アルツハイマ-病家系の分子遺伝学的研究

本研究の目的は、日本人の家族性アルツハイマ-病(以下FAD)家系の構成員について、原因遺伝子と考えられるDNAクロ-ンあるいは原因遺伝子の近傍に存在する遺伝子マ-カ-との間でDNA多型(RFLPs=restriction fragment length polymorphisms)を利用した連鎖分析を行いまず遺伝子座位を決定し、次に遺伝子歩行などの技術を用いて原因遺伝子そのものを単離することである。本年度は、FADの3家系:TK1家系8名(患者1名)、TK2家系4名(患者1名)、YK家系8名(患者2名)について、構成員の白血球よりDNAを抽出し同時にBリンパ球をEBウイルスで形質転換し株化細胞として保存した。今後これらの家系について、脳沈着物質であるbeta amyloid protein(APP)や、白人のFAD家系での連鎖の証明されているD21S16などの遺伝子マ-カ-との連鎖を調べて行く予定である。白人の晩発性FADの原因遺伝子は、第19染色体に存在している可能性があるとする報告があり、第19染色体のNotIリンキングライブラリ-を作成した。単離したNot1リンキングクロ-ンは5種であり、この数は予想していた数よりも少なく、さらにクロ-ンの数を増すためには新しい方法を開発する必要があった。NotIリンキングクロ-ンのうち3種でRFLPsを認めた(pNB46;BgIII,pKNE75;BgIII,pKNN3;NcoI)。遺伝子量効果により、2クロ-ンが第19染色体長腕に、1クロ-ンが短腕にあることが確認された。我々は、技術的な問題であるパルス電場ゲル電気泳動法(PFGE)や上記のNotIリンキングクロ-ンの作成などの経験を有するため、FADの原因遺伝子座位を決定した後、FAD遺伝子の単離同定までの準備はすでにできていると考える。

本研究の目的は、日本人の家族性アルツハイマ-病(以下FAD)家系の構成員について、原因遺伝子と考えられるDNAクロ-ンあるいは原因遺伝子の近傍に存在する遺伝子マ-カ-との間でDNA多型(RFLPs=restriction fragment length polymorphisms)を利用した連鎖分析を行いまず遺伝子座位を決定し、次に遺伝子歩行などの技術を用いて原因遺伝子そのものを単離することである。本年度は、FADの3家系:TK1家系8名(患者1名)、TK2家系4名(患者1名)、YK家系8名(患者2名)について、構成員の白血球よりDNAを抽出し同時にBリンパ球をEBウイルスで形質転換し株化細胞として保存した。今後これらの家系について、脳沈着物質であるbeta amyloid protein(APP)や、白人のFAD家系での連鎖の証明されているD21S16などの遺伝子マ-カ-との連鎖を調べて行く予定である。白人の晩発性FADの原因遺伝子は、第19染色体に存在している可能性があるとする報告があり、第19染色体のNotIリンキングライブラリ-を作成した。単離したNot1リンキングクロ-ンは5種であり、この数は予想していた数よりも少なく、さらにクロ-ンの数を増すためには新しい方法を開発する必要があった。NotIリンキングクロ-ンのうち3種でRFLPsを認めた(pNB46;BgIII,pKNE75;BgIII,pKNN3;NcoI)。遺伝子量効果により、2クロ-ンが第19染色体長腕に、1クロ-ンが短腕にあることが確認された。我々は、技術的な問題であるパルス電場ゲル電気泳動法(PFGE)や上記のNotIリンキングクロ-ンの作成などの経験を有するため、FADの原因遺伝子座位を決定した後、FAD遺伝子の単離同定までの準備はすでにできていると考える。