細胞増殖の調節(特にG1期とG2期で)に関与するヒト遺伝子のクロ-ニング

克隆参与细胞增殖调节（尤其是 G1 和 G2 期）的人类基因

• 批准号: 01614527
• 负责人: 西本 毅治
• 金额: $ 5.18万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01614527/
• 关键词: RCC1遺伝子; BN2変異; CCG1遺伝子; 点突然変異

細胞増殖の調節はG1期とG2期で主としてなされる。本研究ではこれらの時期に欠損を持つ温度感受性変異株を用いて、G1/G2期で細胞増殖の調節に働いているヒト遺伝子を分離しその機能を解析している。G1期変異株としてはtsBN462を、G2期変異株としてはtsBN2をとりあげ、これらの変異を相補するヒト遺伝子CCG1とRCC1を分離した。本年度はこれらの遺伝子の機能解析をさらに進めてつぎのことを明らかにした。(1)完全なCCG1遺伝子を分離した。前年度までに一部の形質転換株に維持されていた一連のヒトDNAと既に分離されているCCG1遺伝子とからコ-ドされているcDNAが新たに分離され、CCG1遺伝子産物は前年度から予想されていた200KDaのものであることが証明された。tsBN462変異を相補するだけであれば、C端とN端の一部が欠けた遺伝子で充分であるがCCG1遺伝子の本来は別の機能を持ちそれには全体の遺伝子が必要であると推測される。(2)RCC1遺伝子がBN2異変株において変異している遺伝子そのものであることを明らかにした。これまでRCC1遺伝子はBN2変異のサプレッサ-であって本来の遺伝子は別物ではないかとしばしば言われていたのであるが、野生型とBN2株のRCC1cDNAを分離しその塩基配列の比較からBN2変異部位をcDNAの上に同定した。これによりRCC1遺伝子がBN2変異遺伝子そのものであることが確定した。(3)BN2変異部位のデ-タ-にもとづいて変異がタンパク質の構造に及ぼす効果について解析した結果、非常に大きな変化が高温下で起ることが推測され、抗体を用いてRCC1タンパク質の挙動をBN2細胞で高温下で調べたところ、高温下でこのタンパク質は消失し、それにともなってH1キナ-ゼが活性化されることが確認された。

The regulation of cell proliferation is dominated by G1 and G2 phases. In this study, we analyzed the function of temperature sensitive mutants in the regulation of cell proliferation in G1/G2 phase. G1-phase variant TsBN462, G2-phase variant TsBN2, CCG1 and RCC1 This year, the analysis of the function of the original text has been carried out. (1)Complete CCG1 separation The CCG1 gene was isolated from the CCG1 cDNA library and the CCG1 cDNA library was newly isolated from the CCG1 cDNA library. tsBN462 is complementary to each other, and one part of the C terminal and the N terminal is incomplete. The original function of the CCG1 terminal is maintained, and all the components are necessary. (2)RCC1 is a member of the BN2 family. RCC1 cDNA isolated from wild-type BN2 strain was compared with that of BN2 strain. This is the first time I've ever seen a child. (3) BN2 different parts of the structure and effect of the different parts of the analysis results, very large changes in temperature rise, speculation, antibody use, RCC1 different parts of the BN2 cells at high temperature, high temperature change, high temperature disappearance of the different parts of the structure and effect of the analysis results, very large changes in temperature rise, speculation, antibody use, RCC 1 different parts of the BN2 cells at high temperature, high temperature change in temperature, high temperature change in the structure of the different parts of the BN2 cells at high temperature disappear, confirmation.

项目成果

H.Sasaki: "X-ray-related potentially lethal damage expressed by chromosome condensation and the influence of caffeine" Radiation Research. 120. 72-82 (1889)

H.Sasaki：“染色体凝结和咖啡因的影响所表达的与 X 射线相关的潜在致命损伤”辐射研究。

西本毅治: "BN2変異とG2ブロック" 蛋白質 核散 酵素. 34. 1188-1203 (1989)

Takeharu Nishimoto：“BN2 突变和 G2 阻断”蛋白核酶。 34. 1188-1203 (1989)

M.Ohtsubo: "The RCC1 protein,a regulator for the onset of chromosome condensation locates in the nucleus and binds to DNA" J.Cell Biology. 109. 1389-1397 (1889)

M.Ohtsubo：“RCC1 蛋白是染色体浓缩开始的调节因子，位于细胞核中并与 DNA 结合”J.Cell Biology。

S.Uchida: "Premature chromosome comdensation is induced by a point mutation in the hamster RCC1 gene" Molecular and Cellular Biology. inpress (1990)

S.Uchida：“仓鼠 RCC1 基因的点突变诱导染色体过早缩合”《分子与细胞生物学》。

H.Nishitani: "Cloning of Xenopus RCC1 cDNA,a homolog of the human RCC1 gene:Complementation of tsBN2 mutation and identification of the product" J.Biochemistry. 107. 228-235 (1990)

H.Nishitani：“爪蟾 RCC1 cDNA 的克隆，人类 RCC1 基因的同源物：tsBN2 突变的互补和产物的鉴定”J.Biochemistry。