プロスタサイクリン及びトロンボキサン受容体の生体内機能解析

前列环素和血栓素受体的体内功能分析

基本信息

  • 批准号:
    09273254
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.47万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1997 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

プロスタサイクリン(プロスタグランジンI_2:PGI_2)とトロンボキサンA_2(TXA_2)はアラキドン酸より産生されたプロスタグランジンI-I_2を基質にPGI_2合成酵素あるいはトロンボキサン合成酵素の働きで生合成される強力な生理活性脂質である。これらのプロスタノイドは、生体内においてはその特異的な受容体により認識され、細胞内の情報伝達系を経て目的とする生理機能を発現している。本研究は、PGI_2合成酵素およびトロンボキサン合成酵素を発現を抑制することで各リガンドの欠損モデルを作成し、これらを用いてPGI_2及びTXA_2がプロスタノイド受容体さらに情報伝達系に及ぼす影響を調べ、生体レベルでの生理機能の調節機構を明らかにすることを目的する。本年度は、PGI_2合成酵素酵素遺伝子のノックアウトマウスを作成し、解析を行った。マウスPGI_2合成酵素遺伝子を単離した後、本酵素の活性部位を含むエキソン7〜9を欠失させてneo遺伝子に置き換えたターゲティングベクターを構築し、常法に従いノックアウトマウスを得た。シクロオキシゲナーゼ1および2、トロンボキサン合成酵素、ならびにPGI受容体、トロンボキサン受容体のin situハイブリダイゼーションを行うために各マウスcDNAを鋳型に^<35>Sで標識したアンチセンスmRNAを合成した。大動脈、心臓、肺、腎臓、脾臓における各合成酵素の発現を調べたところ、ノックアウトマウスのホモ接合体の脾臓においてトロンボキサン合成酵素の発現が野生型と比較して高い傾向にあった。現在、各受容体の発現を検討中である。
PGI_2 synthase (PGI_2) and PGI_2 synthase (TXA_2) produce strong physiologically active lipids. The physiological functions of these receptors, which are specific to each other in vivo, can be realized through the information system in the cell. The purpose of this study is to inhibit the production of PGI_2 synthase, and to establish a mechanism for the regulation of physiological functions of PGI_2 and TXA_2 by inhibiting the production of PGI_2 synthase and TXA_2 synthase. This year, PGI_2 synthase gene production and analysis were carried out. After the isolation of the PGI_2 synthase gene, the active site of the enzyme was found to be in sequence 7 ~ 9. The neo gene was found to be in sequence 7 ~ 9. The enzyme was found in sequence 7 ~ 9. The gene expression of the enzyme, PGI receptor, and PGI receptor is determined by the gene expression of the cDNA<35>. The expression of various synthetic enzymes in the aorta, heart, lung, kidney and spleen was regulated. The expression of synthetic enzymes in the spleen of the conjugate was higher than that of wild type. Now, the development of each container is discussed.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Segurola,R.J.Jr.et al.: "Cyclic strain is a weak induccer of prostacyclin synthase expression in bovine aortic endothelial cells." J.Surg.Res.69. 135-138 (1997)
Segurola,R.J.Jr.等人:“循环菌株是牛主动脉内皮细胞中前列环素合酶表达的弱诱导剂。”
  • DOI:
  • 发表时间:
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
波多江利久 他: "プロスタサイクリン生合成 -プロスタサイクリン合成酵素の蛋白質構造と遺伝子発現-" 動脈硬化. 24. 449-455 (1997)
Toshihisa Hatae 等:“前列环素生物合成 - 前列环素合成酶的蛋白质结构和基因表达 -” 动脉硬化 24. 449-455 (1997)
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  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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