ラウス肉腫ウイルスsrc遺伝子産物のキナ-ゼ活性調節機構

Rous肉瘤病毒src基因产物激酶活性调控机制

• 批准号: 01580191
• 负责人: 深見 泰夫
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01580191/
• 关键词: がん遺伝子産物; チロシンキナ-ゼ; 合成ペプチド; 蛋白質リン酸化

ラウス肉腫ウイルスのがん遺伝子(src)の産物“p60^<v-src>"は、蛋白質のチロシン残基をリン酸化する酵素(チロシンキナ-ゼ)の活性を持っており、活性を担っているC末端側約半分のキナ-ゼドメインとN末端側約半分の非触媒領域とからなっている。本研究では、p60^<v-src>のキナ-ゼ活性の調節における非触媒領域の働きを明らかにするため、合成ペプチドを用いた実験を中心に解析を行った。p60^<v-src>の非触媒領域中には、srcファミリ-がん遺伝子産物全体によく保存された構造があり、その一部は、ケラチンやビメンチン等の中間径線維蛋白質と高い類似性を持っている。今回使用した合成ペプチドは、この中間径線維蛋白質との類似部位に相当している。解析の結果、(1)類似部位のp60^<v-src>側の配列を持つ合成ペプチドの1つ(ペプチドA:21アミノ酸)が、p60^<v-src>のキナ-ゼ活性をμMオ-ダ-で特異的に阻害すること、(2)その阻害作用は、基質蛋白質及びATPのいずれにも競合しないものであること、(3)ペプチドA内にペプチドA以上の阻害活性を持った部分ペプチドが見い出されること、(4)ペプチドAのC末端側約半分に当たるペプチドが、ペプチドAの阻害作用に拮抗すること、(5)ペプチドAはp60^<v-src>のキナ-ゼドメインに作用すること、(6)p60^<v-src>の自己リン酸化部位周辺のアミノ酸配列に相当する合成ペプチドによって、ペプチドAによる阻害が回復すること、等が明らかとなった。これらの知見は、src遺伝子産物の非触媒領域内の中間径線維蛋白質類似構造の部分が、分子内あるいは分子間で、自己リン酸化部位周辺を含むキナ-ゼドメインに作用して、そのキナ-ゼ活性を調節し得ることを示しており、ウイルスのsrc遺伝子が由来した正常細胞中のsrc遺伝子産物"p60^<v-src>"では、活性化されたp60^<v-src>と異なり、非触媒領域によって活性が抑制されているためにがん化能を持たないのではないかと考えられる。

The <v-src>activity of the enzyme p60^, the product of src, is maintained at about half of the C-terminal side and about half of the N-terminal side of the protein residue. In this study, the regulation of p60 activity in the <v-src>non-catalytic domain was studied. In <v-src>the non-catalytic domain of p60^, all the protein products are preserved, and some of them are preserved, such as intermediate protein and high similarity protein. This time, the use of synthetic proteins and similar parts of the intermediate diameter protein is quite different. The results of the analysis are as follows: (1) the alignment of the p60^-side of the similar site <v-src>is consistent with the synthesis of the selected site 1 (selected site A:21 amino acid), the activity of the p60^<v-src>-side of (5) The effect of p60 on p60<v-src>,(6) the acid distribution around p60 and p60 on p60 and p60 and p60 on p60<v-src>. In this paper, we investigate the mechanism of protein activity regulation of src gene products in non-catalytic <v-src>domain, such as protein structure, molecular structure<v-src>,

项目成果

深見泰夫: "チロシンキナ-ゼとイノシト-ルリン脂質代謝の接点" 実験医学. 7. 1129-1133 (1989)

Yasuo Fukami：“酪氨酸激酶和肌醇磷脂代谢之间的界面”实验医学。7. 1129-1133 (1989)

Suda,T.et al.: "The tumor rejection antigen separated from Rous sarcoma virusーinduced murine fibrosarcoma exhibits a molecular weight of approximately 60 kD but differs from functional pp60^<src>." Jap.J.Cancer Res.80. 879-886 (1989)

Suda, T. 等人：“从劳斯肉瘤病毒诱导的鼠纤维肉瘤中分离出来的肿瘤排斥抗原的分子量约为 60 kD，但与功能性 pp60^<src> 不同。” 879-886 (1989)

Nishizaka,Y.ed.: "Proceedings of the 7th International Conference on Cyclic Nucleotides,Calcium,and Protein Phosphorylation" Raven Press, (1990)

西坂 Y.ed.：“第七届环核苷酸、钙和蛋白质磷酸化国际会议论文集”Raven Press，（1990 年）