Protein Kinase Cの構造と機能、並びに細胞増殖の調節

蛋白激酶C的结构和功能以及细胞增殖的调节

• 批准号: 01614524
• 负责人: 深見 泰夫
• 金额: $ 9.6万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01614524/
• 关键词: 蛋白質リン酸化酵素; Protein Kinase C; cysteine-rich配列; ホルボ-ルエステル; カルシウム; カルパイン; ダウンレギュレ-ション

本年度は下記の項目について研究を行った。(1)Protein Kinase C CPKC)の構造と機能の相関を明らかするためのPKC分子種の酵素化学的解析並びにPKC変異分子の構築とその解析。(2)PKC分子種の発現細胞系を用いた情報伝達機構の解析並びに特異抗体を用いたPKC分子種の局在の解析。(3)PKCによる受容体のダウンレギュレ-ションや遺伝子発現の調節等、細胞膜機能、核機能の調節についての解析。(4)PKCの分子種特異的抑制剤の開発。その結果、それぞれの項目について以下の知見を得た。(1)クロ-ン化されたγ種PKCの各種欠失変異体の解析により、PKCのN末端側の活性調節ドメイン中にあるC1,C2領域の内、C1領域内のcysteine-rich配列がホルボ-ルエステルの結合に必須であり、C2領域はカルシウムとの相互作用に関与する部位であることが明らかとなった。また、精製酵素を用いた実験から、PKCの各分子種はカルパインによって異なる部位で、また異なる速度で限定分解を受けることが明らかとなった。さらにその際、活性化されたPKCほど速く開裂を受けることが示された。(2)クロ-ン化されたPKC分子種の発現細胞の構築を試み、新たにζ種PKCの発現と性質の解析を行った。また、特異抗体を用いた分子種の組織、細胞における局在を調べ、新たにβI,βII,α種PKCのラット脳における局在を明らかにした。(3)ヒトTリンパ球のTCR-CD3複合体のダウンレギュレ-ション、インタ-ロイキン2の受容体発現に果たすPKCの機能を解析し、その重要性を示した。また、転写調節因子CRE結合蛋白質のリン酸化を介した、遺伝子発現した果たすPKCの役割についても解析を行った。(4)乳癌治療薬temoxifenの種々の誘導体を作成しPKCに対する阻害効果を解析した結果、N末端側の活性調節ドメインとC末端側のキナ-ゼドメインのそれぞれに作用する誘導体をデザインすることが可能となった。

This year, the next project will be the study of the project. The main results are as follows: (1) Protein Kinase C CPKC) the chemical analysis of PKC molecular enzyme and the analysis of PKC molecular enzyme were analyzed by the machine. (2) the PKC molecular marker was used to analyze the specific antibody and the PKC molecular marker was used to analyze the specific antibody. (3) the receptor of PKC was analyzed by scanning electron microscopy (Elisa), cell membrane mechanism and nuclear energy. (4) the inhibition of PKC molecular characteristics is carried out. Check the results, please check the results of the project and get the following information. The main results are as follows: (1) in the field of C2 and C1, in the field of C2 and C1, the combination of all kinds of PKC in the field of C2 and C1 in the field of cysteine-rich in the field of C2 and C1 in the field of cysteine-rich in the field of C2 and C1 respectively. The interaction between the two parts of the system must be analyzed, the interaction between each other in the C2 field and the interaction between the two parts must be detected. The enzyme and sperm enzyme are used to determine the temperature of each molecule, the temperature of each molecule, and the speed of decomposition of the enzyme. The international and active PKC will be opened as soon as possible. (2) to modify PKC molecular species and to analyze the characteristics of the new PKC species. Antigens and specific antibodies were detected by molecular tissue, cytomegaly, β I, β II, alpha PKC antibodies. (3) the results showed that the acceptor was able to analyze the function of the TCR-CD3 complex and the importance of the PKC. The combination of CRE and protein acidification is an important factor. The results show that there is a significant difference between PKC and protein acidification. (4) the results of the analysis of the results of the temoxifen treatment of breast cancer, the results of the analysis of the results, the activity of the N-terminal enzyme, the C-terminal enzyme activity, the activity of the N-terminal enzyme, the activity of the C-terminal enzyme, the growth of the breast cancer, the activity of the N-terminal enzyme, the activity of the N-terminal

项目成果

Hosoda,K.et al.: "Immunocytochemical localization of the βI subspecies of protein kinase C in rat brain." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.86. 1393-1397 (1989)

Hosoda, K. 等人：“蛋白激酶 C βI 亚种在大鼠脑中的免疫细胞化学定位。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.86 (1989)。

Ono,Y.et al.: "Phorbol ester binding to protein kinase C requires cystein-zink finger-like sequence." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.86. 4868-4871 (1989)

Ono,Y.等人：“佛波酯与蛋白激酶 C 结合需要半胱氨酸-锌指样序列。”

Itoh,A.et al.: "Immunocytochemical localization of the α subspecies of protein kinase C in rat brain." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.87. (1990)

Itoh, A. 等人：“大鼠脑中蛋白激酶 C α 亚种的免疫细胞化学定位。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.87 (1990)。

Berry,N.et al.: "Activation of resting human T cells requires prolonged stimulation of protein kinase C." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.87. (1990)

Berry,N.等人：“静止人类 T 细胞的激活需要长时间刺激蛋白激酶 C。”

Saito,N.et al.: "Immunocytochemical localization of the βII subspecies of protein kinase C in rat brain." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.86. 3409-3413 (1989)

Saito, N. 等人：“蛋白激酶 C βII 亚种在大鼠脑中的免疫细胞化学定位。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.86 (1989)。