哺乳類における卵母細胞の成熟と退行の調節因子について

哺乳动物卵母细胞成熟和退化的调节因子

基本信息

批准号：
02222204
负责人：
佐藤英明
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02222204/
关键词：
哺乳類卵母細胞卵成熟細胞死グリコスアミノグリカン

项目摘要

1.卵母細胞の成熟の調節因子マウスの卵母細胞を卵胞から分離し体外で培養すると自然に減数分裂を再開始するが、この再開始はcAMP誘導体により抑制される。今回カルモジュリンアンタゴニストW7の影響を調べ、W7は濃度依存的にマウス卵母細胞の減数分裂の再開始を抑制することを認めた。また培養開始15分までに起こる現象にW7が関与することを明らかにした。W7による抑制は部分的に可逆的であるが、cAMP誘導体による卵核胞の崩壊の抑制を増強させる作用のあるhypoxanthine,estrogen,testosterone,progesteroneはW7の作用を増強しないことを認めた。またcAMP誘導体とW7とともに培養された卵母細胞の形態を電子顕微鏡などにより観察し、その作用様式の異なることを明らかにした。W7はcAMP誘導体よりも、より初期の段階で抑制する傾向にあった。私達は先に顆粒膜細胞から卵母細胞の減数分裂を抑制するペプチド(meiosisーarresting factor,MAF)を分離しているが、本ペプチドはW7に似た作用様式をもっていた。以上の結果は減数分裂の休止が複数の物質で制御されていることを示すものである。またMAFの遺伝子の同定も進展させている。ブタの顆粒膜細胞のcDNAライブラリ-を作製し、PCR法により目的の遺伝子を増幅させるとともに構造を解析している。また卵母細胞の成熟に間接的に影響をおよぼす血管造成因子も同定した。2.卵母細胞の退行の調節因子培養卵母細胞の成熟現象を解析する過程で卵丘細胞に卵母細胞の退行を抑える作用を認め、卵丘細胞の産生分泌物を蓄積すると考えられる卵胞液から卵母細胞の延長因子を分離している。本年度はブタの系を用いて検討し、その事実を確認するとともに、活性因子はヒアルロン酸を骨格とする分子であると結論した。

1。卵母细胞成熟的调节剂：当从卵泡中分离出小鼠的卵母细胞并在体外培养时，减数分裂自然重新开始，但是这种重新开始被cAMP衍生物抑制。我们研究了钙调蛋白拮抗剂W7的作用，发现W7以浓度依赖性方式抑制小鼠卵母细胞中的减数分裂。还发现W7参与了在孵育15分钟之前发生的现象。尽管W7的抑制作用是部分可逆的，但我们发现具有增强cAMP衍生物的卵巢核小囊泡分解的抑制作用的低黄嘌呤，雌激素，睾丸激素和孕酮的作用并没有增强W7的作用。此外，通过电子显微镜或类似观察到的卵母细胞的形态与cAMP衍生物和W7一起培养，揭示了它们的作用有所不同。与营地衍生品相比，W7在更早的阶段倾向于受到抑制。我们以前从颗粒细胞中分离了减数分裂因子（MAF），但该肽具有类似于W7的作用方式。以上结果表明减数分裂静止由多种物质控制。 MAF基因的鉴定也正在发展。制备了猪颗粒细胞的cDNA文库，并通过PCR扩增靶基因并分析结构。我们还确定了间接影响卵母细胞成熟的血管生成因子。 2。卵母细胞回归的调节因子：在分析培养的卵母细胞成熟现象的过程中，在苏硫糖细胞中观察到抑制卵母细胞回归的作用，并从卵泡液中分离出卵母细胞的延长因子，从卵泡液中分离出来，这被认为是堆积累积细胞的分泌。今年，我们使用猪系统研究了结果，证实了这一事实，并得出结论，活性因子是透明质酸作为骨架的分子。