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Analysis of replication of Hepatitis C Virus using highly efficient replication system

使用高效复制系统分析丙型肝炎病毒的复制

基本信息

批准号：
16590653
负责人：
WAKITA Takaji
金额：
$ 2.62万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16590653/
关键词：
HCV virus viral genome replication HCC chronic hepatitis interferon

项目摘要

Hepatitis C virus (HCV) is a major public health problem, infecting an estimated 170 million people worldwide. Current therapy for HCV-related chronic hepatitis is based on the use of interferon. However, virus clearance rates are insufficient. Investigations to develop the anti-viral therapy or to understand the life cycle of this virus have been hampered by the lack of viral culture systems. We isolated the JFH-1 strain from a patient with fulminant hepatitis, and the JFH-1 subgenomic replicon could replicate efficiently in culture cell without adaptive mutation. Using this JFH-1 strain, we developed highly efficient HCV replication system in culture cells. The full-length JFH-1 RNA was transfected into Huh7 cells. Subsequently, viral RNA efficiently replicated in transfected cells and viral particles were secreted. Secreted viral particle exhibited spherical shape by electron-microscopic analysis and was separated in the fraction eith 1.15g/ml density. Furthermore, secreted virus displayed infectivity for naive Huh7 cells. In addition, we have also developed an replicon system using full-genomic JFH-1 genome. Both systems provide powerful tools for studying the viral life cycle and constructing anti-viral strategies.

丙型肝炎病毒（HCV）是一个主要的公共卫生问题，估计感染全球1.7亿人。目前HCV相关慢性肝炎的治疗是基于使用干扰素。然而，病毒清除率不足。由于缺乏病毒培养系统，开发抗病毒治疗或了解这种病毒的生命周期的研究受到阻碍。我们从一例重型肝炎患者中分离到JFH-1株，其亚基因组复制子能在培养细胞中高效复制，且无适应性突变。利用JFH-1株，我们开发了在培养细胞中的高效HCV复制系统。将全长JFH-1 RNA转染入Huh 7细胞。随后，病毒RNA在转染细胞中有效复制，并分泌病毒颗粒。电镜下可见分泌的病毒颗粒呈球形，并分离于密度为1.15g/ml的组分中。此外，分泌的病毒显示对幼稚Huh 7细胞的感染性。此外，我们还开发了一种使用全基因组JFH-1基因组的复制子系统。这两个系统为研究病毒的生命周期和构建抗病毒策略提供了强大的工具。

项目成果

期刊论文数量（80）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

感染性C型肝炎ウイルス粒子の培養細胞における作製

在培养细胞中产生传染性丙型肝炎病毒颗粒

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
医学のあゆみ 215(11)
影响因子：
0
作者：
Jiang;H.;et al.;脇田隆字
通讯作者：
脇田隆字

Production of infectious genotype 1a hepatitis C virus (Hutchinson strain) in cultured human hepatoma cell

在培养的人肝癌细胞中产生传染性基因型 1a 丙型肝炎病毒（Hutchinson 株）

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Proc Natl Acad Sci U S A 103(7)
影响因子：
0
作者：
Yi M;et al.
通讯作者：
et al.

宿主の新たな抗ウイルス活性によるB型肝炎ウイルス複製の抑制

通过新型宿主抗病毒活性抑制乙型肝炎病毒复制

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Hepatoday 9
影响因子：
0
作者：
Y.Arai;K.Shinomiya;A.Okawa;et al.;脇田隆字
通讯作者：
脇田隆字

Robust hepatitis C virus infection in vitro

DOI：
10.1073/pnas.0503596102
发表时间：
2005-06-28
期刊：
PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
影响因子：
11.1
作者：
Zhong, J;Gastaminza, P;Chisari, FV
通讯作者：
Chisari, FV

Characterization of Genotype 2a Hepatitis C Virus Subgenomic Replicon in Comparison with Genotype 1b Replicon.

基因型 2a 丙型肝炎病毒亚基因组复制子与基因型 1b 复制子的比较特征。