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機能の創生を目指すオリゴヌクレオチドの化学合成

旨在创造功能的寡核苷酸的化学合成

基本信息

批准号：
03242101
负责人：
大塚栄子
金额：
$ 8.83万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03242101/
关键词：
RNA化学合成リボザイム核酸高次構造

项目摘要

1.RNAの配列と特異的切断RNAの配列特異的切断法の一つとしてRNaseHを用いる場合、ハイブリダイズさせるDNA相補鎖を4塩基とし、両端に2'ーOーメチルヌクレオチドを結合させることによって切断を限定できるが、高次構造を持つtRNAに対しては長鎖相補鎖をハイブリダイズさせることによって、効率よく反応が進行することを見出した。これを用いてtRNAの組み換えを行い、蛍光プロ-ブの導入を行った。リボザイムを用いる配列特異的切断の構造活性相関を調べるために、安定なル-プを持つハンマ-ヘッド型リボザイムを設計し、活性を調べたところ、従来のものに比べて活性が上昇することがわかった。2.バクテリオファ-ジT4RNAの自己切断部位に対応するRNAのミニル-プを化学合成し、切断部位を同定した。3.ハンマ-ヘッド型リボザイムのNMRによる構造解析ハンマ-ヘッド型リボザイムのステム部分を化学合成し、NMRによってイミノプロトンを解析することにより水素結合を証明した。必須配列中の二つのグアノシンをイノシンに置換することにより、2位のアミノ基が活性に必要なことを見出した。4.ハンマ-ヘッド型リボザイムの結晶化ハンマ-ヘッド型リボザイムのル-プ部分の三次元構造を知るためには、X線解析による構造解析が必要であるので今年度は結晶化を試み、微少結晶を得た。

1. RNA alignment and specific cleavage tRNA alignment and specific cleavage methods are used in the case of RNase H, DNA phase lock, 4-base, 2-terminal, 2-O, 2-terminal, 2-terminal, 2-terminal This is the first time I've ever seen a woman in my life. The structural activity of the disjunction is regulated, stable and stable. The structural activity of the disjunction is regulated, stable and stable. The structural activity of the disjunction is increased. 2. The chemical synthesis of RNA and the determination of the cleavage site of T4RNA 3. Chemical synthesis and NMR structural analysis of H-type hydrocarbon molecules The two positions in the sequence must be replaced by the two positions, and the two positions must be activated. 4. Crystallization and X-ray analysis of three-dimensional structures are necessary for this year's crystallization and microcrystallization.