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中枢神経系におけるカルシウム結合蛋白の局在とその遺伝子発現:免疫細胞化学及びin situ hybridizationによる形態学的解析

中枢神经系统中钙结合蛋白及其基因表达的定位：通过免疫细胞化学和原位杂交进行形态学分析

基本信息

批准号：
01641542
负责人：
小坂俊夫
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、主に大脳皮質におけるカルシウム結合蛋白パ-ブアルブミン含有神経細胞について、免疫細胞化学による解析を進めた。1)単クロ-ン抗体VC1.1が、GABAニュ-ロンのサブポピュレ-ションの一つであるカルシウム結合蛋白パ-ブアルブミン含有神経細胞の一部を特異的に認識していることの証明VC1.1は、ネコの視覚野を抗原として得られた単クロ-ン抗体の一つで中枢神経系のかなり限られたニュ-ロン群の細胞膜近傍を認識することが報告されている。特に、大脳皮質では主に、いわゆるGABA性非錐体細胞の一部を認識するとされている。我々は、従来の大脳皮質GABA性の免疫細胞化学的解析により、GABAニュ-ロンを(1)カルシウム結合蛋白パ-ブアルブミンを含有したGABAニュ-ロン、(2)他の神経活性物質を含有したGABAニュ-ロン、(3)その他の三つのサブポピュレ-ションに分類した。これは、いわばGABAニュ-ロンの細胞質に含有される物質による化学的分類である。では、細胞表面を認識するVC1.1はこのような分類とはどのように関係しているのであろうか。我々がラット大脳皮質1次体性知覚野で検討したところ、VC1.1は、上記のGABAニュ-ロンのサブポピュレ-ションであるパ-ブアルブミン含有GABAニュ-ロンに特異的であることが判明した。このことはパ-ブアルブミン含有GABAニュ-ロンの一部は、細胞表面近傍に特異な微小環境を有していることを示している。2)ステレオロジ-による定量的解析プラスチック包埋した大脳皮質、海馬から連続した0.5μmの準超薄切片を作成し切片間距離として3μmを選びdisectorによるパ-ブアルブミン含有神経細胞の解析を開始した。3)ビオチン標識した合成オリゴヌクレオチドを用いてin situ hybridizationによる遺伝子発現について研究を開始した。

This year, we mainly focus on the large-scale cortical protein-binding protein-containing neuronal cell analysis and immunocytochemistry analysis. 1) Monoclonal antibody VC1.1, GABA ニュ-ロンのサブポピュレ-ションの一つであるカルシウムbinding protein パ-ブアルブミン contains a part of the saccharin cells and a specific にcognition していることのproves VC1.1は、ネコの视覚野をantigen として got られた単クロ-ンantibody の一つで中The central god's system is limited to られたニュ-ロンgroup's cell membrane close to the をknowledge することが report されている. It is a special part of the main body of the large cortical cortex and GABA non-pyramidal cells. Analysis of immunocytochemistry of GABA-specific immunocytochemistry in the cortex of the large cortex of 々は, により, GABAニュ-ロンを (1) カルシウム-binding protein パ-ブアルブミンを containsしたGABAニュ-ロン、(2) His other active substances contain したGABAニュ-ロン, (3)その他の三つのサブポピュレ-ションにClassificationした.これは, いわばGABAニュ-ロンのcytoplasmic ににれるsubstances によるchemical classificationである.では、Cell surface をKnowledge するVC1.1はこのようなClassification とはどのようにRelationship しているのであろうか. I am the first time I know the nature of the body, I know the nature of the body, and I want to know the nature of the world. The サブポピュレ-ションであるパ-ブアルブミン contains GABA ニュ-ロンに's specific であることがした. The このことはパ-ブアルブミン contains a part of GABA ニュ-ロンのは, and there is a special microenvironment near the cell surface. 2) Quantitative analysis of ステレオロジ-によるプラスチックembedded large cortex and hippocampus 0.5μm quasi-ultrathin sections The distance between slices was 3μm and the analysis of the selected disector and the analyses containing the cells was started. 3) The ビオチン logo is synthesized by オリゴヌクレオチドを and the いてin situ hybridization による伝子発开について research をstarts した.