课题基金 / 基金详情

細胞のエンドサイト-シスを利用した膜融合を用いるドラッグデリバリ-

細胞のエンドサイト-シスを利用した膜融合を用いるドラッグデリバリ-
利用细胞内吞作用通过膜融合进行药物递送
批准号:
03205066
负责人:
大西 俊一
金额:
$1.15万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份:
1991
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1991 至 --

项目摘要

项目成果

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インフルエンザウイルスの膜融合活性タンパク質(HAタンパク質)の活性部位を模した酸性pHー依存的膜融合活性ペプチド(HAペプチド)及び、そのアナログペプチド数種を合成し、タンパク質・核酸・薬剤等を封入したリポソ-ム表面に吸着・共有結合させた擬似インフルエンザウイルス(以下人工ウイルス)を調製すれば、細胞のエンドサイト-シスを利用したエンドソ-ム経由の全く新しい細胞内物質導入法の開発ができる。本年度は、人工ウイルスのkey pointとなる弱酸性pH(<6.0)での膜融合活性及び、赤血球溶活性などのbiomembraneに対する活性を有する酸性ペプチド(E5,E5L)を合成し、蛍光法・電顕観察を中心とした物理化学的手法により、融合活性に必要不可欠なペプチドの機能モチ-フを研究した。その結果、HAペプチドのN末端10残基程が活性発現に必要な両親媒性ヘリカル構造をつくる為の「核」となっていることを明らかにした。また、培養細胞に取り込まれた人工ウイルスの挙動をリアルタイムに近い時間スケ-ルでモニタ-することは、今後の人工ウイルス改良に必要不可欠である。本年度は、リポソ-ムを蛍光共鳴エネルギ-移動(RET)を起こす2種の蛍光性脂質(エネルギ-供与体;NBDーPE,エネルギ-受容体;R_<18>)でラベルし、COSー1細胞に非特異的にエンドサイト-シスさせ、高感度ビデオ付き蛍光顕微鏡などで追跡することができた。また、リポソ-ムがエンドソ-ムやリソソ-ムで破壊されたり、それらの膜と融合すると、蛍光性脂質がそれらエンドソ-ムの膜上で拡散、RETが解消し、エネルギ-供与体(NBDーPE)の蛍光強度が増加し蛍光寿命が長くなることを、時間分解顕微蛍光法やセルソ-タを駆使し、単一細胞内での挙動を定量的に測光、追跡できた。
期刊论文(12)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
鍵和田 聡: ""細胞内小胞輸送を制御する蛋白質"" 細胞. 23. 23-27 (1991)
Satoshi Kagiwada:“‘控制细胞内囊泡运输的蛋白质’”Cell。23. 23-27 (1991)
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
村田 昌之: "pHーdependent membrane fusion and vesiculation of phospholipid large unilamellar vesicles induced by amphiphilic anionic and cationic peptide" Biochemistry. (1992)
Masayuki Murata:“两亲性阴离子和阳离子肽诱导的磷脂大单层囊泡的 pH 依赖性膜融合和囊泡”生物化学(1992)。
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
堺 立也: "Microtubleーdisrupting drugs blocked delivery of endocytosed transferrin to the cytocenter,butdid not affectreturn of fransferrin to plasma membrane" J.Biochem.109. 528-533 (1991)
Tatsuya Sakai:“微管破坏药物阻断内吞转铁蛋白向细胞中心的输送,但不影响转铁蛋白返回质膜”J.Biochem.109(1991)。
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
楠見 明弘: "Development of a streakーcameraーbased timeーresolved microscope fluorimeter and its application to studies of membrane fusion in single cells'" Biochemistry. 30. 6517-6527 (1991)
Akihiro Kusumi:“基于条纹相机的时间分辨显微镜荧光计的开发及其在单细胞膜融合研究中的应用”《生物化学》30. 6517-6527 (1991)。
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
6
    細胞のエンドサイトーシスを利用した膜融合を用いるドラッグデリバリー
    • 批准号:
      04205070
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额:
      $1.02万
    • 财政年份:
      1992
    • 负责人:
      大西 俊一
    • 依托单位:
    細胞のエンドサイト-シスを利用した膜融合を用いるドラッグデリバリ-
    • 批准号:
      02205062
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额:
      $1.92万
    • 财政年份:
      1990
    • 负责人:
      大西 俊一
    • 依托单位:
    フェライト超微粒子を用いた細胞特異的な新機能材料の作製と細胞の膜動輸送の研究
    • 批准号:
      01604557
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额:
      $1.28万
    • 财政年份:
      1989
    • 负责人:
      大西 俊一
    • 依托单位:
    フェライト超微粒子を用いた細胞特異的な新機能材料の作製と細胞の膜動輸送の研究
    • 批准号:
      63604552
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额:
      $0.96万
    • 财政年份:
      1988
    • 负责人:
      大西 俊一
    • 依托单位:
    国内基金
    海外基金
    拉沙病毒膜融合机制的固体核磁共振研究
    • 批准号:
      JCZRQNB202600019
    • 项目类别:
      省市级项目
    • 资助金额:
      --
    • 批准年份:
      2026
    • 负责人:
    • 依托单位:
    功能化纳米脂质体的构建及其膜融合介导的mRNA递送研究
    • 批准号:
      Z25B040003
    • 项目类别:
      省市级项目
    • 资助金额:
      --
    • 批准年份:
      2025
    • 负责人:
      燕云峰
    • 依托单位:
    双膜融合仿生铜纳米颗粒通过激活cGAS-STING通路增效三阴性乳腺癌PD-1单抗的作用机制研究
    • 批准号:
      2025JJ60589
    • 项目类别:
      省市级项目
    • 资助金额:
      --
    • 批准年份:
      2025
    • 负责人:
      李伟
    • 依托单位:
    膜融合型梭状核壳载体的构建及其增强siRNA胞内递释的机制研究