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新花成物質の単離・同定と光周的花成誘導機構の分子生物学的解析

新开花物质的分离鉴定及光周期开花诱导机制的分子生物学分析

基本信息

批准号：
02242210
负责人：
竹葉剛
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Kyoto Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02242210/
关键词：
ウキクサ花成物質フロリゲンポリペプチド

项目摘要

1)高分子性花成誘導物質の化学的正体を知るために、アオウキクサ抽出物から通常のタンパク質精製の手法で、活性物質を精製した。ゲル濾過(BioGelA1.5m)で分離される約120kDaの成分は、イオン交換(Pharmacia MonoQ)で2つの成分に分離された。そのうち、約0.8MNaClで溶出される成分は、逆相クロマト(Pharmacia PepーRPC)で単一のピ-クに分離後、N末側のアミノ酸配列が20個決定できた。2)そのアミノ酸配列を参考にして、ヌクレオチドを合成し、それをプロ-ブとして、アオウキクサcDNAライブラリ-をスクリ-ニングしたところ、約1.4kbおよび0.8kbのpositive cDNA cloneを得た。現在、その構造を解析中である。3)上述の研究経過のなかで、動物起源の既知タンパク質のなかに、弱い花成誘導活性を示すもののあることが判明した。薬品メ-カ-より購入したタンバク質標品をさらに精製したところ、タンパク質そのもが花成誘導活性を示したので、その精製タンパク質をTrypsin又はArginylendopeptidaseで処理後、逆相クロマトで分離したところ、そのうちの特定の断片のみが、花成誘導活性を示した。このペプチドは、遇然植物界の活性ペプチドと類似の構造を持っていたと考えられる。4)ウキクサに対して花成誘導活性を示すタンパク質は、植物組織中に通常高分子状態で検出されるが、植物が花芽を形成する条件、たとえばアサガオ・アオウキクサでは短日またはN欠条件、下で顕著に低分子化していることが観察された。この現象は、プロテア-ゼの人工基質を用いてもプロテア-ゼ活性の増大として観察されるので、植物が花芽を形成する条件下で、ある種のプロテア-ゼが誘導され、生理学的に活性なペプチド断片が遊離され結果として花芽が形成される、という機構が共通に存在する、という可能性(仮説)が強く示唆される。

1)Chemical properties of polymeric flower-inducing substances are known, extracted, purified, and active substances are purified. BioGelA1.5m was used to isolate the 120kDa component and Pharmacia MonoQ was used to isolate 2 components. After separation, the acid was dissolved in 0.8M NaCl and 20 components were determined. 2) A positive cDNA clone of about 1.4kb and 0.8kb was obtained from the cDNA library. Now, the structure of the structure of the analysis in. 3)The above studies have shown that the animal origin is well known, and the flower induction activity is weak. The quality of the product was refined and the flower induction activity was shown. The quality of the product was purified and Trypsin was treated with Arginylendopeptide. The reverse phase of the product was separated and the flower induction activity was shown. This kind of structure is similar to that of natural plants. 4) The flower induction activity of the plant tissue is shown in the following aspects: 1) the normal high molecular weight state of the plant tissue is detected in the flower bud formation condition of the plant tissue; 2) the low molecular weight state of the plant tissue is detected in the flower bud formation condition of the plant tissue; 3) the short molecular weight state of the plant tissue is detected in the flower bud formation condition of the plant tissue. These phenomena include the increase of flower bud activity under the condition of artificial substrate, the induction of flower bud formation under the condition of plant flower bud formation, the physiological activity of flower bud formation under the condition of artificial substrate, the existence of common mechanism, and the possibility of flower bud formation.