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細胞増殖の調節(特にG1期とG2期で)に関与するヒト遺伝子のクローニング

克隆参与细胞增殖调节（特别是 G1 和 G2 期）的人类基因

基本信息

批准号：
63614526
负责人：
西本毅治
金额：
$ 5.12万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63614526/
关键词：
細胞周期 G1期 G2期核タンパク質染色体凝縮卵母細胞温度感受性変異 PCC

项目摘要

細胞周期のうち増殖調節が主としてなされているG1期とG2期に的をしぼって、これらの時期に変異を持つBHK21細胞由来の温度感受性変異株を用いて研究を進めている。G1期の変異株としてはtsBN462株をG2期の変異株としてはtsBN2株を選び、前年度までにこれらの変異を野性型に変換する生物活性を持つヒト遺伝子を単離しそのcDNAを分離した。本年度はこれらcDNAの塩基配列より予想される遺伝子産物がヒト由来の細胞に存在することを抗体を用いて証明しさらにその機能についての検討を行った。ヒトCCG1遺伝子はG1期温度感受性変異株tsBN462を相補するヒ遺伝子である。このcDNAより予想されたタンパク質のペプタイドを合成し、これに対する抗体を作ることによってCCG1タンパク質が核タンパクであることを証明した。ところが現実のタンパクは予想された分子量180KDaよりさらに大きく200KDa以上であると推定された。一方、分離されたCCG1遺伝子の5'端を解析することによって分離された遺伝子は本来のヒトCCG1遺伝子とハムスターのある種の遺伝子との融合遺伝子であることがわかった。つまり本来のCCG1遺伝子はさらに大きなものでその産物もまた分離されたcDNAより大きいものであると思われる。現在、分離されたCCG1遺伝子の5'端を用いて完全なCCG1遺伝子の単離を行っている。またCCG1遺伝子がヒトX染色体の8^<11>-g13領域より由来していることを証明した。RCC1遺伝子は染色体凝縮の調節遺伝子と考えているが、その機能は不明である。本年度はこのタンパクが核にあってDNA結合能を持つことを明らかにした。またカエルのRCC1cDNAを単離し、ヒト、ハムスター、カエルの間でこのタンパク質がよく保存されていること及びXenopus oocyteのなかでRCC1mRNAが既にあることがわかった。

The regulation of cell cycle growth is mainly related to G1 and G2 phases, and the study of the origin of temperature-sensitive mutants of BHK21 cells is progressing. The G1 variant was isolated from tsBN462 strain and the G2 variant was isolated from tsBN2 strain. This year, the gene sequence of the cDNA is expected to be confirmed by the detection of the gene product in the cell of origin, and the use of antibodies to prove its function. CCG1 gene is a G1 temperature-sensitive variant of tsBN462. This cDNA is expected to be synthesized from the cDNA of the CCG1 gene, and the cDNA of the CCG1 gene is expected to be synthesized from the cDNA of the CCG1 gene. The molecular weight is 180KDa or more, and the molecular weight is 200KDa or more. The 5'end of the CCG1 gene is analyzed by a method of separating the CCG1 gene from the original CCG 1 gene and by a method of combining the CCG1 gene with the fusion gene. The original CCG1 gene was isolated from the cDNA. Now, the CCG 1 gene is isolated from the 5'end of the gene. CCG1 gene was identified in the 8^<11>-g13 domain of chromosome X. RCC1 gene is a gene whose function is unknown due to chromosome condensation. This year, the DNA binding energy of the nuclear DNA is increasing. RCC1 cDNA is isolated from the genome, and RCC1 mRNA is isolated from Xenopus oocyte.