权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ヒト白血病ウイルスのスプライシング調節因子の作用機構

人类白血病病毒剪接调节因子的作用机制

基本信息

批准号：
04272210
负责人：
志田壽利
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04272210/
关键词：
HTLV-I Rex スプライシング RNAの輸送

项目摘要

ヒト成人T細胞白血病ウイルス(HTLV-I)は、Rex蛋白質の存在下でイントロンを持つgagやenvのmRNAを生産する。他方Rex蛋白質が存在しない場合には、完全にスプライシングされてイントロンが除かれたpX mRNAが合成される。このようにRexは、見かけ上スプライシングを制御する。しかし、最近Rexの一義的な作用点として種々の説が提唱されるようになった。即ち、核-細胞質への輸送の制御、スプライシングの制御、翻訳への関与である。このように複雑な状況を解明する一つの方法は、Rexの作用に関与する細胞側の因子を明らかにすることだと思われる。我々は、Rexと結合する因子がそのキャンディデートであると考え、抗Rexで共沈する分子の検索を試みた。まずそのために種々の抗Rex抗体を作成したが細胞の因子と交差反応し、本目的には使えなかった。そこで、バクテリアの蛋白質であるマルトース結合蛋白質(MBP)とRexとの融合蛋白質を作製し、抗MBP抗体を用いて免疫沈降することを試みた。Rexの後にMBPを連絡した融合蛋白質のみが、野生型Rexと同等の活性を有していた。抗MBP抗体で共沈する分子を検索したところ、標的mRNA存在下でのみRex-MBPと共沈する分子量24KDaの分子を検出した。核内移行シグナル(Tg)を持つMBPや野生型Rexとはこの分子は共沈せず、標的mRNAを介してRexと相互作用していると考えられた。又、核と細胞質における存在比は3:2であった。又、Rexの作用との相関を調べるために、種々の変異Rexを用いて共沈を行った。RNAと結合できない変異株、結合はできるが機能的に欠陥を持つ変異株は共に24KDa蛋白質を共沈できなかった。現在、24KDa蛋白質の同定と、Rexの作用における関与をさらに調べている。

Adult T-cell leukemia (HTLV-I) is characterized by the production of gag and env mRNA in the presence of Rex protein. Other Rex proteins are present, but they are completely free of pX mRNA. Rex, please. The most recent action point of Rex The relationship between nuclear cutting, nuclear-cytoplasm transport control, surface control, and turning over the edge is also important. A method of explaining the complex state of Rex is to explain the role of Rex in cell side factors. I want to test Rex's ability to combine with other molecules. The anti-Rex antibody was produced by the cell factor and cross-reaction. The protein binding protein (MBP) and Rex fusion protein were produced and the anti-MBP antibody was used. Rex and MBP fusion proteins have the same activity as wild-type Rex. Anti-MBP antibody co-expression of a 24KDa molecule was detected in the presence of target mRNA. Intranuclear migration (Tg) is mediated by MBP, wild-type Rex, and target mRNA interactions. There is also a ratio of 3:2 in the cytoplasm. Rex's role in the process of co-ordination RNA binding is a function of RNA binding, RNA binding is a function of RNA Now, 24KDa protein identity, Rex's role in the regulation of the relationship between