細胞周期のG1期進行調節遺伝子の細胞癌化における役割

细胞周期G1期进程调控基因在细胞恶性肿瘤中的作用

• 批准号: 03152092
• 负责人: 西本 毅治
• 金额: $ 5.12万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03152092/
• 关键词: RCC1; CCG1; CCG2; リボソ-ムタンパクS4

本研究においては細胞の癌化と密接に関連している細胞周期のG1期に的をしぼり、この時期における増殖調節機構を遺伝子のレベルで研究することを目的として研究を行った。申請者は長年にわたって増殖に関する温度感受性変異株をハムスタ-由来のBHK細胞より分離し、これらを相補群に分類整理している。本研究においてはこれらの変異株のうちからG1期に変異があるものを選びその変異遺伝子を分離し、その細胞癌化における役割を追求することを計画した。その結果、典型的なG1期変異をしめす温度感受性変異株tsBN63を相補するヒト遺伝子が、リン酸カルシウムを用いたDNAトランスフェクション法により分離された。そのcDNAを分離し塩基配列を調べたところマウスのリボソ-ムタンパクS4をコ-ドしていることが明らかとなった。BHK細胞とtsBN63細胞のS4タンパクのアミノ酸配列を比較することによりS4遺伝子がtsBN63変異株の変異遺伝子であることを確認した。既に分離された遺伝子についてはCCG1遺伝子とRCC1遺伝子の解析をおこなった。CCG1遺伝子機能の解析:本研究において、新たに、C端にカゼインカイネ-スでリン酸化される部位があることが判明した。この部位は変異を相補するうえでは必須ではないのでこれまで分離されてはいなかったと思われる。さらに、このタンパクが核にありDNA結合能をもっていることが明らかにされた。RCC1タンパクとG1期進行制御:tsBN2細胞を高温下におくとRCC1タンパクが消え、S期以降ではヒストンH1キナ-ゼが活性化され染色体凝縮が起こることが明らかとなったが、G1期においてはRCC1タンパクは消えてもH1キナ-ゼの活性化は起こらず、逆にcdc2タンパクのリン酸化が阻止されることがわかった。

The purpose of this study is to study the relationship between carcinogenesis and cell cycle in G1 phase, and to study the mechanism of proliferation regulation in G1 phase. The applicant is responsible for the isolation and classification of temperature-sensitive mutants from BHK cells. In this study, we planned to isolate the mutant plants from the G1 phase, select the mutant plants from the G1 phase, and isolate the mutant plants from the G1 phase. The results showed that typical G1-phase mutants were isolated from temperature sensitive mutants tsBN63 by DNA sequencing. The sequence of cDNA fragments was modified by the sequence of cDNA fragments. Comparison of acid alignment between BHK cells and tsBN63 cells and identification of S4 mutants and tsBN63 mutants The CCG1 gene and RCC1 gene are separated and analyzed. Analysis of CCG1 gene function: this study identified the middle, new and C-terminal sites of CCG1 gene. This part is different from each other. It must be separated. The DNA binding ability of the two groups is very important. RCC 1 is controlled in G1 phase: tsBN2 cells are activated in H1 phase after high temperature and in G1 phase after high temperature.

项目成果

T.Sekiguchi: "The human CCG1 gene,essential for progression of the G1 phase encodes a 210-kilodalton nuclear DNA-binding protein" Mol.Cell.Biol.11. 3317-3325 (1991)

T.Sekiguchi：“人类 CCG1 基因对于 G1 期的进展至关重要，编码 210 千道尔顿的核 DNA 结合蛋白”Mol.Cell.Biol.11。

M.Watanabe: "Molecular cloning of the human gere,CCG2,that complements the BHK-derived temperature-sensitive cell cycle mutant tsBN63:identity of CCG2 with the human X chromosomal SCAR/RPS4X gene." J.Cell.Science. 100. 35-43 (1991)

M.Watanabe：“人类 Gere CCG2 的分子克隆，它补充了 BHK 衍生的温度敏感细胞周期突变体 tsBN63：CCG2 与人类 X 染色体 SCAR/RPS4X 基因的同一性。”

H,Nishitani: "Loss of RCC1,a nuclear DNA-binding protein,uncouples the completion of DNA replication from the activation of cdc 2 protein kinase and mitosis" EMBO J.10. 1555-1564 (1991)

H，Nishitani：“RCC1（一种核 DNA 结合蛋白）的丢失，使 DNA 复制的完成与 cdc 2 蛋白激酶的激活和有丝分裂脱钩”EMBO J.10。