权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

太陽紫外線によってヒト皮膚細胞に誘発された突然変異の解析

太阳紫外线诱发人体皮肤细胞突变分析

基本信息

批准号：
02202229
负责人：
石崎寛治
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02202229/
关键词：
太陽紫外線突然変異 PCR 色素性乾皮症

项目摘要

本研究ではヒト皮膚細胞における太陽紫外線誘発突然変異の有無やその性質について知るために、紫外線に高感受性で日光曝露部に皮膚癌の多発する色素性乾皮症患者の皮膚癌組織における突然変異について解析を試みた。方法:色素性乾皮症患者の皮膚癌組織はホルマリン固定されパラフィン包埋の状態で保存されているものを、大阪大学医学部皮膚科より14例、京都大学医学部皮膚科より12例供与され本研究に用いた。これらの組織ブロックより5μm厚の薄切片を切り出し、微量遠心管にいれキシレンおよびエタノ-ルで洗浄し組織内外のパラフィンを除いた。PCR(Polymerase Chain Reaction)法によりHーras遺伝子の12、13番目のコドンおよび61番目のコドンを含むDNA断片をそれぞれ増幅させ、ナイロンフィルタ-上にスポットし固定した。Hーras遺伝子の12、13、61番目のコドンにおける野生型、突然変異型アミノ酸配列に対応するDNAシ-クエンスと相補的シ-クエンスを持つオリゴヌクレオチドを ^<32>Pでラベルしたものをプロ-ブにしてハイブリダイゼ-ションを行った。結果:野生型プロ-ブに対しては全ての皮膚癌組織からのDNAがハイブリダイゼ-ションを示したが、突然変異型プロ-ブに対しては、コントロ-ルとして用いた突然変異型Hーras遺伝子を持つことが知られている培養癌細胞のDNA以外は有意なハイブリダイゼ-ションを示さなかった。すなわち、ここで調べた色素性乾皮症患者の皮膚癌組織ではHーras遺伝子の12、13、61番目のコドンには突然変異は生じていないと結論される。

This study was conducted to investigate the nature of sudden changes induced by solar ultraviolet rays in skin cells and to analyze the sudden changes in skin cancer tissues of patients with xeroderma pigmentosum. Methods: Skin cancer tissues from patients with xeroderma pigmentosum were preserved in a fixed and embedded state. 14 cases from the Department of Dermatology, Osaka University School of Medicine, and 12 cases from the Department of Dermatology, Kyoto University School of Medicine were used in this study. A thin section of tissue 5μm thick was cut out and a micro-tube was used to remove the tissue inside and outside. PCR(Polymerase Chain Reaction) method is used to detect the DNA fragments of H-ras gene at positions 12 and 13, and to detect the DNA fragments at positions 61 and 62. H-ras gene 12, 13, 61 of the gene in the wild type, mutant, acid alignment of the corresponding DNA<32>-, and complementary-, and so on, to maintain the right to choose from. Results: Wild-type mutant DNA was detected in all skin cancer tissues, and the mutant DNA was detected in all skin cancer tissues. The results showed that there was a sudden change in the expression of Hras gene in the skin cancer tissues of patients with xeroderma pigmentosum.