移植心冠動脈硬化の分子機構の解明と遺伝子治療

阐明移植心脏冠状动脉粥样硬化的分子机制及基因治疗

• 批准号: 09281212
• 负责人: 磯部 光章
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09281212/
• 关键词: 拒絶反応; 動脈硬化; 接着分子; 遺伝子治療; 細胞周期調節遺伝子; 内膜肥厚; HVJ-リポソーム; 心臓移植

【目的】慢性拒絶とも呼ばれる移植心冠動脈内膜肥厚は長期予後を決定する重要な要素である。病態には不明な点が多く予防法がない。細胞周期調節遺伝子は血管内膜肥厚において重要な役割を果たしていることが諸種のモデルで示されているが、移植心における検討はなされていない。細胞周期調節遺伝子の発現と、アンチセンス遺伝子導入による内膜肥厚進展予防効果について検討した。【方法】BALB/cマウスの心臓を摘出してHVJ-liposome法によりFITCラベルしたODNを導入しマウスに異所性に移植した。さらに、細胞周期調節遺伝子であるCDK2 kinaseに対するアンチセンスODNを導入した心臓を同様に移植した(n=9)。遺伝子導入しない群(n=6)と、センスcdk 2 kinase ODN(n=7)、スクランブルODN(n=6)の導入群を比較とした。移植片生着延長のためFK506を投与し、第30日に摘出した。肥厚内膜の内弾性板内占拠率を定量化し、VCAM-1とCDK2 kinaseのmRNA組織内発現を検討した。【結果】FITCラベルしたODNは移植後14日まで移植心内に広く発現した。無導入群、センス群、スクランブル群では冠動脈内膜肥厚(62.3±20.9%,70.5±20.8%,60.6±20.6%)を認めたのに対し、アンチセンス導入ではその進展は著明に制御(14.3±5.3%)された。血管内膜でのVCAM-1の発現は無導入群、スクランブル群、センス群で著しく、アンチセンス群では抑制されていた。CDK2 kinase、PDGFmRNA発現も同様であった。【結論】移植心冠動脈硬化における血管平滑筋増殖には細胞周期調節遺伝子が関与しており、アンチセンスCDK2 ODNの導入はその進展予防に効果がある。

【 Objective 】 Chronic rejection of と and ばれる coronary artery intimal hypertrophy ばれる after long-term treatment を determines する important な factors である. Pathological に が unclear な points が many く prevention methods がな がな. But 伝 son は vascular intima hypertrophy cell cycle regulation に お い て important な "を cut fruit た し て い る こ と が manifestations of の モ デ ル で shown さ れ て い る が, transplanted heart に お け る beg は 検 な さ れ て い な い. Cell cycle regulation heritage 伝 son の 発 と, ア ン チ セ ン ス heritage 伝 son import に よ る lining hypertrophy progress to prevent unseen fruit に つ い て beg し 検 た. 【 methods 】 BALB/c マ ウ ス の heart viscera を pick the し て HVJ liposome method に よ り FITC ラ ベ ル し た ODN を import し マ ウ ス に different sexual に transplantation by し た. さ ら に, cell cycle regulation but 伝 で あ る CDK2 kinase に す seaborne る ア ン チ セ ン ス ODN を import し た heart viscera を with others に transplantation し た (n = 9). Heritage 伝 son import し な い group (n = 6) と, セ ン ス CDK kinase 2 ODN (n = 7), ス ク ラ ン ブ ル ODN group (n = 6) の import を compare と し た. The graft graft, with an extended ためFK506を, was sent to ため, and on the 30th day に it was removed from た. The proportion of 拠 in the elastic plate of the hypertrophic endometrium is を quantified, and the occurrence of を検 of VCAM-1とCDK2 kinase <e:1> mRNA in the tissue is た. 【 Result 】FITCラベ に た たODN に 14 days after transplantation, に broad く in the まで transplanted heart developed た た. No import group, セ ン ス group, ス ク ラ ン ブ ル group で は coronary artery intima hypertrophy (62.3 + / - 20.9%, 70.5 + / - 20.8%, 60.6 + / - 20.6%) を recognize め た の に し, seaborne ア ン チ セ ン ス import で は そ の progress は zhao Ming に suppression (14.3 + / - 5.3%) さ れ た. Neointimal で の VCAM 1 の 発 は import group, now ス ク ラ ン ブ ル group, セ ン ス group で the し く, ア ン チ セ ン ス group で は inhibit さ れ て い た. The occurrence of CDK2 kinase and PDGFmRNA is the same as であった. 【 conclusion 】 atherosclerotic heart transplant に お け る vascular smooth muscle rights colonization に は traces of cell cycle regulation 伝 son が masato and し て お り, ア ン チ セ ン ス CDK2 ODN の import は そ の progress to prevent に unseen fruit が あ る.

项目成果

Isobe M, Suzuki J: "New approaches for managing acute and chronic cardiac allograft rejection." Jpn Circ J. (in press).

Isobe M、Suzuki J：“治疗急性和慢性心脏同种异体移植排斥的新方法。”

Suzuki J, Isobe M, Morishita R, et al.: "Prevention of Graft Arteriopathy by Antisense cdk2 kinase oligonucleotide." Nature Medicine. 3. 900-903 (1997)

Suzuki J、Isobe M、Morishita R 等人：“通过反义 cdk2 激酶寡核苷酸预防移植动脉病”。

Suzuki J, Isobe M, et al.: "Inhibition of accelerated coronary atherosclerosis with short-term blockade of intercellular adhesion molecule-1 and lymphocyte function associated antigen-1 in a heterotopic murine model of heart transplantation" J Heart Lung

Suzuki J、Isobe M 等人：“在心脏移植异位小鼠模型中，通过短期阻断细胞间粘附分子 1 和淋巴细胞功能相关抗原 1 来抑制加速冠状动脉粥样硬化”J Heart Lung

Suzuki J, Isobe M, Aikawa M, et al.: "Nonmuscle and smooth muscle myosin heavy chain expression in rejected cardiac allografts-A study in rat and monkey models." Circulation. 94. 1118-1124 (1996)

Suzuki J、Isobe M、Aikawa M 等人：“排斥心脏同种异体移植物中的非肌肉和平滑肌肌球蛋白重链表达 - 大鼠和猴子模型的研究。”

Isobe M, Suzuki J, Yamazaki S, et al.: "Assessement of tolerance induction to cardiac allograft by anti-ICAM-1 and anti-LFA-1 monoclonal anitibodies." J Heart Lung Transplant. 16. 1149-1156 (1997)

Isobe M、Suzuki J、Yamazaki S 等人：“抗 ICAM-1 和抗 LFA-1 单克隆抗体对心脏同种异体移植耐受诱导的评估”。