アンチセンスRNA制御と標的RNAの機能構造

反义RNA调控和靶RNA的功能结构

• 批准号: 06258211
• 负责人: 伊藤 建夫
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06258211/
• 关键词: ColE2群プラスミド; ColE2プラスミド; アンチセンスRNA制御; 翻訳制御; 翻訳開始機構; RNA構造; ステム・ループ構造; RNA; RNA相互作用

ColE2プラスミドDNA複製系では、プラスミドの必須複製開始蛋白質(Rep蛋白質)の発現が、そのmRNAに対するアンチセンスRNAにより転写後の段階で阻害される。アンチセンスRNAによって翻訳開始領域が覆われることなしに阻害がおこる仕組みを解明することを目的として研究を行い、本年度は次のような成果を得た。1.アンチセンスRNAとRepmRNAの二次構造を生化学的に明らかにした。両RNAの機能構造が少々異なっている可能性を示唆する結果を得た。2.アンチセンスRNAの結合によりRepmRNA上の翻訳開始コドンを含む領域の構造が変化することを明らかにした。RepmRNAの構造に翻訳可能な構造と不可能な構造があることが示唆された。3.アンチセンスRNAがin vitro無細胞蛋白質合成系においてRep蛋白質の合成を阻害しうることを明らかにした。この系を利用してアンチセンスRNAがRepmRNAのステム・ループ構造(開始コドンから約70塩基)と結合すればその翻訳を阻害しうることを明らかにした。4.RepmRNAの翻訳効率を著しく下げる塩基置換変異を翻訳開始コドンから約70塩基上流と翻訳領域内とに見い出した。これらの変異の解析によりRepmRNA上の翻訳開始に重要な塩基配列や構造が明らかになることを期待している。5.ColE2群プラスミド11種の複製領域の塩基配列を決定した。Rep蛋白質合成の阻害活性の特異性の異なる5種のアンチセンスRNAの内4種の特異性群では、RepmRNAとの相互作用に重要なステム・ループ構造のループ部分の塩基配列(9残基)が同一であった。この塩基配列に類似の塩基配列は種々のアンチセンスRNAの系で見い出され、機能上、進化上の重要性を示していると考えられる。

ColE2 プ ラ ス ミ ド DNA replication system で は, プ ラ ス ミ ド の must start replication proteins (Rep) protein の 発 が, そ の mRNA に す seaborne る ア ン チ セ ン ス RNA に よ り planning after write の Duan Jie で resistance against さ れ る. ア ン チ セ ン ス RNA に よ っ て 訳 start field が fu わ れ る こ と な し に resistance against が お こ る blackstone group み を interpret す る こ と を purpose と し て を line い, this year's は の よ う た を な achievements. 1. ア ン チ セ ン ス RNA と RepmRNA の secondary tectonic を biochemistry に Ming ら か に し た. The functional structure of two Rnas が few 々 differences なって る る possibilities を suggest する results を た た. 2. ア ン チ セ ン ス RNA の combining に よ り RepmRNA の turn 訳 began コ ド ン を containing が の む field structure - the す る こ と を Ming ら か に し た. RepmRNA <s:1> structure に translation 訳 may な structure と cannot な structure がある <s:1> とが indicates された. 3. ア ン チ セ ン が ス RNA in vitro cell free protein GeChengXi に お い て の Rep protein synthesis を resistance against し う る こ と を Ming ら か に し た. こ の is を using し て ア ン チ セ ン ス RNA が RepmRNA の ス テ ム · ル ー プ structure (start コ ド ン か ら about 70 salt base) と combining す れ ば そ の turn 訳 を resistance against し う る こ と を Ming ら か に し た. 4. RepmRNA の turn 訳 を the working rate し く under げ る salt base displacement - different を 訳 start コ ド ン か ら about 70 salt base upper と turn 訳 field と に see い out し た. こ れ ら の - different analytical に の よ り RepmRNA の turn 訳 began に important な salt column base with や tectonic が Ming ら か に な る こ と を expect し て い る. 5.ColE2 group プラス ド ド11 kinds of <s:1> replication domain <s:1> base bindings を determine た た. Rep の resistance against active の specificity protein synthesis の different な る five の ア ン チ セ ン ス RNA の within four の specificity of で は, RepmRNA と の interaction に important な ス テ ム · ル ー プ tectonic の ル ー プ part の salt base with column (9 residues) が same で あ っ た. こ の salt base with column に similar の salt base with column は kind 々 の ア ン チ セ ン ス RNA の wearing で い out さ れ, function and evolutionary importance の を し て い る と exam え ら れ る.