イオン・溶質輸送と共役ネットワーク

离子/溶质传输和共轭网络

• 批准号: 04266101
• 负责人: 川喜田 正夫
• 金额: $ 95.36万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04266101/
• 关键词: 共役物質輸送; Na^+; H^+アンチポーター; H^+; ジペプチドシンポーター; Band 3; テトラサイクリン; アラニンキャリアー; バクテリオロドプシン; K^+-ATPase; イオン輸送; H^+-アンチポーター; ジペプチド輸送系; H^+ヘキソース共輸送; テトラサイクリン排出タンパク質; H^+ーアンチポーター; 酸性アミノ酸輸送系; K^+ーATPase

細胞の膜系における各種のイオンや溶質の共役輸送系の実体とそのネットワークに関して、以下の結果を得た。1.Na^+/H^+-アンチポーター(NHE)のisoformに対する特異的ペプチド抗体を作成し、各isoformの組織における局在性を明らかにした(川喜田)。NHE1 isoformの活性の細胞内pHによる調節の情報がカルモジュリンによって伝達されることを示し、調節に関与する領域を同定した(重川)。腸炎ビブリオNHEのアミロライド結合部位の変異体では、NHEのイオン特異性が同時に変化することを明らかにした(土屋)。2.H^+/ジペプチドシンポーターのcDNAクローニングに成功し、塩基配列を決定した(乾)。腎上皮細胞による有機アニオンの経細胞輸送のin vitro実験系を確立し、プロテインキナーゼCによる活性調節を明らかにした(高野)。3.赤血球膜のアニオン輸送体Band 3の構造をタンパク質化学的に解析し、新しい構造モデルを提案した。(濱崎)。4.テトラサイクリン/H^+アンチポーターのトポロジーおよび反応機構を、復帰変異解析、Cys走査変異体の解析によって詳しく研究し、精細な構造モデルを発表した(山口)。5.好熱菌のアラニンキャリアーの大量発現に成功した。さらに結晶化による詳細な構造解析の方向を指向している(平田)。6.Na^+/K^+-ATPaseのαβ分子集合体形成機構について、H^+/K^+-ATPaseとのキメラを用いて解析し、N末50残基については互換性があることを明らかにした(川村)。また、α1およびα3 isoformの間の特性のちがいがNa^+遊離サイトの基質親和性のちがいに基づくものであることを明らかにした(原)。7.バクテリオロドプシンのH^+移動反応に関与するアミノ酸残基として、Asp85,Asp212,Asp96/Thr46,Trp182を同定することに成功した(前田)。

The following results were obtained for the membrane system of cells and the common transport system of various solutes. 1.Na^+/H^+-アンチポーター(NHE)のisoformに対するSpecial ペプチドantibodies are made, and each isoform tissue is made of を明らかにした (Kawakita). NHE1 Information on the activity of isoform and intracellular pH regulationよって伝达されることをshowし, regulating に关 and する区を同定した (Shigegawa). Enteritis ビブリオNHE のアミロライドbinding site の変variant では, NHE のイオンspecific がsimultaneously に変化することを明らかにした(Tsuchiya). 2.H^+/ジペプチドシンポーターのcDNAクローニングに成し, 桩 Basic arrangementをdeterminationした (dry). Renal epithelial cell organic アニオンの経cell deliveryのin The in vitro system has been established and the activity of the プロテインキナーゼCによる is regulated by Mingらかにした (Takano). 3. Analysis of the chemical structure of the erythrocyte membrane のアニオン transporter Band 3 and the proposal of a new structural material. (Hamasaki). 4. テトラサイクリン/H^+アンチポーターのトポロジーおよび Reflection mechanism を, complex solution Analysis, Cys walk-through analysis of the variant, detailed research, and detailed structure analysis (Yamaguchi). 5. A large number of heat-loving fungi have been successfully used. The direction of crystallization of さらにによる in detail and structural analysis are directed to している (Hirata). 6. Na^+/K^+-ATPase's αβ molecule aggregate formation mechanism, H^+/K^+-ATPa Seとのキメラを is analyzed by いてし, N-terminal 50 residues については interchangeability があることを明らかにした (Kawamura).また、α1およびα3 isoform's characteristic のちがいがNa^+free サイトのmatrix affinity のちがいにbased づくものであることを明らかにした (original). 7.Hydron H^+ mobile reaction and するアミノ acid residue として, Asp85, Asp212,Asp96/Thr46,Trp182することに成した(Maeda).

项目成果

Y.Komeiji: "Clycine-85 of the trp-repressor of E.coli is important in forming the hydrophobic tryptophan binding pocket:experimental and computational approaches." Prot.Engng.7. 1239-1247 (1994)

Y.Komeiji：“大肠杆菌色氨酸阻遏蛋白的 Clycine-85 对于形成疏水性色氨酸结合袋非常重要：实验和计算方法。”

Wakabayashi,S.: "Mutation of calmodulin-binding site renders the Na^+/H^+ exchanger(NHE1)highly H^+-sensitive and Ca^<2+> regulation-defective." J.Biol.Chem.269. 13710-13715 (1994)

Wakabayashi,S.：“钙调蛋白结合位点的突变导致 Na^ /H^ 交换器 (NHE1) 对 H^ 高度敏感且 Ca^<2 > 调节缺陷。”

Kawano,H.: "Phenytoin,antiepileptic drug,competitively blocked non-NMDA receptors produced by Xenopus oocytes." Neuroscience Lett.166. 183-186 (1994)

Kawano, H.：“苯妥英，抗癫痫药，竞争性阻断非洲爪蟾卵母细胞产生的非 NMDA 受体。”

Sasaki,J.: "Nanosecond time-resolved infrared spectroscopy distinguishes two K species in the bacteriorhodopsin photocycle." Biophys.J.(in press). (1995)

Sasaki, J.：“纳秒时间分辨红外光谱区分了细菌视紫红质光循环中的两种 K 物种。”

A.Suenaga: "Progress in Cell Research:Molecular Biophysics of Ion Channels(in press)" Elsevier Sci.Pub., (1995)

A.Suenaga：“细胞研究进展：离子通道的分子生物物理学（正在印刷中）”Elsevier Sci.Pub.，（1995）