シトクロムPー450の酵素化学的性質とシトクロムPー450の臓器特性

细胞色素 P-450 的酶化学性质和细胞色素 P-450 的器官特征

• 批准号: 02217209
• 负责人: 市川 佳幸
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kagawa Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02217209/
• 关键词: シトクロムPー450; モノオキシゲナ-ゼ; ステロイドホルモン; コレステロ-ル側鎖切断酵素; フェレドキシン; ビタミンD_3活性化酵素; ヘム酵素; 膜酵素

シトクロムPー450依存性モノオキシゲナ-ゼ系酵素は、哺乳動物のほとんどの臓器や組織に分布している。しかも各臓器のシトクロムPー450には多くのアイソザイムが存在している。我々は脳内におけるステロイド代謝活性とその酵素であるシトクロムPー450依存性モノオキシゲナ-ゼの分布を研究した。その結果シトクロムPー450_<scc>やシトクロムPー450_<11>βが白質領域に局在していることを確認したが、活性はきわめて低いものであった。また、ウシ脳下垂体にもこれらの活性を認めた。加えて、25ーOHーD_31αーモノオキシゲナ-ゼ活性を認めた。この活性は現在まで腎臓や胎盤以外では認められていない。ヒツジの副腎皮質のフェレドキシンの一次構造を決定し、他の哺乳動物のフェレドキシンと比較検討した。またウシ副腎皮質と肝臓のミトコンドリアのフェレドキシンの蛋白質一次構造と蛋白化学的並びに遺伝子構造的性質を比較検討した。フェレドキシンの一次構造をC末端領域において、蛋白化学的方法と遺伝子構造的方法の結果は一致しなかった。その原因を解明するため、フェレドキシンのC末端領域のプロセッシングの役割について検討中である。シトクロムPー450_<11>βには2つのアイソザイムが存在するが、この両者を発現させ、その活性について検討した。その結果、シトクロムPー450_<11>βのアイソザイムの存在が確認された。Pー450_<11>βの2つのアイソザイムの全一次構造を決定した。シトクロムPー450_<scc>並びにシトクロムPー450_<11>βの酵素化学的特性についてレ-ザ-ラマン分光器やEPR(電子スピン共鳴装置)を使用し研究した。その結果、ミトコンドリア型シトクロムPー450はミクロソ-ム型シトクロムPー450とはヘム近傍の構造に異同があること、またフェレドキシンとシトクロムPー450の結合によりシトクロムP450のヘム近傍の構造が大きな影響を受けることが分かった。

