細胞周期を制御する遺伝子群の研究

控制细胞周期的基因研究

• 批准号: 05152092
• 负责人: 西本 毅治
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152092/
• 关键词: 細胞周期; 温度感受性変異; tsBN2; PCC; アポプトーシス; tsBN7; CCG1; RCC1

本年度はこれまでに我々の研究室で分離し貯蔵しているハムスター由来のBHK21細胞株の細胞増殖に関する温度感受性変異株、tsBN2,tsBN7、tsBN67、tsBN250、tsBN462を用いて研究を行い、主な成果としては次の事が挙げられる。1)アポプトーシス抑制変異遺伝子の分離。昨年度の成果に基づきアポプトーシスを起こす他の変異が我々の持っている温度感受性変異株の中に、あるか調べた。その結果、相当数の変異がアポプトーシスを高温で起こすことが判明した。その中で、最も顕著なDNA分子の切断像を示すtsBN269を取り上げその変異を相補するヒト遺伝子の分離を開始した。既に、ヒトDNAを持つ第一次形質転換株が分離されており、現在、第二次形質転換を行なっている。2)新たなG1期進行必須遺伝子のクローニング。高温でG1期停止をするtsBN67変異株を相補するヒト遺伝子の分離を進めているが、逐に変異を相補するヒト遺伝子DNA断片を分離するのに成功した。現在、2kbのORFを持つcDNA断片が分離されており、これが変異を相補するか否か調べている。cDNAの塩基配列が正しいとするとこれまでに分離されていない新しいタンパク、それも特殊な構造をしたタンパクをコードしているようである。分離されたcDNAはX染色体の遺伝子に由来していた。3)tsBN7遺伝子DAD1の解析。DADIタンパクの機能の消失がアポプトーシスを起こしたことを証明するため、DAD1を多量に発現したときに他の細胞系、ならびに線虫の系のアポプトーシスが現実に抑制されるか否かを調べている。4)CCG1遺伝子の機能。この遺伝子産物がTBP結合タンパクのTAF250であることが他に研究者の報告により判明した。我々はtsBN462株がCCG1に変異を持つことを、変異部位を決定することにより確認した。さらに、この株が高温でアポプトーシスを起こすことがわかった。

This year は こ れ ま で に I 々 の laboratory で separation し storage 蔵 し て い る ハ ム ス タ ー origin の BHK21 cell lines の cells raised colonization に masato す る temperature sensitivity - different strains, tsBN2 tsBN7, tsBN67, tsBN250, tsBN462 を with い を い, Lord な て research と し て は time something の が 挙 げ ら れ る . 1)アポプト アポプト シス inhibits the separation of the 伝 offspring of the variant. Yesterday's annual の results に base づ き ア ポ プ ト ー シ ス を up こ す he の - different が I 々 の hold っ て い る temperature sensitivity - different strains の に, あ る か adjustable べ た. Youdaoplaceholder0 <s:1> result, equivalent number <s:1> change がアポプト シスを シスを high temperature で onset <s:1> す とが とが judgment た. そ の で, the most も 顕 the な DNA molecule の cut like を shown す tsBN269 を take on り げ そ の - different fill を phase す る ヒ ト heritage 伝 の separation を started し た. に, ヒ ト DNA を hold つ character for the first time planning in separation plant が さ れ て お り, now, the second character line planning in を な っ て い る. 2) The new たなG1 phase must be carried out with 伝 sub-<s:1> ロ ロ ニ ニ グ グ. High temperature で G1 phase stop を す る tsBN67 - different strains を phase fill す る ヒ ト heritage 伝 son の separation を into め て い る が, by に - different fill を phase す る ヒ ト heritage 伝 child DNA fragment を separation す る の に successful し た. Now, the 2kb <s:1> ORFを holds the が cDNA fragment が to separate the されてお and the <s:1> れが variation を to complement the する を and reject the べて る る る. CDNA の salt base with column が is し い と す る と こ れ ま で に separation さ れ て い な new し い い タ ン パ ク, そ れ も な special tectonic を し た タ ン パ ク を コ ー ド し て い る よ う で あ る. Isolation of されたcDNA された X chromosome heritage 伝 subchromosome に origin て て た た 3) Analysis of the 伝 sub DAD1 of tsBN7. DADI タ ン パ ク の function disappear の が ア ポ プ ト ー シ ス を up こ し た こ と を prove す る た め, DAD1 を に abundant 発 now し た と き に he の cell lines, な ら び に nematodes の is の ア ポ プ ト ー シ ス が now be に inhibit さ れ る か no か を adjustable べ て い る. 4)CCG1 retains the function of 伝 suborgans. こ の heritage 伝 zi chan content が the TBP combining タ ン パ ク の TAF250 で あ る こ と が の に researchers report に よ り.at し た. I 々 は tsBN462 strains が CCG1 に - different を hold つ こ と を, - different parts を decided す る こ と に よ り confirm し た. Youdaoplaceholder0, <s:1> が plant が high temperature でアポプト さらに シスを シスを とがわ す とがわ とがわ った った った.

项目成果

Noguchi,E.,Nishimoto,T.et al.,: "Molecular cloning and identification of two types of hamster cyclin-dependent kinases:CDK2 and CDK2L." Biochem.Biophys.Res.Commun.197. 1524-1529 (1993)

Noguchi,E.,Nishimoto,T.等人：“两种类型仓鼠细胞周期蛋白依赖性激酶的分子克隆和鉴定：CDK2 和 CDK2L。”

Nakashima,T.,Nishimoto,T.et al.: "Molecular cloning of a human cDNA encoding a novel protein, DAD1,whose defect causes apoptotic cell death in hamster BHK21 cells." Mol.Cell.Biol.13. 6367-6374 (1993)

Nakashima,T.,Nishimoto,T.等人：“编码新型蛋白质 DAD1 的人类 cDNA 的分子克隆，其缺陷导致仓鼠 BHK21 细胞凋亡。”

Nakashima,T.,Nishimoto,T.et al.,: "Structure of the human CCG1 gene:relationship between the exons/introns and functional domain/modules of the protein." Gene. (in press). (1994)

Nakashima,T.,Nishimoto,T.等人，：“人类 CCG1 基因的结构：外显子/内含子与蛋白质功能域/模块之间的关系。”

Watanabe,M.,Nishimoto,T.et al.: "Functional equivalence of human X-and Y-encoded isoforms of ribosomal protein S4 consistent with a role in Turner syndrome." Nature Genetics. 4. 268-271 (1993)

Watanabe,M.,Nishimoto,T.等人：“核糖体蛋白 S4 的人类 X 和 Y 编码亚型的功能等效性与特纳综合征中的作用一致。”

Hayashida,T.Nishimoto T.,et al.: "The CCG1/TAF 250 gene is mutated in thermosensitive G1 mutation of the BHK21 cell line derived from golden hamster" Gene. (in press). (1994)

Hayashida,T.Nishimoto T.,et al.：“CCG1/TAF 250 基因在源自金仓鼠的 BHK21 细胞系的热敏 G1 突变中发生突变”基因。