体細胞の細胞周期とその制御機構-RCC1-RanGTPaseの解析を中心として-

体细胞的细胞周期及其控制机制 - 重点分析RCC1-RanGTPase -

• 批准号: 12002011
• 负责人: 西本 毅治
• 金额: $ 256.22万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Specially Promoted Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12002011/
• 关键词: RanGAP; Histone H3-K9 methyltransferase; ヘテロクロマチン; 温度感受性変異マウス; Mog1; NTF2; RCC1; カフェイン; ATR; Adenine; H3-K9メチル転移酸素; SNF2; 細胞周期制御; DBX; RanBPM; Gap1; Gtr1; RagA; Ran; Cell Cycle; MOG1; Gtr1p; Gtr2p; RagA,B,C,D

1)RanGAP蛋白質の機能解析:分裂酵母のhistone H3と動物のヒストンを用いてRanGAPとの結合性をしらべたところ、histone H3のC端とRanGAPは結合した。この結合によりRanGAPの活性は完全に阻害された。そして、RanGAP/Sprna1p温度感受性変異のサプレッサーとして分離された、Histone H3-K9 methyltransferase Clr4がこの阻害を完全に回復させる事が生化学的に証明された。In vivoにおいても、ヒストンH3の強発現はclr4遺伝子欠損株では致死となったが、野生株では致死とはならなかった。さらに、興味あることにはRanGAP蛋白質がそれ自体でRan非依存的にClr4のHistone H3-K9 methyltransferase活性を促進した。これらの結果はRanGAPがヘテロクロマチン形成に関わっている事を強く示唆する。2)SpSnf2複合体を酵母より抽出し、Ranによる機能制御の有無をしらべる。【○!3】Clr4とSrSnf2以外にSerine/threonine kinase SpKsp1pが分離されている。このキナーゼとRanとの関連を調べる。3)出芽酵母Ran/Gsp1温度感受性変異株においてはDNA障害チェックポイント機構が活性化されており、野生型で致死である、MEC遺伝子欠損がこの株では致死とならなかった。この結果はRan cycleの新たな機能を示唆する。4)Mog1蛋白質の温度感受性変異株を分裂酵母を用いて作成し、そのサプレッサーを分離した結果、多数のNTF2が分離された。この結果はMog1蛋白質とNTF2蛋白質の機能的相関を強く示唆する。5)RCC1遺伝子に温度感受性変異を持つマウスは発生初期の卵割期に染色体凝縮を起こして死んだ。この結果、培養細胞での表現型が実際の動物体においても証明された。

1) Functional analysis of RanGAP protein: histone H3 of split yeast and its use in animals. This combination of RankGAP activity is completely inhibited. The temperature sensitivity of RanGAP/Sprna1p is different from that of H3-K9 methyltransferase Clr4. In vivo, the strong development of H3 is clr4, and the weak strain is lethal, and the wild strain is lethal. The activity of Clr4 and Histone H3-K9 methyltransferase was promoted by the enzyme. The results of this study are as follows: 2) SpSnf2 complex yeast extract, Ran, functional control and absence of the virus.【○! 3) Serine/threonine kinase SpKsp1p is isolated from Clr4 and SrSnf2.このキナーゼとRanとの关连を调べる。3)Germinating yeast Ran/Gsp1 temperature sensitive mutant strain, DNA damage mechanism, activation, wild-type, lethal strain, MEC mutant strain The result is a new function of Ran cycle. 4) The temperature sensitivity of Mog1 protein was detected by PCR, and most NTF2 was isolated. These results suggest a strong functional correlation between Mog1 protein and NTF2 protein. 5) The temperature sensitivity of RCC1 gene is different from that of other genes. The results, phenotypes of cultured cells and the actual animal body were demonstrated.

项目成果

M.Funakoshi et al.: "Budding yeast Dsk2p is a polyubiquitin-binding protein that can interact with the proteasome"RNAS. 99. 745-750 (2002)

M.Funakoshi 等人：“芽殖酵母 Dsk2p 是一种多聚泛素结合蛋白，可以与蛋白酶体”RNAS 相互作用。

M.Yoshimi et al.: "Inhibition of N-linked glycosylation causes apoptosis in hamster BHK21 cells."Biochemical Biophysical Research Communication. 276. 965-969 (2000)

M.Yoshimi 等人：“抑制 N 连接糖基化会导致仓鼠 BHK21 细胞凋亡。”《生物化学生物物理研究通讯》。

N.Suzuki et al.: "The Saccharomyces carevisiae small GTPase, Gsp1p/Ran, is involved in 3' processing of 7S-to-5.8S rRNA and in degradation of the excised 5'-AO fragment of 35S pre-rRNA, both of which are carried out by the exosome"GENETICS. 158. 613-625 (

N.Suzuki 等人：“卡氏酵母小 GTP 酶 (Gsp1p/Ran) 参与 7S 至 5.8S rRNA 的 3 加工以及 35S pre-rRNA 切除的 5-AO 片段的降解，两者均参与

Human DDX3Y, the Y-encoded isoform of RNA helicase DDX3, rescues a hamster temperature-sensitive ET24 mutant cell line with a DDX3X mutation

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2004.07.005
• 发表时间: 2004-10-15
• 期刊: EXPERIMENTAL CELL RESEARCH
• 影响因子: 3.7
• 作者: Sekiguchi, T;Iida, H;Nishimoto, T
• 通讯作者: Nishimoto, T

J.Fukumura et al.: "A temperature-sensitive mutant of the mammalian RNA helicase, DEAD-BOX isoform, DBX, defective in the transition from G1 to S."J.Biochem. 134. 71-82 (2003)

J.Fukumura 等人：“哺乳动物 RNA 解旋酶的温度敏感突变体，DEAD-BOX 亚型，DBX，在从 G1 到 S 的转变中存在缺陷。”J.Biochem。