内因性MPTP類似化合物であるTIQ関連化合物の代謝と病因論的意義に関する研究

TIQ相关化合物（内源性MPTP样化合物）的代谢和病因学意义的研究

• 批准号: 05251208
• 负责人: 丹羽 利充
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05251208/
• 关键词: パーキンソン病; 脳; MPTP類似物質; N-メチルドーパミン; テトラヒドロイソキノリン; N-メチルサルソリノール; N-メチルノルサルソリノール; ガスクロマトグラフィー; 質量分析法

パーキンソン病患者の脳内に発見されたテトラヒドロイソキノリン(TIQ)をサルに投与することにより、パーキンソン病様症状を惹起することが明らかになった。しかし、TIQの脳内濃度はパーキンソン病患者において必ずしも増加していない。このため、他のTIQ関連化合物をパーキンソン病患者脳内で探索した。この結果、N-メチルサルソリノール(NMSAL)、N-メチルノルサルソリノール(NMNSAL)をパーキンソン病患者脳内において初めて検出した。また、N-メチルドーパミン(エピニン)がパーキンソン病患者脳内に存在すること、およびエピニンからアセトアルデヒドとのPictet-Spengler縮合反応によりNMSALが生成することをin vitroで明らかにした。そこで我々はエピニンをマイクロダイアリシス法によりラット脳の線条体に注入し、in vivoでNMSAL、NMNSALが生成するか検討した。Wister系ラットを用い、麻酔下で線条体にカニューレを挿入した。カニューレをKrebs-Ringer液2μl/分で潅流し、潅流液を採取した。1mMエピニンの投与前および3時間後の潅流液を試料とした。潅流液に1Mの硫酸アンモニウム0.11M NaOHに溶解した溶液4mlを加えpH8.5に調節した。直ちにフェルニルボロン酸カートリッジ(100mg/ml)に添加した。蒸留水、メタノール各1mlで洗浄後、1M酢酸/メタノールで抽出し、溶出液を窒素気流で乾固した。残渣をTMS化し、gas chromatography/mass spectrometry(GC/MS)により測定した。エピニンをラット脳内の線条体に投与し、NMSAL、NMNSALが検出された。NMNSALはNMSALの約10倍多く生成した。エピニンをin vitroでホルムアルデヒド、アセトアルデヒド溶液と非酵素的に反応させると、各々NMNSALとNMSALが生成したことから、NMNSALとNMSALの生成経路としてエピニンと生体内に存在するホルムアルデヒド、アセトアルデヒドとのPictet-Spengler縮合反応が考えられた。

Within パ ー キ ン ソ ン patients の 脳 に 発 see さ れ た テ ト ラ ヒ ド ロ イ ソ キ ノ リ ン (TIQ) を サ ル に cast with す る こ と に よ り, パ ー キ ン ソ ン disease symptoms of others を provoked す る こ と が Ming ら か に な っ た. し か し, TIQ の 脳 concentration within は パ ー キ ン ソ ン patients に お い て will ず し も raised plus し て い な い. <s:1> ため ため, his <s:1> tiQ-related compounds をパ キ キ ソ ソ で exploration of で た in 脳 of patients. こ の results, N - メ チ ル サ ル ソ リ ノ ー ル (NMSAL), N - メ チ ル ノ ル サ ル ソ リ ノ ー ル (NMNSAL) を パ ー キ ン ソ ン patients within 脳 に お い て early め て 検 out し た. ま た, N - メ チ ル ド ー パ ミ ン (エ ピ ニ ン) が パ ー キ ン ソ ン patients 脳 に exist within す る こ と, お よ び エ ピ ニ ン か ら ア セ ト ア ル デ ヒ ド と の Pictet - Spengler condensation anti 応 に よ り NMSAL が generated す る こ と を in vitro で Ming ら か に し た. そ こ で I 々 は エ ピ ニ ン を マ イ ク ロ ダ イ ア リ シ ス method に よ り ラ ッ ト 脳 に injection し の line body, the in vivo で NMSAL, NMNSAL が generated す る か beg し 検 た. In the Wister system, ラットを is inserted into た た using で and 酔 lines. Youdaoplaceholder0 レを レをKrebs-Ringer solution 2μl/ min で潅 flow カニュ 潅 flow を take た た. The 1mMエピニ <e:1> <s:1> is added to the および for 3 hours before, followed by the <s:1> 潅 liquid flow を of the test material と た た た. 潅 flow fluid に 1 M の sulfate ア ン モ ニ ウ ム 0.11 M NaOH に dissolved し た solution 4 ml を plus え pH8.5 に adjust し た. Direct ちにフェ ニ ニ ボロ ボロ <s:1> acid カ トリッジ トリッジ(100mg/ml)に add た た. After washing with 1ml each of the retained water and メタノ メタノ <e:1> <e:1> で, 1ml of oxalic acid /メタノ <s:1> <s:1> で で is extracted で, and the leachate を is carried out by gas flow で to dry and solidify た た. The residue was determined by をTMS <s:1> and gas chromatography/mass spectrometry(GC/MS)によ によ た. Youdaoplaceholder0 をラット脳 をラット脳 the inner line body of the cue に is thrown to をラット脳, NMSAL, NMNSALが検 out された. NMNSAL た NMSAL く about ten times more く generates た た. Youdaoplaceholder0 を をin Vitro で ホ ル ム ア ル デ ヒ ド, ア セ ト ア ル デ ヒ と ド solution of enzyme に anti 応 さ せ る と, various 々 NMNSAL と NMSAL が generated し た こ と か ら, NMNSAL と NMSAL の generated 経 road と し て エ ピ ニ ン と raw に exist in vivo す る ホ ル ム ア ル デ ヒ ド, ア セ ト ア ル デ ヒ ド と の Pictet -Spengler condensation reaction 応が test えられた.

项目成果

Toshimitsu NIWA: "Methods in Neurotransmitter and Neuropeptide Research" Elsevier Science Publishers, 255-278 (1993)

Toshimitsu NIWA：“神经递质和神经肽研究方法”Elsevier Science Publishers，255-278 (1993)

Toshimitsu NIWA: "Advances in Neurology,vol.60" Raven Press, 234-237 (1993)

丹羽俊光：“神经学进展，第 60 卷”Raven Press，234-237 (1993)

Mitsuharu KAJITA: "Presence of N-methyldopamine in parkinsonian and normal human brains." J Chromatogr. 613. 1-8 (1993)

Mitsuharu KAJITA：“帕金森病和正常人大脑中存在 N-甲基多巴胺。”

梶田光春: "MPTP関連物質であるN-メチルノルサルソリノールのラット脳内における生成について." 日本医用マススペクトル学会講演集. 18. 173-176 (1993)

Mitsuharu Kajita：“关于大鼠大脑中 MPTP 相关物质 N-甲基降甲酚的产生。”日本医学质谱学会会议记录 18. 173-176 (1993)。

Mitsuharu KAJITA: "Endogenous synthesis of N-methylnorsalsolinol in rat brain during in vivo microdialysis with epinine." J Chromatogr. (1994)

Mitsuharu KAJITA：“在用艾匹宁进行体内微透析过程中，大鼠大脑中 N-甲基降也醇的内源合成。”