発生工学的手法によるエンドセリン遺伝子欠損マウスの作製とその生理機能の解析

利用发育工程方法创建内皮素基因缺陷小鼠并分析其生理功能

• 批准号: 04670521
• 负责人: 磯部 光章
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670521/
• 关键词: 発生工学; ジーンターゲティング; エンドセリン; 高血圧; 動脈硬化; 虚血性心疾患; 遺伝子

エンドセリン-1(ET-1)は主に血管内皮細胞から産生される血管収縮ペプチドで、その多彩な作用と広汎な分布により、その生理的役割や循環器疾患などにおける病態生理的意義が注目されている。本研究において我々はジーンターゲティングの手法によるET-1の遺伝子欠損マウスの作成に成功し、その解析によるET-1の生理的意義の解明を試みた。マウス遺伝子ライブラリーよりマウスET-1遺伝子DNAをクローニングし、ET-1の第2〜5エクソンを含む約7kbの遺伝子クローンとネオマイシン耐性遺伝子・チミジンキナーゼ遺伝子よりtargeting constructを作製した。これをマウスES細胞A3.1(東大医科研豊田裕教授より供与)に導入後G418・Gancyclovirにて選択し、生き残った281個のクローンより、35個の相同組み換えクローンを得た。C57B16由来のblastocystへの導入により10匹のキメラマウスを得、germline teansmissionが確認された2匹よりET-1遺伝子欠損のalleleをもつヘテロ接合体が得られた。ヘテロ接合体では発育、外見上の形態変化は認められなかった。現在、ヘテロ接合体同志の交配によりホモ接合体を作製し、これらの形態・生理などの表現型の解析を進めている。これにより、ET-1欠損あるいは産生低下によって引き起こされる主体の変化が明らかになり、血管発生・血圧調節などにおける生理的意義や高血圧・虚血性心疾患・動脈硬化をはじめとする循環器疾患などの病態生理におけるET-1の関与の有無及びそのメカニズムが直接解明されると考えられる。さらにその表現型がある種の疾患と類似性を示せば、その疾患の病因や治療法を解明する上での極めて有用な動物モデルになることが期待される。

ET-1 (ET-1) is a key factor in the development of vascular endothelial cells, and its pathological physiological significance in vascular contractions, polychromatic effects, and distribution. In this study, we tried to understand the physiological significance of ET-1 by analyzing the methods of ET-1 gene loss and its formation. ET-1 gene DNA sequence contains about 7kb of gene sequence, and ET-1 gene sequence 2 ~ 5 contains about 7kb of gene sequence. G418·Gancyclovir was introduced into ES cell A3.1(Professor Hiroshi Toyoda of Dongda Medical Research Institute), and 281 samples were selected and 35 samples were obtained from the same group. C57B16 Blastocyst from the introduction of the 10-pin, germline tetransmission confirmed by the 2-pin ET-1 missing allele. The hybrid is developed, and the morphology of the hybrid is changed. Now, the analysis of the phenotype of heterosexual mating, heterosexual mating. ET-1 deficiency is caused by the change of the main body, blood vessel development, blood pressure regulation, physiological significance, high blood pressure, deficiency of heart disease, arteriosclerosis, pathological physiology, ET-1 deficiency, and direct explanation. The phenotype of the disease is similar to that of the disease, and the etiology and treatment of the disease are expected to be explained.

项目成果

磯部 光章 他: "Rejection-free organ transplant." The World and I. 7. 232-239 (1992)

Mitsuaki Isobe 等人：“无排斥器官移植”。《世界》和 I. 7. 232-239 (1992)

磯部 光章 他: "Class I major histocompatibility antigen modified with monomethoxypolyethylene glycol prolongs survival of cardiac allografts in mice." J.Am.Coll.Cardiol.17. 341A- (1991)

Mitsuaki Isobe 等人：“用单甲氧基聚乙二醇修饰的 I 类主要组织相容性抗原可延长小鼠同种异体心脏移植物的存活时间。”17A-（1991）。

磯部 光章 他: "Imaging the rejecting heart:In vivo detection of major histocomptibility complex class II antigen induction." Circulation. 85. 738-746 (1992)

Mitsuaki Isobe 等人：“排斥心脏成像：主要组织相容性复合物 II 类抗原诱导的体内检测。”循环。

磯部 光章 他: "Tolerance induction against cardiac allograft by anti-ICAM-1 and anti-LFA-1 treatment:T cells respond to in vitro allostimulation." Transplant Proc.(1993)

Mitsuaki Isobe 等人：“通过抗 ICAM-1 和抗 LFA-1 治疗诱导心脏同种异体移植耐受：T 细胞对体外同种异体刺激作出反应。”(1993)

磯部 光章 他: "Specific acceptance of cardiac allograft after treatment with anti-ICAM1 and anti-LFA" Science. 255. 1125-1127 (1992)

Mitsuaki Isobe 等人：“抗 ICAM1 和抗 LFA 治疗后心脏同种异体移植的具体接受”《科学》255. 1125-1127 (1992)。