シ ト ク ロ ム P ー 450 dependency モ ノ オ キ シ ゲ ナ - ゼ enzyme は, mammals の ほ と ん ど の viscera や distribution に し て い る. し か も each viscera の シ ト ク ロ ム P ー 450 に は more く の ア イ ソ ザ イ ム が exist し て い る. Within my 々 は 脳 に お け る ス テ ロ イ ド metabolic activity と そ の enzyme で あ る シ ト ク ロ ム P ー 450 dependency モ ノ オ キ シ ゲ ナ - ゼ の distribution を research し た. そ の results シ ト ク ロ ム P ー 450 _ < SCC > や シ ト ク ロ ム P ー 450 _ < 11 > に bureau in beta が white matter field し て い る こ と を confirm し た が, active は き わ め て low い も の で あ っ た. Youdaoplaceholder0, ウシ脳 The pituitary gland に ウシ脳 れら <s:1> active を recognizes めた. Add えて, 25 <s:1> OH <s:1> D_31α <s:1> モノ キシゲナ-ゼ active を recognize めた. The <s:1> <s:1> activity is present in the まで kidneys や outside the placenta で is found in the められて な な な. Youdaoplaceholder0 ヒ ジ ジ <s:1> the paradrenal cortex <s:1> フェレドキシ <e:1> a single structure を determines <s:1>, and other <s:1> mammals <s:1> フェレドキシ と と と are more likely to 検 and た are more likely to と. ま た ウ シ adrenal cortex と routine liver の ミ ト コ ン ド リ ア の フ ェ レ ド キ シ ン の protein a tectonic と protein chemistry and び に heritage 伝 tectonic nature を comparing beg し 検 た. フ ェ レ ド キ シ ン の を C at the end of a structure field に お い て, protein chemistry method と of 伝 sub structure method の は consistent し な か っ た. そ の reason を interpret す る た め, フ ェ レ ド キ シ ン の C terminal areas の プ ロ セ ッ シ ン グ の service cut に つ い て 検 beg in で あ る. シ ト ク ロ ム P ー 450 _ < 11 > beta に は 2 つ の ア イ ソ ザ イ ム が exist す る が, こ の struck the を 発 now さ せ, そ の active に つ い て beg し 検 た. Youdaoplaceholder0 そ された results, シト ロム ロムP そ 450_<11>β ア ア ソザ ソザ ム ム が existence が confirmation された. P <s:1> 450_<11>β <s:1> 2 ア ア ソザ ム ム を all one-time construction を determines <s:1> た. シ ト ク ロ ム P ー 450 _ < SCC > and び に シ ト ク ロ ム P ー 450 _ < 11 > beta の characteristics of enzyme chemistry に つ い て レ ザ - ラ マ ン optical splitter や EPR (electron ス ピ ン) echo mechanism を use し research し た. そ の results, ミ ト コ ン ド リ ア type シ ト ク ロ ム P ー 450 は ミ ク ロ ソ - ム シ ト ク ロ ム P ー 450 と は ヘ ム nearly alongside の structural similarities and differences between に が あ る こ と, ま た フ ェ レ ド キ シ ン と シ ト ク ロ ム P ー 450 の combining に よ り シ ト ク ロ ム P450 の ヘ ム nearly alongside の tectonic が big き な を by け る こ と が points か っ た.

项目成果

Yamazaki,M.: "Crystallization and comparative characterization of reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphateーferredoxin reductase from sheep adrenocortical mitochondria." Comparative Biochemistry and Physiology. 96B. 93-100 (1990)

Yamazaki, M.：“来自羊肾上腺皮质线粒体的还原烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸铁氧还蛋白还原酶的结晶和比较表征”，比较生物化学和生理学 93-100。

Ohnishi,J.: "Cytochrome Pー450ーlinked monooxygenase systems of bovine brain mitochondria." The International Journal of Biochemistry. 22. 1139-1145 (1990)

Ohnishi, J.：“牛脑线粒体的细胞色素 P-450 连接的单加氧酶系统。”国际生物化学杂志 22. 1139-1145 (1990)

Yamazaki,M.: "Some properties of the apoenzyme of NADPHーadrenoーferredoxin reductace from bovine adrenocortical mitochondria." The International Journal of Biochemistry. 22. 1147-1152 (1990)

Yamazaki, M.：“来自牛肾上腺皮质线粒体的 NADPH-肾上腺素-铁氧还蛋白还原酶的一些特性。”国际生物化学杂志 22. 1147-1152 (1990)。

Kawamoto,T.: "Cloning and expression of a cDNA for human cytochrome Pー450_<aldo> as related to primary aldosteronism." Biochemical and biophysical Research Communications. 173. 309-316 (1990)

Kawamoto, T.：“与原发性醛固酮增多症相关的人细胞色素 P-450_<aldo> 的 cDNA 的克隆和表达。” 173. 309-316 (1990)。

Iwahashi,K.: "Studies of the immunohistochemical and biochemical localization of the cytochrome Pー450_<scc>ーlinked monooxygenase system in the adult rat brain." Biochimica et Biophysica Acta. 1035. 182-189 (1990)

Iwahashi, K.：“成年大鼠大脑中细胞色素 P-450_<scc> 连接的单加氧酶系统的免疫组织化学和生化定位的研究。Biochimica et Biophysica Acta。”1035. 182-189 (1990)