アルキル化変異原処理によるマウス生殖細胞のDNA損傷とその修復

烷化诱变剂诱导小鼠生殖细胞DNA损伤及其修复

基本信息

  • 批准号:
    02202247
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.64万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1990
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1990 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本年度は、アルキル化変異原のうち、処理時、後期精原細胞あるいは前期精母細胞由来の仔マウス(F1)に極めて高い突然変異を誘発するメチルニトロソウレア(MNU)に焦点をしぼり、マウス生殖細胞のDNA塩基損傷と修復能をin vitroとin vivoで検出し、マウスにおけるMNUの遺伝毒性の機構を解明することを試みた。雄マウス(C3H/He,10週令)の精巣中の生殖細胞をBSA密度勾配溶液で分別し、分別細胞から抽出したタンパク質をメチル化塩基を含む基質DNAと反応させた後、基質DNA中のメチル化塩基をHPLCを用いて検出し、修復酵素活性を検索した。その結果、修復活性は、各細胞群ともタンパク質量に比例して増加したが、損傷塩基の種類別では、N3ーmethyl adenine(N3ーMA)に対して最も高く、次いでN7ーmethyl guanine(N7ーMG)で,06ーmethyl guanine(06ーMG)は最も低かった。生殖細胞群別では、3種のメチル化塩基とも全細胞群並びに前期精原細胞+精母細胞群が高く、MNUの遺伝毒性の標的生殖細胞を含む後期精原細胞+前期精子細胞群は後期精子細胞+精子群と同様に低活性値を示した。一方、精巣に ^3HーMNUを投与した後、生殖細胞を分別し、分別細胞からDNAを抽出し、抽出DNA中のメチル化塩基を定量した。その結果、3種のメチル化塩基の生成量はそれぞれ異なるが、分別細胞群間では差が少なかった。MNU処理後24時間の修復能は、N7ーMGとN3ーMAに対しては、その速度が異なるものの、各細胞群間の差がなかった。ところが、06ーMGに対しては、前期精原細胞+精母精原細胞+精母細胞群が最も高く、次いで後期精子細胞群+標的細胞を含む後期精原細胞+前期精子細胞群の修復能は最も低かった。これらの結果から、MNUにより遺伝毒性の標的細胞である後期精原細胞または前期精母細胞は、突然変異と密接に関連している塩基損傷06ーMGの修復能が低いため、F1に高率に突然変異を誘発することが考えられる。
This year は, ア ル キ ル change - different original の う ち, 処 when, late SSCS あ る い は early spermatocyte origin の seed マ ウ ス (F1) に め extremely high て い suddenly - different を 発 lure す る メ チ ル ニ ト ロ ソ ウ レ ア (MNU) に focus を し ぼ り, マ ウ ス reproductive cells と の salt based DNA damage repair を in vitro と in vivoで検 reports ウスにおける, ウスにおけるMNU cultural heritage 伝 toxicity <s:1> institution を explains する とを とを とを try みた. Male マ ウ ス (C3H/He, 10 weeks) の の germ cell in sperm 巣 を density hook with BSA solution で し respectively, respectively cell か ら spare し た タ ン パ ク qualitative を メ チ ル melt salt base を containing DNA と む matrix inverse 応 さ せ た, substrate DNA after の メ チ ル melt salt base を HPLC を with い て 検 し, repair enzyme activity を 検 cable し た. そ の results, repair active は, each cell group と も タ ン パ ク quality に proportion し て raised plus し た が, salt injury の categories で は, N3 ー methyl adenine (N3 ー MA) に し seaborne て high も く, most times い で N7 ー methyl guanine (N7 ー MG) で, 06 ー methyl guanine(06 <s:1> MG) った is the った lowest. Reproductive cells don't で は, three の メ チ ル melt salt base と も whole cells and び に early SSCS + high が く, spermatocyte group MNU の heritage 伝 を reproductive toxicity の target cells contain む late SSCS + early sperm cells は later sperm cells, sperm group と with others in numerical を に low activity in し た. Side and fine 巣 に ^ 3 h ー MNU を cast with し た, germ cell を し respectively, respectively cells after か ら DNA を spare し, take out the DNA の メ チ ル melt salt base を quantitative し た. The そ そ results showed that the production amounts of the three types of メチ メチ of the base <e:1> were <s:1> それぞれ different なるが, and the で <s:1> differences between the cell populations were が less な った った. MNU 処 の 24 time after repair can は, N7 ー MG と N3 ー MA に し seaborne て は, そ の speed が different な る も の の, each cell group difference between の が な か っ た. と こ ろ が, 06 ー MG に し seaborne て は, prophase SSCS + fine mother SSCS, spermatocyte group of the most high も く が, い で period sperm cells group + mark を む SSCS + late prophase sperm cells の could repair the most も は low か っ た. こ れ ら の results か ら, MNU に よ り heritage 伝 の target cell toxicity で あ る late SSCS ま た は early spermatocyte は, suddenly - different と contact に masato even し て い る salt base damage of 06 ー MG の repair can が low い た め, F1 に に high rate suddenly - different を 発 lure す る こ と が exam え ら れ る.

项目成果

期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Inoue,M.,T.Kurihara,M.Miyagoshi and S.Kondo: "MNUーinduced DNA damages and its repair in mouse germ cells" Mutation Research. 182. 361-362 (1987)
Inoue, M.、T. Kurihara、M. Miyagoshi 和 S. Kondo:“小鼠生殖细胞中 MNU 诱导的 DNA 损伤及其修复”突变研究 182. 361-362 (1987)。
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    0
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Inoue,M.,T.Kurihara,M.Miyagoshi: "DNA repair stuclies in mouse germ cells" Annual Repart of the Medieal Research Institute,Kanazawa Medieal Universtiy. 1. 250-255 (1990)
Inoue,M.,T.Kurihara,M.Miyagoshi:“小鼠生殖细胞中的DNA修复研究”金泽医科大学医学研究所年度报告。
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    0
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知道了