anesthetized rats." Eur.J.Pharmacal.230. 89-93 (1993)

Yasuo Matsumura：“大内皮素 3 诱导的高血压及其对麻醉大鼠的磷酰胺的抑制作用。”