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レチノイン酸合成酵素であるシトクロムP-450モノオキシゲナーゼ系の研究

细胞色素P-450单加氧酶系统视黄酸合酶的研究

基本信息

批准号：
04670164
负责人：
市川佳幸
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kagawa Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

レチノイドの高等動物の肝臓における代謝酵素はこれまでアルコール脱水素酵素、アルデビド脱水素酵素、アルデビド酵化素並びにキサンチン脱水素酵素等の報告があるが、レチナールから形成されるレチノイン酸はミクロソームのシトクロムP-450依存性モノオキシゲナーゼ系によることを証明した。その根拠はCOによる阻害と光照射による酵素活性の回復、しかも作用スペクトルの吸収極大値が450nmにあること、シトクロムP-450依存性モノオキシゲナーゼ系による分子状^<18>O_2レチノイシ酸への導入実験、及びH_2^<18>Oの^<18>Oはレチノイン酸に添加されないこと、またNADPH-シトクロムP-450還元酵素坑体による阻害等による実験結果に基づいてである。我々は更に生理活性物質として注目されているレチノイン酸の合成酵素(シトクロムP-450_<RA>)の酵素化学的特性を確立するための研究を行なった。肝ミクロソームには約50種のシトクロムP-450のアイソザイムが局在するが、ミクロソームにおけるレチノイン酸生合成がシトクロムP-450アイソザイムのどのP-450アイソザイムによるかを予測するために各種シトクロムP-450誘導剤の影響を調べた。即ちフェノバルビタール、アルコール、β-ナフトフラボン、3-メチルコランスレン並びにクロトリオール等を使用した。フェノバルビタールよりレチノイン酸合成活性が誘導され、アクチノマイシン Dにより阻害された。その結果、シトクロムP-450アイソザイムはII型のファミリーであると思われた。現在、フェノバルビタール誘導ウサギ肝ミクロソームよりレチノイン酸合成酵素(シトクロムP-450)の精製を進めている。

The report of metabolic enzymes in the liver of higher animals, such as alpha-dehydrin enzyme, alpha-dehydrin enzyme, alpha-dehydrin enzyme and alpha-dehydrin enzyme, proves that alpha-dehydrin enzyme is dependent on P-450 in the formation of alpha-dehydrin enzyme. The enzyme activity recovery, inhibition and absorption maximum of CO and light irradiation were observed at 450nm, 450nm and 450nm, respectively. The molecular structure of NADPH P-450 and NADPH P-450 were observed at 450 <18><18><18>nm and 450 nm, respectively. We are also interested in establishing the chemical properties of the enzyme P-450_, which is a physiologically active substance<RA>. About 50 kinds of P-450 inducers were produced by acid synthesis in the system. The effects of P-450 inducers were modulated by the prediction of P-450 inducers. That is, the use of all kinds of colors, such as color, β-color, 3-color, and so on. The activity of acid synthesis is induced and inhibited by the enzyme. The results of the test show that the P-450 has a high performance and low cost. At present, the purification of acid synthase P-450 is carried out by inducing it to be purified.