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新花成物質の単離・同定と光周的花成誘導機構の分子生物学的解析

新开花物质的分离鉴定及光周期开花诱导机制的分子生物学分析

基本信息

批准号：
01660510
负责人：
竹葉剛
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01660510/
关键词：
花成物質フロリゲンアサガオアオウキクサ

项目摘要

(1)アオウキクサ(Lemna paucicostata 151)を検定植物として用いて、アサガオおよびアオウキクサのリン酸buffer抽出液をゲルろ過し、それぞれの分画ごとの花成誘導活性を調べると、分子量約100K、20〜30K、および5〜10K付近に顕著な活性が存在した。(2)この高分子性花成誘導物質の化学的正体を知るために行なった予備的観察によると5〜10K成分は、酸・アルカリに対して比較的安定であり、熱処理(100℃、15min)では失活しないこと、10%TCAで沈殿すること、20〜30K成分はproteinase K処理により、活性・紫外吸収とも5〜10K成分へと低分子化(ゲルろ過で見る限り)すること、100K成分は熱処理(100℃、15min)により変性し沈殿すること、等が明らかになった。これらの性質は、通常、タンパク質(ポリペプチド)に見られる性質である。(3)高分子性花成誘導物質の化学的正体を知るために、アオウキクサ抽出物を硫安分別し、さらにゲルろ過(BioGel A1.5m)・イオン交換クロマト(Pharmacia MonoQ)・逆相クロマト(Pharmacia ProRPC)等を組み合わせ、活性と一致するsingle peakを得た。この画分をNative PAGEで分離すると、銀染色で一本のバンドが120K付近に検出された。同画分をSDS-PAGEで分離すると、60K付近に2本のバンドが検出され、活性はその部分から回収された。このSDS-PAGEからの回収画分をendopeptidaesで処理し、逆相クロマト(Pharmacia PepRPC)で分離すると、約10本のピ-クが検出された。活性と一致するピ-クのアミノ酸配列を部分的に決定したが、その配列は既知タンパク質のいずれの部分ともホモロジ-を示さなかった。現在、どのような構造が花成誘導活性をもつのか検討中である。

(1)The molecular weight of Lemna paucicostata 151 is about 100K, 20 ~ 30K, 5 ~ 10K, and the activity is very high. (2)The chemical composition of the polymer flower-inducing substance is known to be stable, stable, and heat-treated at 5 ~ 10K.(100℃, 15min) Inactivation, 10% TCA, 20 ~ 30K, Proteinase K, Activity, UV Absorption, 5 ~ 10K, Low Molecular Weight, 100K, Heat Treatment (100℃, 15min), Change in Activity, and so on. The nature of this article is usually, usually, and qualitatively different. (3)The chemical composition of the polymeric flower-inducing substance is known as the normal substance, the active substance, the extract, the sulfur amine, the sulfur amine, the sulfur This picture was separated by Native PAGE and stained with silver at 120K. SDS-PAGE separation of the same species, 60K near the two sites were detected, and the active parts were detected. The SDS-PAGE analysis of the endopeptidaes was carried out by reverse phase chromatography (Pharmacia PepRPC), and about 10 samples were isolated. The activity is determined by the amount of acid in the mixture, and the amount of acid in the mixture is determined by the amount of acid in the mixture Now, the structure of the flower formation induction activity is very important.