固定化RNA選択法を用いた新しいRNA酵素の作成とその機能構造に関する研究

利用固定化RNA选择方法创建新的RNA酶及其功能结构研究

基本信息

  • 批准号:
    05265217
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.92万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1993
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1993 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

現在までに、我々は(-)sTRSVを基礎としたヘアピン型リボザイムのAGAA配列に固定化RNAによる選択方法(3回選択)を適用し、高い切断活性に必須な配列はNGAPuであることを示した。ハマーヘッド型リボザイムについては、invariantと考えられていたCUGAUGA配列について4回の選択を行った結果、2番目または4番目のUが異なる塩基となった計3種類の活性リボザイムを見出した。また、同じく1本鎖部分をなすGAA部分をランダム化したRNA集団について1回の選択を行って、変異をもつリボザイムクローン16種類18個を得た。この中で確かに活性を有するものは5種類7クローンであり、それらは全てランダム化した部分がGAAであった。従って、このGAA配列が活性に必須である可能性が強い。さらに全長14塩基をランダムにしたミニハンマーヘッドリボザイム集団から出発して計7回の選択を行い、30余りのリボザイムクローンを得た。これらの中には活性を有するものが多数含まれているが、その中には14ヌクレオチドでデザインした活性部分が22または21ヌクレオチドまで長くなったものが多いことが見出された。現在これらの配列と活性の関係を解析中である。
Now ま で に, I 々 は (-) sTRSV を based と し た ヘ ア ピ ン type リ ボ ザ イ ム の AGAA match column に immobilized RNA に よ る sentaku method (3 back sentaku) を applicable し, high い cut active に must な with column は NGAPu で あ る こ と を shown し た. Type ハ マ ー ヘ ッ ド リ ボ ザ イ ム に つ い て は, invariant と exam え ら れ て い た CUGAUGA match column に つ い て 4 back の sentaku を line っ た results, 2 times eye ま た は four times eye の U が different な る salt base と な っ た meter 3 kinds の active リ ボ ザ イ ム を shows し た. ま た, with じ く part 1 this lock を な す part the GAA を ラ ン ダ ム change し た RNA sets 団 に つ い て 1 back の sentaku を line っ て, - different を も つ リ ボ ザ イ ム ク ロ ー ン 16 kinds of 18 を た. こ の で か indeed in に activity を す る も の は 5 kinds 7 ク ロ ー ン で あ り, そ れ ら は full て ラ ン ダ ム change し た part が the GAA で あ っ た. The が activity に of the 従って and <s:1> <s:1> GAA configuration must have a である possibility of a strong が. さ ら に 14 salt base を ラ ン ダ ム に し た ミ ニ ハ ン マ ー ヘ ッ ド リ ボ ザ イ ム set 団 か ら out 発 し て meter 7 back の sentaku を い, more than 30 り の リ ボ ザ イ ム ク ロ ー ン を た. こ れ ら の in に は activity を す る も の が contains most ま れ て い る が, そ の に in 14 ヌ は ク レ オ チ ド で デ ザ イ ン し た active part が 22 ま た は 21 ヌ ク レ オ チ ド ま で long く な っ た も の が more い こ と が shows さ れ た. Now, in the を analysis of the と れら <s:1> coordination と active <s:1> relationship である.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
T.Tani: "Analysis of sequence requirements in ribozymes for the catalysis of the cleavage reaction by a novel selection method" Abstracts of RNA Processing Meeting. 318-318 (1993)
T.Tani:“通过一种新的选择方法分析核酶催化切割反应的序列要求”RNA 加工会议摘要。
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    0
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大島 靖美其他文献

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    1993
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    1992
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
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