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胸腺リンパ球ー間質細胞複合体の形成と調節機構の研究

胸腺淋巴细胞-基质细胞复合物的形成及调控机制研究

基本信息

批准号：
02256215
负责人：
日合弘
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

胸腺リンパ球の発生、増殖、免疫学的機能の獲得には胸腺固有の間質細胞との細胞間相互作用が重要な役割を果たしている。我々は胸腺リンパ腫組織からリンパ腫細胞と胸腺間質細胞からなる細胞複合体を高い再現性で分離する方法を開発した。リンパ腫細胞は複合体形成下では容易に試験管内で増殖維持され、この中から間質細胞に依存せず増殖する細胞が出現するに至る進展を示した。リンパ腫あるいは正常胸腺から分離した間質細胞を用いて細胞複合体形成のin vitroでの定量法を確立して解析したところ、複合体形成は細胞間の接触とこれに続くリンパ腫細胞の間質細胞下へのもぐりこみの2段階よりなっていた。この第一段階は各種動物の血清中の因子により競合的に抑制された,同様の複合体形成は正常胸腺リンパ球の内、大形芽球について認められた。マウス血清中の同因子の耐熱性で、PH5.4で当電点沈澱する巨大分子であり、分子量の異なる3つの画分が区別された。イオン交換樹脂、ハイドロキシアパタイトへの吸着および溶出の条件を決定し、これらの性質を組み合わせ、活性因子の精製を進めている。なお、フィブロネクチンおよび同活性ペプタイドには抑制活性はみられなかったが、ヘパリンには明瞭な抑制活性が認められた。また百日咳トキシンは強力な抑制活性を持っていた。これら因子の作用点の異同については検索中である。リンパ腫胸腺より複合体形成能のある間質細胞多数を分離し、自家製ならびに国内外の研究者から交換により入手した抗胸腺上皮モノクロ-ナル抗体を用い免疫細胞化学的に解析したところ、すべて被膜下層および髄質型のサブセットに属していた。これまで入手した抗体の中には複合体を抑制する活性のあるものは見られなかった。

The development, proliferation, and immunological functions of the thymus gland are important for the cell-to-cell interaction of the stromal cells inherent in the thymus gland. We have developed a highly reproducible method for isolating thymic stromal cells from thymic tissue. It is easy to test the growth and maintenance of stromal cells under the formation of tumor cell complexes, and it is also easy to show the progress of cell proliferation in stromal cells. A quantitative method for the determination of cell-to-cell contact between normal thymus and stromal cells was developed. In the first stage, the factors in the serum of various animals are inhibited by competition, and the same complex is formed by the normal thymus and large buds. The heat resistance of the same factor in serum, pH 5.4, and the difference of molecular weight between large molecules and large molecules are different. Exchange resin, adsorption and dissolution conditions, composition and purification of active factors For example, the activity of the enzyme is similar to that of the enzyme, and the inhibitory activity is similar to that of the enzyme. A potent inhibitor of pertussis. The differences and similarities of the action points of the factors are not found in the search. Most of the stromal cells in the thymic complex can be isolated, self-produced and exchanged by domestic and foreign researchers. The immunocytochemical analysis of anti-thymic epithelial antibodies belongs to the subcapsular and cytoplasmic types. This is the first time I've seen an antibody complex.