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フェライト超微粒子を用いた細胞特異的な新機能材料の作製と細胞の膜動輸送の研究

利用超细铁氧体颗粒制备新型细胞特异性功能材料及细胞膜传输研究

基本信息

批准号：
01604557
负责人：
大西俊一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

強磁性体フェライト超微粒子に生物学的リガンドを結合させ、それを生理活性物質の制御投与に利用する目的で、その基礎固めとして、エンドサイト-シスにおける膜動輸送の分子機構を高磁場勾配分離によって研究した。1)径約5nmフェライトをアシアロガングリオシドとリン脂質でコ-トし分散させた磁気化リガンドを灌流肝細胞に投与した。リガンドは灌流液から速やかに肝細胞に取り込まれた。他の多くの特徴から、本リガンドは、本来肝細胞が取り込むタンパク質リガンドとかなりよく似た特徴を有していることが確認できた。2)上記リガンドを取り込んだ肝細胞を取りだし、ホモジネ-トを磁性細線を充填したカラムに通し、高磁場下でリガンドを取り込んだエンドソ-ムを分離捕集した。フェライトリガンドの細胞への取り込み時間を変化させることによって異なった特徴のエンドソ-ムが得られ、それらを詳しく分析した。取り込み5分までのエンドソ-ムは、比重1.05付近にピ-クを呈し、その中にリガンドとその受容体が共に見いだされるのに対し、15分のものは1.05のピ-クと共に1.08のものがみられた。1.08の分画にはリガンドは存在するが、受容体の含量が非常に低かった。これらは、それぞれリガンド輸送の過程で順次生じる初期及び後期エンドソ-ムであると考える。3)上述の研究で明らかになった各エンドソ-ムの組成を分析した。これらの脂質組成は大差ないが、各分画に共通するタンパク質とそれぞれ固有のタンパク質を検出した。エンドソ-ムは固有のタンパク質を保持しながら、特徴的なタンパク質が膜と共に負荷離脱し、これらがエンドソ-ムの細胞内標的部位への到達、構成要素の選別を担うと推定した。これらのタンパク質に対する単クロ-ン抗体を作成しそれを用いたより詳細な分析を続けている。

Ferromagnetic ultra-fine particles are used for biological separation, preparation and utilization of physiologically active substances, and for research on molecular mechanisms for membrane kinetic transport and separation in high magnetic fields. 1)The diameter of 5nm is about 5nm. The diameter of 5 nm is about 5 nm. The liver cells were isolated from the perfusate. He has a lot of characteristics, and the original liver cells are identified. 2)In the above note, the liver cells are isolated and captured by magnetic thin wires filled with high magnetic field. The time of selection of cells from different species is changed, and the characteristics are analyzed in detail. For example, the weight of 5 minutes, the weight of 1.05 minutes, the weight of 1.08 minutes, the weight of 1.05 1.08 The content of the receptor is very low. The process of transportation is sequentially generated in the early stage and the late stage. 3)The above research shows that the composition of each component is analyzed. The lipid composition varies greatly and is common to all components. The intrinsic quality of the protein is maintained, the characteristic quality of the protein is maintained, the common load is separated, the position of the intracellular standard is arrived, and the selection of constituent elements is estimated. The quality of the product is very high.