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フィトクロームによる植物遺伝子の発現制御機構の解明

阐明光敏色素对植物基因表达的控制机制

基本信息

批准号：
63621508
负责人：
竹葉剛
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyoto Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63621508/
关键词：
レタスグルタミン合成酵素遺伝子フィトクローム

项目摘要

[結果](1)レタス芽生えからSarcosyl法により得たDNAをSau3AIを用いて部分分解し、λEMBL3をベクターとしてgenomic libraryを作製した。レタスGScDNAをプローブとしてスクリーニングした結果、positive clone2個を得た。mapping,southernにより全コード領域を含むことが確認できたクローンからブラスミドpUC118/119にサブクローンし、その塩基配列を決定した。その結果、レタスGSのコード領域は11のintronに分断されていることが判明した。遺伝子の発現制御に関係すると考えられる5'側領域には、TATA boxの他いくつかのdirectまたはinverted repeatが見出されたが、RuBisCO/ss遺伝子で光に感応すると報告されている配列や、フィトクローム依存遺伝子に多く見出される配列(CCTTATCAT)は、レタスGS遺伝子には見出すことができなかった。(2)レタス種子中で光照射後に合成されるGSmRNAの存在部位を知る目的で、insitu hybridizationを行なった。発芽直前の吸水種子から凍結切片を作製し、GScDNAをプローブとしてhybridizeしたところ、胚軸・子葉とも反応したが、特に表皮細胞が強く反応した。(3)リポキシゲナーゼについては、フィトクロームの効果がGSmRNA量の差として明確に観察される時期のレタス吸水種子からRNAを抽出し、Northernを行なったが、光による差を観察することができなかった。リポキシゲナーゼには多くのアイソザイムが存在するので、それらの知見が集積しつつあるダイズに材料を変更して、光の効果を調べている。

[Results] (1) The Sarcosyl method of レタスえからSarcosyl methodにより得たDNAをSau3AIをpartial decomposition of いてし, λEMBL3をベクターとしてgenomic libraryをproduced した. Result of レタスGScDNAをプローブとしてスクリーニングした, and 2 positive clones were obtained. mapping,southernにより全コード区をcontainingむことがconfirmationできたクローンからブラスミドpUC118/119にサブクローンし, その塩婩组をdeterminationした.そのRESULTS, レタスGSのコード区は11のintronに分されていることが知した.缝子の発开户にrelationsすると卡えられる5' side domainには、TATA boxのhimいくつかのdirectまたはinverted repeatが见出されたが、RuBisCO/ss伝子で光に干応するとreport されている配arrayや、フィトクロームdependence 伝子に多く见出される配array(CCTTATCAT)は, レタスGS 伝子には见出すことができなかった. (2) The purpose of synthesizing GSmRNA after irradiation with light is to know the location where it exists, and the insitu hybridization is to be done. The water-absorbing seeds of Naomae are frozen and sliced, and GScDNA is hybr. idize したところ, hypocotyl・cotyledon ともしたが, 特にepidermal cells がstrong くした. (3) The effect of リポキシゲナーゼについては, フィトクロームの GSmRNA amount is different and the period is clearレタス Water-absorbing seed からRNA を extracted し, Northern を row なったが, light による difference を観泽することができなかった.リポキシゲナーゼには多くのアイソザイムがexistent するので、それらの知See the collection of materials and the effect of light.