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血管内皮細胞におけるエンドセリンー1の産生機構

血管内皮细胞内皮素1的产生机制

基本信息

批准号：
03268232
负责人：
森本史郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University of Pharmaceutical Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

培養ブタ血管内細胞を用い、以下の実験結果を得た。1.培養ブタ血管内皮細胞の膜分画をbig ETー1あるいはbig ETー3と反応させた場合、反応溶液中にそれぞれETー1、ETー3産生増加が認められ、これらの作用はフォスフォラミドンにより顕著に阻害された。2.培養ブタ血管内皮細胞10^8個から膜分画を調製し、0.5%CHAPSにより可溶化した。COSMOGEL QAカラムを用いて可溶化成分の陰イオン交換クロマトグラフィ-を行い、各溶出分画のビッグエンドセンリー1(big ETー1)変換活性を測定したところ、塩濃度0.2Mに相当する分画に変換活性ピ-クが認められた。さらに上記ピ-ク分画についてゲル濾過を行い、各溶出分画の変換活性を測定した結果から、フォスフォラミドン感受性ETー1変換酵素の分子量は約300ー350kDaであることが示された。また、ゲル濾過後の各溶出分画についてbig ETー3変換活性を測定したところ、big ETー1変換活性とほぼ同様の溶出パタ-ンが得られた。3.無傷の培養ブタ血管内皮細胞をbig ETー1と一定時間加温すると、時間に応じたいETー1産生がみられた。また同様の変換反応はbig ETー3を基質として用いた場合にも認められた。4.以上、血管内細胞にはbig ETー1及びbig ETー3変換活性を有する分子量300ー350kDaのフォトフォラミドン感受性エンドセリン変換酵素が存在することが明らかとなった。

The following results were obtained from the use of cultured intravascular cells. 1. The membrane separation of cultured vascular endothelial cells was observed in the presence of large ET-1 and large ET-3 in the reaction solution. 2. 10^8 cultured vascular endothelial cells were solubilized by 0.5% CHAPS. COSMOGEL QA system was used to determine the anion exchange rate of solubilized components, the anion exchange rate of solubilized components, and the activity of each solubilized component. The molecular weight of the enzyme, which is sensitive to ET-1 conversion, is about 300 - 350kDa. After filtration, the dissolution profile of each sample was determined by the big ET-3 conversion activity and the big ET-1 conversion activity. 3. No injury to the cultured vascular endothelial cells big ET-1, a certain time to warm up, time to warm up ET-1 production The same thing happened to the big ET. 4. The above results show that the activity of large ET-1 and large ET-3 in vascular cells is higher than that of large ET-1 and large ET-3 in vascular cells. The molecular weight of large ET-1 and large ET-3 is 300 kDa. The activity of large ET-1 and large ET-3 in vascular cells is higher than that of large ET-3 in vascular cells.