移植心冠動脈硬化の分子機構の解明と遺伝子治療

阐明移植心脏冠状动脉粥样硬化的分子机制及基因治疗

• 批准号: 11158206
• 负责人: 磯部 光章
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11158206/
• 关键词: 心臓移植; 慢性拒絶; 遺伝子治療; 冠動脈硬化; 虚血再灌流障害; HVJリポソーム法

【目的】心拒絶反応は移植後患者の予後を決定する重要な要素である。昨年までの研究で、細胞周期調節遺伝子の発現とアンチセンス遺伝子導入による慢性拒絶予防効果ついて報告した。それによれば、cdk2 kinaseに対するアンチセンス遺伝子の導入により冠動脈肥厚が抑制されており、慢性心拒絶に遺伝子治療が有効である。今回より長期的な効果が得られる遺伝子治療の標的として、転写因子であるE2FとNF-κBに着目して、デコイ遺伝子による発現制御が慢性および急性心拒絶反応を抑制する効果について、マウスとサルの心移植モデルを用いて検討した。【対象と方法】マウスおよびサルの異所性心移植は既報の方法の通り、腹部血管への血管縫合を用いて行った。マウスではNF-κBデコイを、サルではE2Fデコイ遺伝子を導入した。デコイ遺伝子はドナー心の大動脈より注入し、4℃で10分問の留置により行った。ドナーヘの免疫抑制等の治療は行わなかった。マウスは、major mismatch、minor mismatchの二通りの組み合わせで検討した。移植心は28日目に採取した。【結果】マウス(major mismatch):移植心の生着はコントロールで、平均8日に対し、NF-κBデコイ導入群では平均15日と有意に延長した。マウス(minor mismatch):NF-κBデコイ遺伝子導入群では、新生内膜の血管内腔占拠率が22±14%とコントロール群(53±12%)に比して減少した。血管壁におけるVCAM-1の発現も低下していた。サル:E2Fデコイ導入により内腔占拠率は平均18±10%とコントロールの49±12%より有意に減少した。サルの肝臓、脳、腎、精巣のいずれにもHVJのF蛋白は検出されなかった。【考察】NF-κBデコイ、E2Fデコイ遺伝子が慢性拒絶の抑制に有効であることが小動物のみならず大動物においても示された。NF-κBは急性拒絶反応の抑制にも有効であったが、治療によりICAM-1やMHCクラスI抗原の発現も低下しており、虚血再灌流障害による炎症の抑制により、抗原提示が低下したことが関係していると考えられた。

[Objective] Heart rejection is an important factor in determining the future of patients after transplantation. In recent years, research has been conducted on the development of cell cycle regulatory genes and the chronic rejection of gene introduction. For example, CDK2 kinase can inhibit coronary artery hypertrophy and chronic heart failure. In the present study, long-term effects have been identified as targets for gene therapy, including E2F and NF-κB, and the development of gene therapy in chronic and acute heart failure. [Methods] For heterosexual heart transplantation, the method of communication and suture of abdominal blood vessels should be used. NF-κB is the most important factor in the development of nuclear weapons. The heart of the heart of the heart is injected into the heart, 4℃ for 10 minutes. The treatment of immunosuppression is not effective. It is a combination of major mismatch and minor mismatch. The transplant heart was taken on the 28th. [Results] It was found that the average time of transplantation was 8 days, and the average time of NF-κB induction was 15 days. The percentage of neointimal lumen was 22±14% compared with that of NF-κB gene promoter group (53±12%). The expression of VCAM-1 in the vascular wall was lower. E2F is introduced into the cavity, and the cavity occupancy rate is 18±10% on average and 49±12% on purpose. The F protein of HVJ was detected in the liver, kidney and sperm. [Investigation] NF-κB, E2F, and other genes are inhibited by chronic rejection. NF-κB acute rejection of anti-inflammatory inhibition, treatment, ICAM-1 and MHC I antigen production decreased, blood reperfusion injury, inflammation inhibition, antigen tips decreased

项目成果

Suzuki, J., Isobe M., et al.: "Prevention of cardiac allograft arteriopathy by antisense cdc2 kinase oligonucleotide"Transplant Proc.. 31. 867-868 (1999)

Suzuki，J.，Isobe M.，等：“通过反义cdc2激酶寡核苷酸预防心脏同种异体移植动脉病”Transplant Proc.. 31. 867-868 (1999)

Suzuki, J., Isobe M., et al.: "Altered expression of MMP and TIMP in acutely rejected myocardium and coronary arteriosclerosis in cardiac allografts of nonhuman primate"Transplant Immunol.. (in press).

Suzuki, J.、Isobe M. 等人：“非人灵长类同种异体心脏移植物中急性排斥心肌和冠状动脉硬化中 MMP 和 TIMP 的表达改变”《移植免疫学》（正在出版）。

Isobe M., Suzuki, J., et al.: "Gene Therapy for Heart Transplantation-associated coronary Arteriosclerosis"Ann. NY Acad, Sci,. (in press).

Isobe M.、Suzuki, J. 等：“心脏移植相关冠状动脉硬化的基因治疗”Ann。

Suzuki J, Isobe M, et.al: "Antisense bcl-X oligonucleotide induces apoptosis and prevents arterial neointimal formation in murine cardiac allografts."Cardiovasc Res. 45. 783-787 (2000)

Suzuki J、Isobe M 等人：“反义 bcl-X 寡核苷酸诱导细胞凋亡并防止小鼠心脏同种异体移植物中动脉新内膜形成。”Cardiovasc Res。

Suzuki J, Isobe M, et.al: "Prevention of cardiac allograft arteriosclerosis using antisense proliferating-cell nuclear antigen oligonucleotide."Transplantation. (in press).

Suzuki J、Isobe M 等人：“使用反义增殖细胞核抗原寡核苷酸预防同种异体心脏移植动脉硬化。”移植。