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移植心冠動脈硬化の分子機構の解明と遺伝子治療

阐明移植心脏冠状动脉粥样硬化的分子机制及基因治疗

基本信息

批准号：
10177209
负责人：
磯部光章
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

急性拒絶と並んで、慢性拒絶は臓器移植後の深刻な合併症である。心臓移植においては、移植心冠動脈内膜肥厚がその主体であり、長期予後を決定する重要な要素である。病態には不明な点が多く予防法はない。一方、急性・慢性拒絶反応を予防する新たな手段として移植臓器への遺伝子導入が注目されている。本研究では心移植後慢性拒絶の分子病態を解明するとともに、将来の臓器移植における遺伝子治療の戦略確立のために、移植臓器への遺伝子導入の有効性と安全性を動物実験において検討した。マウスおよびサルの移植心で30-60日後に臨床例と類似の冠動脈内膜肥厚が確認された。肥厚内膜の主体は形質変換した血管平滑筋細胞で、ICAM-1、VCAM-1など接着分子、MCP-1などの白血球走化因子、PDGFなどの増殖因子、エンドセリン、細胞周期調節遺伝子、MMPの発現亢進やTIMPの発現低下が認められた。本疾患の病態にはバルーン障害と同様、炎症機転が深く関わっていることが示された。HVJリポソーム法により移植心にアンチセンスcdk2 kinaseを導入した。導入遺伝子は少なくとも2週間血管及び心筋に広範に発現していることが確認された。遺伝子導入群では30日後の内膜肥厚は著明に抑制されていた。E2Fdecoy遺伝子導入ではより長期にわたる抑制効果があった。サルにおいても移植心へのE2Fdecoy遺伝子導入が可能であり、28日目に内膜肥厚の抑制効果が確認された。サルで行ったHVJリポソーム法の安全性試験では、大量静注投与によっても毒性を認めなかった。慢性拒絶反応の病態における炎症機転の関与が示され、遺伝子治療の有用性が小動物・大動物の実験で示された。標的とすべき遺伝子、導入方法、安全性、長期的効果などに関して、さらに詳細な検討が必要である。HVJリポソーム法は導入効率と安全性の高い遺伝子導入法と考えられ、臓器移植への臨床応用が期待される。

Acute rejection and chronic rejection of organ transplantation after profound complications. Heart transplantation is an important factor in determining the thickness of the intima of the transplanted heart and the long-term future. Illness is not clear, and many things are prevented. A new method to prevent acute and chronic rejection is to introduce new transplants and genes into the system. This study addresses the molecular pathology of chronic rejection after heart transplantation, the strategy for establishing gene therapy for future organ transplantation, and the safety of gene introduction for organ transplantation. 30-60 days after transplantation, clinical cases of similar coronary intimal hypertrophy were confirmed. The main body of hypertrophic intima is characterized by vascular smooth muscle cells, ICAM-1, VCAM-1, adhesion molecules, MCP-1, leukocyte chemoattractant factor, PDGF, proliferation factor, cell cycle regulatory genes, MMP hyperproduction and TIMP hypoproduction. The disease is related to the disease, inflammation and disease. HVJ software is used to introduce cdk2 kinase. The introduction of the gene was confirmed by the discovery of vascular and cardiac tissue within 2 weeks. After 30 days of gene introduction, the intimal hypertrophy was inhibited. E2Fdecoy gene introduction E2Fdecoy gene transfer was possible and inhibition of intimal hypertrophy was confirmed on the 28th day. The safety test of the HVJ solution was conducted in a large number of intravenous injections to identify the toxicity. Chronic rejection of the disease causes inflammation and the usefulness of gene therapy in small and large animals. Subject matter, introduction method, safety, long-term effect, and detailed discussion. HVJ package introduction method is expected to improve safety and clinical application.